徐智芳 作品数:4 被引量:13 H指数:2 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室 更多>> 发文基金: 天津市科技发展战略研究计划项目 国家高技术研究发展计划 天津市应用基础与前沿技术研究计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
pig7基因在急性白血病细胞中的表达及其临床意义 被引量:2 2007年 目的检测 pig7基因在急性白血病(AL)细胞中的表达水平及其临床意义,在基因甲基化调控方而探讨 pig7基因表达异常的可能机制。方法应用实时定量逆转录 PCR(RT-PCR)方法对138例 AL 患者、21名正常人骨髓标本以及6个白血病细胞株进行了 pig7转录本的检测,并在全反式维甲酸(ATRA)作用下观察 NB4细胞分化效应及 pig7基因表达情况。进行限制性内切酶分析以鉴定白血病细胞中存在的 pig7转录剪接体。通过甲基化特异性 PCR(MSP)检测白血病细胞 pig7基因启动子区域是否存在过度甲基化。结果 AL 进展期(包括初治、复发/难治)患者骨髓细胞 pig7 mRNA 相对表达水平与正常骨髓细胞相比明显降低(RQ 中位数分别为0.62和18.30,P<0.01),其中急性髓系白血病(AML)与急性淋巴细胞白血病(ALL)差异无统计学意义,而初治组与复发/难治组比较 pig7mRNA 水平差异有统计学意义,前者明显高于后者(RQ 中位数分别为1.43和0.16,P<0.05)。pig7低表达患者完全缓解率也较低(P<0.05)。NB4细胞经 ATRA 诱导分化后 pig7表达水平由1.61±0.72增至44.75±3.93(P<0.01)。酶切结果提示白血病细胞中仅存在 SIMPLE 剪接体。在 K562、HL-60及 Nalm-6细胞 pig7启动子区域存在过度甲基化,而 U937、NB4和 kasumi-1细胞中该区域非甲基化状态占优势。结论 pig7基因在 AL 的表达下调为白血病发病机制的探讨和疗效预测提供了新的思路。 王东海 王洋 王敏 王敏 刘航 徐智芳 饶青 孟继虹关键词:DNA甲基化 白血病细胞系中抑癌基因PTEN启动子区甲基化状态检测及其去甲基化研究 被引量:7 2008年 目的探讨抑癌基因PTEN表达沉默的机制及诱导PTEN表达对白血病细胞的作用。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation specific PCR,MSP)检测白血病细胞系HL-60、Nalm-6、Raji、KG-1a、U937、NB4、K562中PTEN基因启动子区域甲基化状态;用甲基化转移酶抑制剂5-氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理白血病细胞,MSP检测甲基化状态的改变、RT-PCR检测PTEN mRNA水平的改变、瑞特染色观察细胞形态学改变、膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin V/PI)标记染色检测细胞凋亡。结果检测的白血病细胞系中HL-60、Nalm-6、Raji、KG-1a、U937细胞PTEN基因显示超甲基化状态,而NB4和K562细胞显示低甲基化状态;5-Aza-CdR处理HL-60和Nalm-6细胞后,PTEN基因甲基化降低、mRNA表达水平则逐渐增高,并呈剂量依赖性,细胞出现凋亡现象。结论PTEN基因启动子区异常甲基化可能导致该基因转录表达失活或沉默,甲基化抑制剂可以诱导PTEN表达,并引起白血病细胞凋亡。 李敏 刘航 徐智芳 刘向荣 王洋 饶青 王建祥 王敏关键词:白血病 基因 甲基化 特异性聚合酶链反应 中期因子在急性白血病中的表达及其意义 被引量:2 2008年 目的检测中期因子(Midkine,MK)基因在白血病患者中的表达,初步探讨其与白血病的关系。方法应用实时定量逆转录PCR(RQ—RT—PCR)方法,对181例急性白血病(AL)患者、31名正常人骨髓标本进行了中期因子转录本的检测。结果中期因子在初治和复发AL患者、AL完全缓解(CR)患者及正常人骨髓细胞均有表达。初治和复发AL患者中期因子表达明显高于正常人及CR患者(P〈0.01及P〈0.05)。而正常人与CR患者相比差异无统计学意义。中期因子的表达在B细胞急性淋巴细胞白血病(B—ALL)各亚型(包括pro—B—ALL,common—B—ALL,pre—B—ALL)及各年龄段均有显著升高(P〈0.01),且与T细胞急性淋巴细胞白血病(T—ALL)、急性杂合性白血病及急性髓系白血病(AML)各FAB亚型间差异均有统计学意义(P值均〈0.01);与正常人相比,M2型患者中期因子表达明显升高(P〈0.01),与AML其他FAB亚型相比差异亦有统计学意义(P值均〈0.05);M3患者中期因子表达也较正常人明显升高(P〈0.05),但与除B—ALL和AML—M2外的其他白血病亚型间差异无统计学意义。CD34^+患者较CD34^-患者中期因子表达显著升高(P〈0.01),AML1-ETO融合基因阳性的M2患者较阴性的M2患者中期因子表达显著升高(P〈0.05)。结论B—ALL、AML—M2和AML—M3型白血病患者中均存在中期因子基因不同程度的表达升高,为白血病诊断及其发病机制的研究提供了新的方向。 王洋 林冬 王东海 徐智芳 刘家卓 刘向荣 王建祥 王敏关键词:白血病 TSC基因的生物学作用 被引量:2 2008年 TSC基因TSC1和TSC2分别编码蛋白hamartin和tuberin,最初在结节性硬化症中发现其存在突变,作为肿瘤抑制因子,除参与mTOR信号途径调节细胞的生长和增殖外,还参与细胞黏附,细胞内吞等过程的调节。 徐智芳 王建祥关键词:结节性硬化症 MTOR