杨弘远 作品数:118 被引量:519 H指数:14 供职机构: 武汉大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 文化科学 自然科学总论 更多>>
紫菜苔精细胞的大量分离和生活力保存 被引量:12 1991年 本工作改良了原有的渗透压冲击法和研磨法,从紫菜苔(Brassica campestris var.purpurea)花粉粒中分离出大量生活精细胞。根据荧光素二醋酸酯测定,上述二法生活精细胞的分离率分别为34%和86%。应用改良的研磨法分离的精细胞在4℃低温下最长可存活一周。对影响精细胞分离率和生活力的若干因素进行了比较。细胞学观察表明,从一粒花粉刚分离出来的一对姊妹精细胞成对相连,其中一个具长尾状延伸物,尾部也呈FDA荧光反应。对精细胞分离后的形态变化进行了观察。 莫永胜 杨弘远关键词:精细胞 生活力 向日葵离体孤雌生殖过程的组织化学研究 被引量:1 1986年 对向日葵未受精胚珠培养所诱导的孤雌生殖过程进行了DNA、RNA、蛋白质与多糖的组织化学研究,同时也观察了体内胚胎发育的相应变化以作比较。离体孤雌生殖原胚发生初期的组织化学特征和体内合子胚相近;其中,卵细胞质中嗜派洛宁颗粒和卵核中孚尔根反应的动态值得注意。在后期,离体孤雌生殖胚状体和体内合子胚在淀粉动态上呈现显著的差异,这可能是前者不能顺利分化时的一种生理表现。 魏正元 杨弘远关键词:向日葵 胚珠培养 Ca^(2+)载体A23187对烟草生殖核分裂的调节 被引量:1 1997年 用Ca2+载体A23187研究了高钙水平对烟草离体花粉管内生殖核分裂的影响。结果表明,A23187抑制花粉管生长,影响其正常形态,调节生殖核分裂,较高浓度(10-6mol/L、10-5mol/L)A23187可阻断生殖核分裂,而较低浓度(10-7mol/L)的效应因处理时间而异:萌发6h处理显著抑制生殖核分裂;而10h、14h处理早期促进分裂,随后逐渐转为抑制。较高浓度还改变生殖核的正常形态,使之趋于圆形。着重讨论了高钙调节生殖核分裂的作用过程。 范六民 杨弘远 周嫦关键词:烟草 钙离子 根癌农杆菌的高效电激转化 被引量:11 1995年 利用电激法将双元载体质粒PBI121导入根癌农杆菌AGL-1并获得较高转化效率.探讨了不同电激条件对转化效率的影响,并检测了CaMV35S启动子启动GUS基因在根癌农杆菌中的表达.结果表明:根癌农杆菌电激转化的最适电激条件为11kV/cm,21.5μF,电场强度是影响转化效率的关键因素.当质粒DNA浓度从0.2mg/L增加至0.6mg/L时,转化效率呈线性增加.细菌密度对转化效率也有一定影响.最高转化效率为每μg质粒DNA1.7×105转化子.组织化学反应证实CaMV35S能启动GUS基因在根癌农杆菌中表达. 施华中 杨弘远 周嫦 陈正华关键词:根癌农杆菌 农杆菌介导法 水稻卵细胞与合子的分离 被引量:11 1998年 水稻卵细胞与合子的分离韩红梅赵洁施华中杨弘远周嫦(武汉大学生命科学学院植物生殖生物学研究室武汉430072)关键词水稻,卵细胞,合子,分离ISOLATIONOFEGGCELLSANDZYGOTESINORYZASATIVAHANHongMeiZ... 韩红梅 赵洁 施华中 杨弘远 周嫦关键词:水稻 卵细胞 合子 水稻原胚和刚启动分化的幼胚cDNA文库的构建与分析 被引量:4 2000年 Two cDNA libraries were constructed from microdissected 214 rice proembryos (2-3 d after pollination) and 121 just differentiating young embryos (3-5 d after pollination) respectively through RT_PCR technique. The primary libraries had a total of 3.7×10 6 phages for the proembryos and a total of 2.5×10 6 phages for the just differentiating young embryos, in which 96% of the phages were recombinants. Insert sizes ranging from 400 bp to 3?500 bp were obtained. All of the above mentioned accorded with the general requirements of cDNA library construction. 陈绍荣 李师弢 吕应堂 杨弘远关键词:水稻 原胚 CDNA文库 基因表达 植物激素的免疫细胞化学定位 被引量:6 2002年 本文介绍了植物激素免疫细胞化学定位研究中常用抗原与抗体的制备、激素小分子在植物细胞内的原位固定及其在激素生理研究中的应用。 杨军 赵洁 杨弘远关键词:植物激素 免疫细胞化学定位 抗体制备 扩散 烟草脱外壁花粉与完整花粉电激导入效果的比较研究 1998年 利用膜不通透的荧光染料钙黄素作为指示剂,比较了烟草脱外壁花粉与完整的未萌发花粉和萌发花粉电激导入的效果.研究了电激过程中的电场强度、脉冲持续时间、电激液的介质成分和浓度对三者的导入率及电激后花粉萌发率的影响.结果表明,从未萌发花粉、萌发花粉到脱外壁花粉,导入率逐渐升高,证实了脱外壁花粉由于摆脱了外壁的阻碍而有利于外源物质的电激导入.但电激后花粉萌发率的变化规律相反.荧光指示剂的应用便于优化选择适宜电激参数,为外源基因的导入实验提供了参考依据. 王劲 施华中 周嫦 杨弘远关键词:烟草 烟草脱外壁花粉人工萌发与离体授粉实验系统的建立 被引量:7 1997年 通过花蕾低温处理、花药漂浮培养与花粉短时酶解程序可脱去花粉外壁,分离出烟草(Nicotianatabacum L.)的脱外壁花粉。研究了分离过程中的酶液渗透压、培养基中聚乙二醇(PEG)与蔗糖以及添加水解乳蛋白等因素对脱外壁花粉人工萌发的影响。在含30%PEG-6000与0.1%水解乳蛋白的D_2培养基中,萌发率最高达57.8%;花粉管生长正常,培养24h后一半以上的花粉管中生殖细胞分裂成精子。用微滴和贴滤纸小片的方法将30~40粒脱外壁花粉授予柱头上,近一半能萌发花粉管并在花柱中生长。采取授粉后子房培养方法,获得了种子与幼苗。从而建立了脱外壁花粉离体授粉实验系统。讨论了脱外壁花粉人工萌发与离体授粉实验系统的建立对于研究外壁在花粉萌发中的生物学功能以及开拓新的转基因技术等方面的意义。 王劲 夏惠君 周嫦 杨弘远关键词:烟草 花粉 萌发 授粉 植物性细胞、受精及胚胎发生离体操作系统的创建与实验生物学研究 被引量:1 2005年 我们从事植物生殖的实验研究已有近30年历史.20世纪80年代中后期,我们认识到实验胚胎学的发展趋势是由器官、组织操作向细胞、原生质体操作的水平提升,同时加强研究的多学科性与综合性,从而提出了植物实验生殖生物学与生殖细胞工程的研究思路. 杨弘远 周嫦 孙蒙祥 赵洁关键词:生殖系统 胚胎 实验生物学