张国辉
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 100株中国HBV全长基因序列的克隆及分析
- [目的]：不同基因型的HBV可能有不同的生物学特性,病毒基因型可能与长期感染的病程进展及对干扰素的治疗反应有关。目前我国HBV全长序列较少,本研究通过建立一种高效快速的HBV全基因组克隆方法,进行病毒基因序列测定并获取一...
- 张国辉
- 关键词：肝炎病毒乙型聚合酶链式反应
- 文献传递
- 新型超耐热菌的单链DNA结合蛋白表达和纯化及其增强DNA、cDNA的合成
- 2012年
- 目的表达和纯化一种新的来自于超耐热菌（thermococcuskodakarensis）KODl的单链DNA结合蛋白（缩写为kod—ssb），并探讨其对DNA、cDNA合成的影响。方法采用Transrtta（DE3）表达kod-ssb，用镍柱亲和层析纯化，经SDS—PAGE分析检测表达纯化后的kod—ssb。使用PCR及qRT／qPCR检测kod-ssb对DNA、cDNA合成的影响。结果将质粒pETlla—kod转化Transetta（DE3）中，得到重组菌株Transetta（pETlla—kod），经IPTG诱导。由SDS—PAGE分析可见表达的约40×103的特异条带；使用人类B球蛋白基因作为模板分别扩增5kbp，9kbp和13kbp目的片段，结果加了kod—ssb的PCR目的片段比没加的产量高很多，而且kod—ssb显著降低了PCR反应的非特异性扩增。以流感细胞培养上清抽提的RNA为模板，实施RT-／qPCR反应。结果加kod的平均Ct值是19．42，而没加的为22．15。结论kod-ssb在未来将被用于增强DNA和cDNA的合成。
- 贾晓伟张国辉史海燕
- 关键词：DNA聚合酶链反应
- 高滴度感染力H5N1亚型禽流感病毒假病毒颗粒的制备
- 2012年
- 利用一个瞬时共转染系统,将H5N1亚型禽流感病毒的血凝素(Hemagglutinin,HA)蛋白与神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)蛋白整合到鼠白血病病毒假病毒颗粒表面,包装成表达HA与NA的假病毒颗粒,通过透射电子显微镜形态学观察、感染滴度分析、血凝试验和中和试验研究其生物学特性。研究获得了高滴度感染力的H5N1假病毒颗粒(H5N1Pseudotyped particle,H5N1Pp),H5N1Pp的感染力滴度为108Pp/mL,形态、血凝活性及中和特性均与野生H5N1病毒相似,结果为H5N1病毒受体、HA与NA的功能、中和抗体、抗病毒药物开发研究的开展建立了平台。
- 刘熙君郭志平沈立萍王岳史海燕张国辉张寻毕胜利赵洪兰
- 关键词：鼠白血病病毒禽流感病毒H5N1亚型假病毒神经氨酸酶
