唐明
- 作品数：39 被引量：104H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金武汉市卫生局科研项目更多>>
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- 胞外钙对豚鼠耳蜗Deiters细胞钾电流的调制
- 2005年
- 为观察胞外钙对豚鼠耳蜗单个离体Deiters细胞钾电流的调控作用并探讨其机制,实验记录了:Deiters细胞在正常细胞外液和无钙外液中的全细胞钾电流(whole cell K+ currents,Ik),并分析了其电生理学特性的改变。结果观察到,Deiters 细胞与在正常细胞外液中相比,在祛除细胞外液中的Ca2+后,IK电流幅值明显增加,弦电导值亦明显增加,但其平衡电位未明显改变。在无钙外液中,Ik电流的反转电位向超极化方向明显移位,更接近于按照Nernst方程得出的K+理论平衡电位;而且其稳态激活曲线亦向超极化方向明显移位,但其激活趋势与正常相比无明显改变。此外,观察了Deiters细胞中钙抑制性钾电流的电流-电压关系和电导-电压关系,发现两者均呈“S”形,提示此钙抑制性钾电流可能存在2种不同的钾电导成分。由此,推测可能有两种机制参与胞外钙对Deiters细胞钾电流的调控:(1)Deiters细胞中的IK通道可能存在一个Ca2+敏感结构域,胞外Ca2+可能通过改变此结构域而对IK电流产生调制;(2)Deiters细胞中可能存在一种新型的双相门控性钾通道或钾通道耦联型受体或是一种新型的钾通道亚型,祛除胞外Ca2+可激活此新型钾电导而对IK电流产生调制。由此推测,在听觉形成过程中,胞外钙浓度下降可以对Deiters细胞的全细胞钾电流产生调制,从而更有利于Deiters细胞内K+外流,进而有效地缓冲外毛细胞周围的K+浓度;而且还可以使Deiters细胞产生更快的复极化并有利于维持其静息状态。
- 常青龚树生丁娟唐明JürgenHescheler
- 关键词：耳蜗调制
- β-淀粉肽-(1-40)对电压依赖性钙电流的作用及铝和银杏内酯B对该作用的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨不同时期配制的 β 淀粉肽 (1 4 0 ) (Aβ1 40 )对大鼠海马CA1区锥体神经元高电压依赖性钙通道电流 (IHVA)的作用并观察铝和银杏内酯B (GB)对该作用的影响。方法 应用全细胞膜片钳技术记录海马神经元IHVA电流 ,并观察药物对其的作用。结果 (1)细胞外给予老化处理的Aβ1 40 可以增强IHVA幅度 ,Aβ1 40 的作用具有不可逆性和浓度依赖性 ;新鲜配制的Aβ1 40 对IHVA几乎没有影响。 (2 )Aβ1 40 增强IHVA的作用可以被L 型钙通道阻断剂nifedipine抵消。 (3)PKA的抑制剂H 89可以抵消Aβ1 40 对IHVA的增强作用。 (4)Aβ1 40 增加IHVA的作用可被 1 0mmol/L的AlCl3 进一步增加。 (5 )细胞外给予GB对正常的IHVA没有影响 ,但可抵消Aβ1 40 对IHVA的增强作用。结论 β 淀粉肽(Aβ)通过增强IHVA可引起胞内钙超载 ,这可能是其产生神经毒性作用的机制之一 ,铝可以加强Aβ的毒性作用 ;GB可通过抑制钙离子内流对神经元起一定保护作用。
- 陈蕾刘长金唐明胡新武李爱张亮品骆红艳胡晓玲
- 关键词：AΒ1-40银杏内酯B细胞外淀粉
- COS-7细胞上转染的人类三型酸敏感离子通道的生理学和药理学特性被引量：3
- 2006年
- 目的研究人类三型酸敏感离子通道(hASIC3)的生理学和药理学特性。方法应用全细胞电压钳技术检测转染在COS-7细胞上的hASIC3通道的生理学和药理学特性。结果hASIC3通道能通过迅速降低胞外pH值而被激活,并在酸性环境中迅速脱敏。脱敏后的hASIC3通道恢复到50%备用状态时所需的时间为(618±21)ms。胞外pH值在(6.40±0.05)时可使50%的hASIC3通道激活。pH值低于8时hASIC3通道的利用率降低,在生理状态pH值条件下,通道利用率降低了大约50%。阿米洛利能特异性阻断快速激活快速失活hASIC3通道且半数抑制浓度为(12.5±3.0)μmol/L。hASIC3通道的电流电压(I-V)关系曲线在很宽广的电压范围内呈线性关系(-80^+80 mV),翻转电位为(+43±5)mV。结论hASIC3通道作为一种酸感受器,可能对感受人体pH值的变化起很重要的作用。
- 郑云洁唐明刘长金宋元龙骆红艳胡新武Jurgen Hescheler
- 关键词：酸敏感离子通道COS-7细胞阿米洛利
- Kv1.2、Kv1.5、Kv2.1钾通道在缺氧性肺血管收缩中的作用被引量：7
- 2004年
- 目的和方法雄性Wistar大鼠随机分为两组常氧对照组和低氧组。用酶消化的方法获得单个大鼠肺内动脉平滑肌细胞(PASMC)。采用全细胞膜片钳技术,记录PASMC静息膜电位(Em)和电压门控性钾通道电流(IKv),通过细胞内灌流Kv12/Kv15/Kv21抗体混合液(1∶125),探讨Kv12、Kv15、Kv21钾通道在缺氧性肺血管收缩(HPV)中的作用。结果①低氧组膜电位明显去极化,由(-518±08)mV去极到(-472±07)mV,P<001,IKv与常氧组相比显著降低,在测试电压-30mV时,IKv由(616±058)pA/pF降为(331±037)pA/pF(P<001)。②细胞内灌流Kv12/Kv15/Kv21抗体混合液可显著抑制常氧对照组PASMC的IKv,使Em去极化,然而细胞内灌流Kir21/Kir23/Kir41(1∶125)抗体混合液对常氧对照组PASMC的IKv和Em无显著影响。③细胞内灌流Kv12/Kv15/Kv21抗体混合液和Kir21/Kir23/Kir41抗体混合液对低氧组PASMC的IKv和Em均无显著影响。结论Kv12、Kv15、Kv21可能是氧敏感型通道,并介导了低氧性肺血管收缩。
- 杜以梅唐明刘长金洪志刚柯琴梅狄久芳骆红艳胡谋先胡新武席姣娅唐碧Jurgen Hescheler
- 关键词：肺动脉钾通道膜片钳术
- 乙型肝炎病毒诱导小鼠抗β_1-肾上腺素能受体抗体的致心律失常作用机制被引量：2
- 2005年
- 目的:探索乙型肝炎病毒诱导的抗β1-肾上腺素能受体抗体致病作用及机制。方法:乙型肝炎病毒4次接种小鼠(n=30),并记录心电图。ELISA法检测抗体,光镜下观察心肌和肝脏的病变。免疫荧光显示该抗体与豚鼠心肌细胞能否结合。辛酸提取法提纯小鼠IgG。膜片钳技术观察抗体对豚鼠心肌细胞电生理特性的影响。结果:小鼠该抗体的产生与乙型肝炎病毒接种有关。实验小鼠心脏和肝脏未出现明显的组织病理改变,但6只小鼠可出现束枝传导阻滞、窦性停博、室性早搏等心律失常,其抗体均阳性。免疫荧光显示抗体能与豚鼠心肌细胞结合。该抗体使APD20、APD50、APD90分别延长36.46%、29.63%和12.40%,且使L型钙电流峰值增加(49.67±16.01)%。结论:乙型肝炎病毒诱导小鼠产生的抗β1-肾上腺素能受体抗体可导致多种心律失常的发生,该抗体介导心肌细胞L型钙电流增加可能是其致心律失常的机制之一。
- 刘坤廖玉华王朝晖李淑莉王敏曾令兰唐明
- 关键词：抗体心律失常L型钙电流
- 拉莫三嗪对大鼠急性分离海马神经元钠电流的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨拉莫三嗪对酶机械联合急性分离的大鼠海马神经元细胞的钠通道的作用。方法采用7～10 d大鼠,以链丝菌蛋白酶E加吸管吹打法制备海马神经元,应用全细胞膜片钳技术,观察拉莫三嗪对急性分离大鼠海马神经元电压依赖性钠通道的作用。结果拉莫三嗪使电压依赖性钠电流幅值减小,100μmol.L-1拉莫三嗪使钠电流幅值减少(15.35±3.01)%,这种作用具有浓度依赖性;使钠电流的激活曲线向去极化方向漂移(3.8±0.9)mV,稳态失活曲线超极化方向漂移(1.8±0.9)mV。结论拉莫三嗪对电压依赖性钠离子通道有阻断作用。
- 笱玉兰朱遂强唐明罗利俊陈国华
- 关键词：拉莫三嗪钠电流全细胞膜片钳技术
- 胞外pH降低对肺动脉平滑肌细胞膜上电压门控性钾通道的调节
- 2007年
- 目的观察pH对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)钾电流的调控作用并探讨其机制。方法用全细胞膜片钳技术记录在正常细胞外液和不同pH的灌流液中,PASMCs膜上电压门控性钾电流大小(IKv),并分析了其电生理学特性的改变。结果①胞外pH降低可快速可逆性抑制IKv,与对照相比(pH7.4),pH值为7.0、6.5、6.0时,+60mV处的峰电流的抑制率分别为16.93%±2.47%、33.03%±2.13%、41.59%±6.53%,电流-电压关系曲线右下移。②胞外pH为7.0、6.5、6.0时,使电压依赖性Gk-Em向去极化方向移动。同时使半激活电压增加。结论在缺氧所致缺氧性肺血管收缩反应(HPV)的发生中,胞外pH的降低可参与对IKv的调节,从而使细胞膜去极化,IKv减小,电压门控钙通道打开,平滑肌细胞收缩,这可能是缺氧导致HPV的机制之一。
- 李娟莉唐明段亚琦Juergen Hescheler
- 关键词：肺动脉电压门控性钾通道PH膜片钳
- 大鼠肺动脉平滑肌细胞的分离及电压门控性钾电流的记录方法被引量：6
- 2005年
- 目的介绍一种大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的急性分离方法并观察电压门控性钾电流电生理特性。方法应用胶原酶和木瓜蛋白酶联合消化法获得大鼠PASMCs,利用全细胞膜片钳技术记录PASMCs膜上的电压门控性钾通道(Kv)电流。结果在相差显微镜下观察大鼠PASMCs呈舒展梭形,边界清晰,有完整的细胞膜,胞浆均匀,数量多,活性好。结论用酶急性分离的大鼠PASMCs,容易进行全细胞膜片钳记录,方法简单、稳定、可靠。
- 骆红艳唐明杜以梅刘长金唐碧席姣娅洪志刚Jurgen Hescheler
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞电压门控性缺氧性肺血管收缩反应电压门控钾通道钾电流
- 肾上腺髓质素对豚鼠心室肌细胞L-型钙通道的作用及其信号转导机制被引量：2
- 2004年
- 目的 :研究肾上腺髓质素 (adrenomedullin ,ADM)抑制豚鼠心室肌细胞L -型钙通道的信号转导机制。方法 :应用全细胞膜片钳技术 ,记录应用ADM(1- 10 0nmol·L-1)前后L -型钙电流 (ICa ,L) ,以及分别记录应用ADM特异性受体拮抗剂ADM2 2 -52 (10 0nmol·L-1) +ADM(10 0nmol·L-1)、蛋白激酶A (PKA)特异性拮抗剂H - 89(10μmol·L-1) +ADM(10 0nmol·L-1)、蛋白激酶C (PKC)特异性拮抗剂PKC19-3 6(10 μmol·L-1) +ADM(10 0nmol·L-1)、PKC特异性激动剂PMA(1μmol·L-1)前后ICa ,L。结果 :ADM(1- 10 0nmol·L-1)浓度依赖性地抑制豚鼠心室肌细胞ICa ,L,并可被ADM2 2 -52 (10 0nmol·L-1)完全阻断 ;H - 89(10 μmol·L-1)对ADM抑制ICa,L的作用无影响。PKC19-3 6(10μmol·L-1)可完全阻断ADM对ICa ,L的抑制效应 ,且PMA(1μmol·L-1)可模拟ADM对ICa ,L的抑制效应。结论 :ADM作用于特异性ADM受体可浓度依赖性地抑制豚鼠心室肌细胞ICa,L,此作用有可能与PKC激活相关。
- 柯琴梅杜以梅冯义柏唐明狄久芳
- 关键词：肾上腺髓质素信号转导
- 小鼠胚胎干细胞分化心肌细胞过程中基因表达情况和电生理特性研究被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨小鼠胚胎干细胞在体外分化心肌样细胞过程中αMHC、Anf、MLC2v基因的表达情况以及分化的心肌样细胞的电生理特点。方法:将转染PαMHC-EGFP小鼠D3胚胎干细胞系,体外诱导分化心肌样细胞,应用RT-PCR检测0d、3d、5d、7d、10d、14d拟胚体(EB)细胞中αMHC、Anf、MLC2v基因的表达情况,同时应用膜片钳技术,观察心肌样细胞的电生理特性。结果:在EB形成的7d和8d可见EB内出现有绿色荧光蛋白表达的心肌样细胞群;RT-PCR结果显示αMHC基因表达在EB体形成第7d,而在10d、14d跳动的心肌样细胞中该基因表达增强(P<0·05),而Anf、MLC2v基因的表达仅出现在心肌样细胞;膜片钳记录的心肌样细胞动作电位显示,73·5%(n=34)的细胞记录到典型心房肌细胞动作电位[APD90=(78·4±3·1)ms];20·5%细胞表现为起搏细胞动作电位[APD90=(112·6±5·5)ms];1个细胞显示了典型的心室肌细胞动作电位的特征(APD90=200ms)。结论:在心肌样细胞分化的早期可见αMHC、Anf、MLC2v基因的表达,这3种基因可为心肌发育过程中的特征性基因并对心肌发育起调节作用。而此干细胞系分化的心肌样细胞主要为心房肌细胞和起搏细胞。
- 于艳秋段亚琦张义侠唐明J.Hesheler张海鹏
- 关键词：胚胎干细胞细胞分化
