同戈
- 作品数:8 被引量:16H指数:3
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- 猪细小病毒M2株在ST细胞中培养条件优化被引量:5
- 2013年
- 为探索猪细小病毒M2株在ST细胞中培养的适宜条件,将其分别以同步接毒法和单层接毒法接种于ST细胞,比较其接种效果,选择更有效的方法,再对其培养条件(细胞浓度、血清种类、血清含量和收毒时间等)进行优化。结果表明,同步接种法相对于单层接种法更具优势。同步接毒,采用含量为5%的胎牛血清或6%的新生牛血清培养,细胞浓度控制在3.2×104~1.5×105个/mL内,在病毒接种后,80%以上细胞出现细胞病变时收获病毒,能获得较高病毒含量的病毒液。本研究结果为制备高效价的PPV- M2株病毒抗原提供了数据资料。
- 唐满华陈瑞爱何玲李春红梁桂益廖翠银陈振波同戈
- 关键词:猪细小病毒ST细胞
- 猪细小病毒PPVM2株在ST细胞上最佳培养条件的研究
- 猪细小病毒(Porcine parovirus,PPV)可以引起母猪繁殖障碍,对养猪业具有重大影响。通过将本实验室分离、鉴定并通过细胞传代弱化的PPV M2株进行增殖条件的研究。研究结果表明,当细胞长成90%单层时接种培...
- 陈瑞爱同戈裴仉福何玲
- 关键词:猪细小病毒ST细胞
- 文献传递
- Toll样受体9介导的免疫激活研究进展被引量:4
- 2010年
- 在细菌和DNA病毒的基因组中广泛存在着以非甲基化的胞嘧啶—鸟嘌呤核苷酸为核心的CpG基序。作为一种病原相关的分子模式(pathogen-associated molecular pattern,PAMP),含有CpG基序的寡聚脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucle-otides,CpG ODN)能激活包括B淋巴细胞和类浆细胞在内的多种免疫细胞,并诱导产生以Th1型细胞免疫反应为主的免疫应答。CpG ODN在哺乳动物细胞中的受体是Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)家族中的Toll样受体9(TLR9)。TLR9所介导的免疫激活作用在某些传染病的预防、新型疫苗佐剂的开发及过敏性疾病和癌症的治疗中有着巨大的应用前景。
- 同戈孙瑶
- 关键词:CPG基序TOLL样受体
- PPV培养细胞的选择及在ST细胞中的增值规律
- 2013年
- 猪细小病毒毒株在不同细胞系上的生长情况不尽相同,如不能掌握其规律,将难以生产出优质的疫苗.本研究对PPV(M2株)在PK15和ST细胞上生长情况进行了研究,得出ST细胞更适合其生长。之后将PPVM2毒株同步接种于ST细胞,用测定HA和TCID50的方法研究了其在ST细胞上增殖的基本规律。病毒在接种后24h可在细胞较稀的区域看到非常轻微的病变,病毒TCID50测定结果也表明,接毒后17h,病毒已经明显增殖。当病毒培养到约40h,其TCID50即接近高峰,并进入平台期,病毒的TCID50已达到10^7.5/0.hmL以上。继续培养,最高可达到10^8.5/0.1mL以上,且直到122h,也不见明显降低。病毒培养40-122h,不管是用Gibco血清还是用Hyclone血清培养病毒,其差异都非常小,变异系数都在5%以内。病毒HA价也出现同样的平台期,但HA价的平台期出现比TCID50的平台期出现更晚。
- 唐满华陈瑞爱何玲李春红梁桂益廖翠银陈振波同戈
- 关键词:猪细小病毒ST细胞
- 重组细胞因子在禽类疫苗中的应用进展被引量:3
- 2009年
- 细胞因子是免疫系统的重要调节因子,具有明显的免疫佐剂效应。随着鸡细胞因子(IL-2,IL-6,IL-12,IL-18,IFN-γ等)相继克隆成功,重组细胞因子在禽类疫苗中的应用研究也逐步深入。研究表明,用原核、真核载体或者病毒构建的细胞因子重组质粒或表达的重组蛋白,能很好的发挥免疫佐剂的活性。论文综述了细胞因子的免疫增强机制,以及重组细胞因子在现代禽类疫苗中的应用概况。
- 何玲陈瑞爱唐秀英黄文科同戈
- 关键词:细胞因子免疫佐剂疫苗
- 猪细小病毒PPVM2株在ST细胞上最佳培养条件的研究
- 猪细小病毒(Porcineparovirus,PPV)可以引起母猪繁殖障碍,对养猪业具有重大影响。通过将本实验室分离、鉴定并通过细胞传代弱化的PPVM2株进行增殖条件的研究。研究结果表明,当细胞长成90%单层时接种培养,...
- 陈瑞爱同戈裴仉福何玲
- 关键词:猪细小病毒ST细胞
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型流行株的分离及其感染性克隆的构建被引量:2
- 2014年
- 【目的】通过分离一株猪圆环病毒2型(PCV2)流行毒株,并构建其感染性克隆,为研究PCV2基因功能提供操作平台。【方法】通过PCR方法,从疑似患断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的仔猪淋巴结中鉴定为猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)2型阳性。把阳性病料接种PK-15细胞传代培养,在培养物中扩增出PCV2的全基因序列。对扩增出的全序列进行序列测定,并与GenBank中公布的5株广东PCV2分离株(GD-pz、GD-gj、GD-jm、GD-ss和GD-sz)进行同源性分析。通过EcoRⅠ和SalⅠ将PCV2全基因组序列克隆进pUC18载体中,获得含PCV2 GD-zq株全基因组单拷贝的重组质粒pPCV2-GD-zq,再通过SalⅠ和HindⅢ把另一个全长拷贝克隆进pPCV2-GD-zq质粒中,使PCV2 GD-zq株基因组DNA以头尾相接的双重复方式克隆进pUC18载体中,获得重组质粒pPCV2-2GD-zq。将pPCV2-2GD-zq DNA纯化和定量后转染PK-15细胞,拯救PCV2 GD-zq病毒。【结果】从PMWS感染的猪淋巴结中分离到了一株PCV2,命名为GD-zq株;序列分析结果显示,GD-zq株全基因组为1 767 bp,与GenBank中公布的5株广东PCV2分离株ORF1核苷酸一致性为97.1%-99.7%,编码氨基酸一致性为98.7%-100%;ORF2核苷酸一致性为93.2%-99.6%,编码氨基酸一致性为92.3%-99.1%;全基因一致性为96.0%-99.6%。pPCV2-2GD-zq质粒转染PK-15细胞后,其通过间接免疫荧光实验(IFA)能从转染细胞及其传代细胞中,检测到拯救出的病毒。【结论】分离了一株PCV2广东株GD-zq,成功构建了PCV2 GD-zq株的感染性克隆。
- 陈瑞爱邵定勇同戈黄红亮李延鹏黄文科
- 关键词:猪2型圆环病毒全基因感染性克隆
- 猪肺炎支原体SYBR GREEN荧光定量PCR检测技术研究
- 猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是引起猪地方流行性肺炎(Swine Enzootic Pneumoniae,EP)的病原.传统的Mhp定量检测方法主要有颜色变化单位(color c...
- 同戈
- 关键词:猪肺炎支原体流行性肺炎PCR
- 文献传递