目的研究经多聚左旋赖氨酸修饰的山羊脱钙骨基质(demineralized bone matrix decorated with poly-L-lysine,PLL-DBM)的性能,为选择性细胞滞留技术(selective cell retention,SCR)提供一种对骨髓干细胞黏附性能良好的富集基质材料。方法将取材于山羊股骨近端的松质骨去皮质理化处理制成脱钙骨基质(demineralized bonem atrix,DBM),用多聚左旋赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)对其进行修饰。扫描电镜分析其显微结构;氨基酸成分分析检测PLL与DBM的复合情况;通过纤维母细胞集落形成单位(CFU-F)计数,检测山羊PLL-DBM对骨髓干细胞的富集效果;在山羊横突间融合模型中,通过X线片及组织学评价其成骨能力。结果PLL-DBM具有天然网状孔隙结构系统,空隙内修饰有PLL形成的蜘蛛网样结构;PLL与DBM能较好地复合;山羊PLL-DBM对骨髓干细胞富集效果明显优于空白DBM(P<0.01)。PLL-DBM的成骨能力与自体髂骨相当。结论山羊PLL-DBM对骨髓干细胞有较好的富集效果,成骨能力强,是一种理想的富集基质材料。
目的观察术中富集骨髓千细胞构建的组织工程骨在山羊脊柱横突间融合的成骨效果,为组织工程骨探索一种新型的构建方法。方法将多聚左旋赖氨酸(poly—L—lysine,PLL)修饰于山羊脱钙骨基质(demineralized bone matrix,DBM)制备成基质材料(PLL—DBM);以山羊横突间隙为植骨模型,观察PLL-DBM富集骨髓细胞构建的组织工程骨(ⅠA组)的成骨能力;对照组为自体髂骨组(ⅠB组)、DBM富集骨髓组(ⅡC组)、空白DBM组(ⅡD组)。于术后第16周取融合段标本行X线片、三维CT及CT值检测和生物力学检测,对比分析、评价其成骨能力。结果X线表现:ⅠA组、ⅠB组融合范围基本相同,明显较ⅡC组宽,ⅡD组基本无融合。三维CT:ⅠA组的CT值为(696.76±102.75)HU,ⅠB组的CT值为(766.03±69.24)HU,二者差异无统计学意义(P〉0.05),均明显较ⅡC组高(P〈0.05),ⅡC组CT值较ⅡD组高(P〈0.01)。生物力学性能:ⅠA、ⅠB两组最大载荷、抗弯强度比较差异均无统计学意义(P〉0.05),ⅠA组较ⅡC组高(P〈0.01,0.05),ⅠB组较ⅡC组高(P〈0.01),ⅡC组较ⅡD组高(P〈0.01)。结论PLL—DBM术中富集骨髓干细胞快速构建的组织工程骨是一种理想的组织工程骨,其成骨能力与自体髂骨相当。
目的确定SH3GL1是否为青少年特发性脊柱侧凸(AIS)致病基因。方法对2007年11月至2008年12月收治的56例AIS患者进行研究。其中男性15例,女性41例;年龄8~22岁,平均15岁;侧凸Cobb角25°~110°,平均67.5°。采取以家系为基础的“病例一同胞对照,病例.亲属对照”研究方案,根据AIS候选基因SH3GL1核酸序列,以10个外显子为重点设计引物对,进行PCR扩增、克隆和测序,用Vector NTI Advance 10.3进行序列对比分析,确定碱基突变的有无,并进行蛋白质结构预测分析。结果共发现12处碱基变异,分别位于第2(3处)、4(1处)、5(4处)、6(1处)、8(1处)和10(2处,非编码区)6个外显子上。其中先证者mRNA第515位碱基如果为T,则形成终止密码子,导致蛋白阅读框发生改变,蛋白质序列预测分析显示编码截短蛋白,从而影响蛋白质的结构。结论SH3GL1可能是AIS的致病基因之一。