刘晓达
- 作品数：23 被引量：152H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学化学工程更多>>
- 交联聚丙烯酰胺类涂层毛细管柱辐照制备方法
- 一种交联聚丙烯酰胺类毛细管电泳涂层柱的辐照制备方法,属于毛细管电泳分析领域,是先用双功能团硅烷化试剂对毛细管内壁进行预处理,再经两次辐照来制备交联聚丙烯酰胺类毛细管电泳涂层柱,即在毛细管柱内充入丙烯酰胺类溶液进行辐照聚合...
- 刘晓达王全立马立人
- 文献传递
- 一种新型核酸快速回收方法
- 1998年
- 目的：建立一种简便快速的核酸浓缩回收新方法。方法：采用不同浓度的线性聚丙烯酰胺作为共沉淀载体，加入醋酸钠和无水乙醇后混匀离心，利用紫外检测和电泳方法确定对不同种类、大小和体积的核酸的回收率。结果：该方法可在１５ｍｉｎ内完成全部操作，适用于２０ｎｔ以上的单链和双链ＤＮＡ、ＲＮＡ的浓缩。对于０．１μｇ以上、大于４００ｂｐ的ＤＮＡ片段，回收率几乎达１００％。回收浓缩产物不影响后续的逆转录、ＰＣＲ、酶切和连接反应等操作。结论：所建立的方法适用于任何种类核酸的简便快速浓缩回收。
- 杜芝燕刘晓达王全立王全立张浩丁晓萍尚延忠
- 关键词：核酸聚合酶链反应
- 毛细管电泳技术及其在蛋白质类产品的分离与鉴定中的应用研究
- 该文包括毛细管电泳(CE)技术研究和蛋白质类产品分析应用研究两部分.第一部分:毛细管电泳技术研究;第二部分:蛋白质类产品的分析应用研究
- 刘晓达
- 关键词：毛细管区带电泳蛋白质均匀设计
- 突变型血红蛋白基因(α_(99),β_(82)Lys→Cys)的克隆和筛选
- 2000年
- 目的 :将编码血红蛋白α99,β82 位Lys的密码子突变为编码Cys的密码子。方法 :将待突变的目的基因克隆到 pALTER Ex2载体上 ,采用寡核苷酸介导的定点突变进行突变。 结果 :初步筛选得到的克隆经序列测定表明 ,达到预期设计的目的 ,未发生意外突变。结论
- 张浩王全立冯起杜芝燕刘晓达毛秉智
- 关键词：定点突变血红蛋白克隆
- 基因重组人血红蛋白的纯化被引量：3
- 2000年
- 目的 :探索重组人血红蛋白的纯化方法。方法 :将α、β珠蛋白串联基因克隆进 pBV2 2 0表达载体 ,获得了高效表达 ,表达产物达细菌总蛋白的 2 0 %左右。该表达产物以包涵体形式存在 ,包涵体经洗涤后 ,用 8mol/L尿素溶解 ,先用Q SepharoseFastFlow阴离子交换纯化后 ,又经Sephacryl 10 0凝胶过滤纯化。 结果 :经两步纯化后重组人血红蛋白的纯度达 90 %左右。纯化产物经复性 ,具有与氧结合的能力。结论
- 张浩毛秉智李晓霞王全立冯起刘晓达
- 关键词：血红蛋白大肠杆菌蛋白质纯化
- ABO血型快速鉴定卡的研制
- ABO血型鉴定是安全输血的重要保证。目前临床上常用的血型定型试剂虽能够较快地得出结果, 但在许多应急条件下仍显不足,而需要更加简便快捷,且便于携带贮存的血型定型产品。本着进一步适应临床输血需要,笔者采用抗A、抗B血型单克...
- 杜芝燕孙红琰王全立刘晓达彭剑淳
- 关键词：ABO血型
- 文献传递
- DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳三种银染方法比较被引量：23
- 2002年
- 目的 探讨DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)三种银染方法的特点及其适用性。方法 采用非变性PAGE垂直板对不同稀释度的 pBR 32 2MspⅠ分子量标准进行电泳分离 ,利用二种硝酸银染色法和一种银氨染色法染色 ,分析其灵敏度和噪声。结果 分子量Marker的所有条带都能染出灵敏度均为 2 5ng。在至少一个条带能染出的灵敏度方面 ,银氨染色法 ( 6 .2 5ng)低于其他两种方法。结论 时间方面Carlos等所建立的银染方法最快 ,仅需 2 0min。银氨法的噪声最低 ,结果易于保存。
- 傅占江刘宝文刘体全谢明江源刘晓达王全立
- 关键词：聚丙烯酰胺凝胶电泳银染方法脱氧核糖核酸
- 枝状DNA信号放大与纸层析杂交检测方法的建立被引量：2
- 2002年
- 傅占江范丽娜王沛王利青李霞谢明钟利强刘晓达王全立
- 关键词：聚合酶链反应病原体检测
- DNA纳米技术被引量：1
- 2003年
- 以纳米材料研究为标志的纳米技术已掀起热潮 ,并已经深入到诸多学科 ,生物医学领域也是其中之一。作为生物大分子之一的脱氧核糖核酸 (DNA)由于其独特的理化性质 ,使其在构建超分子方面成为非常有前景的纳米材料之一。
- 傅占江刘晓达王全立
- 关键词：DNA胶体金超分子
- HCVNS3基因片段酵母展示文库的构建和鉴定被引量：10
- 2001年
- HCV NS3特异的 CD4+T细胞反应与 HCV感染的良性转归相关 .为了筛选其 CD4+T细胞表位 ,构建了 HCV NS3基因片段酵母展示文库 .首先 DNase 不完全酶切 HCV NS3基因产生长度为 1 0 0～ 30 0 bp的随机片段 ,然后在它们两端加上含限制性内切酶 Bam H 作用位点的接头 ,再以接头序列作引物进行 PCR扩增 .最后扩增产物用 Bam H 酶切后与 Bam H 线性化的穿梭载体 p YD1连接 ,转化大肠杆菌 (E.coli) DH5α,共得到 2× 1 0 6个转化子 .转化菌落的 PCR扩增结果表明 ,约 50 %转化子含插入片段 .随机选择 5个插入片段测序 ,然后与 DNA序列数据库中的序列比较 .结果显示它们分别与 HCV NS3序列有 96%～ 99%的同源性 .用从转化菌落中提取的质粒转化酵母 (S.cerevisiae)菌株 EBY1 0 0 ,得到含 2× 1 0 5个插入片段的 HCV NS3基因片段酵母展示文库 .半乳糖诱导的酵母细胞通过和 FITC标记的抗体结合 ,用 FACS可以在 2 0 %的细胞表面检测到融合蛋白的表达 .
- 贾帅争孙红琰刘晓达杜芝燕杜勇王全立章扬培
- 关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白3
