刘利平
- 作品数：12 被引量：28H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HIF-3α在肝癌组织中的表达及临床意义被引量：3
- 2008年
- 杨盛力陈孝平张万广刘利平梁慧芳任利占大钱
- 关键词：肝脏肿瘤缺氧诱导因子
- 乙肝病毒X蛋白激活NF-κB信号通路对AFP表达的影响被引量：6
- 2008年
- 目的研究乙肝病毒X蛋白(HBx)通过核因子-κB(NF-κB)信号通路对甲胎蛋白(AFP)的调节作用。方法建立稳定转染HBx基因的L02细胞系(L02-HBx),用特异性的NF-κB信号通路阻断剂PDTC阻断该信号通路,荧光双标激光扫描共聚焦显微镜观察转染前后及加入PDTC前后NF-κB信号通路的激活、失活情况,同时用实时定量PCR和WesternBlot技术检测转染前后及加入PDTC前后AFP在mRNA及蛋白水平上的表达变化。结果以L02细胞为参照,转染HBx基因后的L02-HBx细胞NF-κB信号通路被激活,AFPmRNA和蛋白水平较转染前分别增加(2.78±0.43)倍和(4.72±0.53)倍,差异有统计学意义(P<0.05);PDTC作用24h后L02/HBx细胞NF-κB信号通路阻断,AFPmRNA和蛋白表达分别为(1.40±0.16)倍和(3.12±0.44)倍,与未加入PDTC作用的L02-HBx细胞相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论NF-κB信号通路是HBx上调AFP表达的途径之一。
- 任利陈孝平张万广刘利平杨盛力梁慧芳
- 关键词：乙型肝炎病毒X蛋白甲胎蛋白核因子-ΚB信号通路肝细胞
- Pin1在肝硬化和肝癌组织中的表达及其与乙型肝炎病毒X蛋白的关系被引量：2
- 2007年
- 目的通过检测Pin1在肝硬化组织和肝癌原发灶及门静脉癌栓中的表达,了解Pin1在肝癌发生、发展的不同阶段的表达情况,同时验证其与乙型肝炎病毒X蛋白的关系。方法用免疫组织化学染色法检测20例肝硬化组织,21例肝癌原发灶及门静脉中Pin1的表达,同时检测21例肝癌原发灶中乙型肝炎病毒X蛋白的表达情况,并用SPSS10.0软件进行相关性分析。结果肝硬化组织和大部分门静脉癌栓中Pin1的表达较肝癌原发灶中Pin1的表达强(P<0.05)。在肝癌组织中Pin1的表达与HBx的表达呈显著正相关(P<0.05)。结论Pin1在肝癌发生、发展的不同阶段表达不同,同时Pin1可以通过直接或间接作用稳定HBx的表达,为阐明其在肝癌发生、发展中的作用提供了新的思路。
- 杨盛力张万广陈孝平张伟刘利平
- 关键词：肝硬化病毒蛋白质类
- 乙肝病毒X蛋白对E—cadherin和T—cadherin表达的调节作用被引量：1
- 2009年
- 目的 体外研究乙肝病毒X蛋白（HBx）对E-钙黏蛋白（E—cadherin）和T-钙黏蛋白（T—cadherin）表达的调节作用。方法建立稳定表达HBx基因的HepG2细胞系（HepG2-HBx），稳定转染空质粒pcDNA3．1的HepG2细胞系作为对照（HepG2-pcDNA3．1），分别用荧光实时定量（Real—time）PCR和Western—blot技术检测转染前后E—cadherin和T—cadherin在mRNA及蛋白水平表达变化。结果以HepG2-pcDNA3．1细胞为参照，转染HBx基因后的HepG2-HBx细胞E—cadherinmRNA和蛋白水平分别为其（42．28±8．73）％和（35．28±4．33）％，而T—cadher—in则分别为其（4．47-4-0．78）和（5．11±0．83）倍，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HBx下调E—cadherin的表达，上调T—cadherin的表达，其机制可能为HBx促进E—eadherin向T—cadherin转换。
- 阳义刘利平陈孝平梁慧芳吕兴杨盛力任利徐涛
- 关键词：乙肝病毒X蛋白E-钙黏蛋白
- 乙型肝炎病毒X蛋白对血管内皮生长因子的调节通路研究被引量：1
- 2008年
- 目的研究NF—κB信号转导通路在乙型肝炎病毒x蛋白（HBx）调节血管内皮生长因子（VEGF）表达中的作用。方法建立稳定转染HBx基因的L02细胞系（L02-HBx），用不同浓度的NF—κB信号转导通路阻断剂吡咯二硫氢基甲醋酯（PDTC）阻断NF—κB信号转导通路，荧光双标激光扫描共聚焦显微镜观察转染前后及PDTC加入前后NF—κB信号转导通路的激活及失活情况，同时用实时荧光定量PCR和Western blot技术检测转染前后及PDTC加入前后VEGF在mRNA及蛋白水平的表达变化。结果以L02细胞为参照，转染HBx基因后的L02-HBx细胞NF—κB信号转导通路被激活，VEGF mRNA和蛋白水平分别增加（4．07±0．31）和（4．34±0．64）倍，差异有统计学意义（P〈0.05）；加入25.0和50.0μmol／L的PDTC作用24h后，L02-HBx细胞NF—κB信号转导通路被阻断，VEGF mRNA表达水平分别增加（2．33±0．22）和（1.86±0．18）倍；VEGF蛋白表达水平分别增加（2．52±0．29）和（2．17±0．34）倍，与未加入PDTC的L02-HBx细胞的差异有统计学意义（P〈0．05）。12.5μmol／LPDTC作用24h后，VEGF mRNA和蛋白水平的变化无统计学意义（P〉0．05）。结论NF—κB信号转导通路是HBx上调VEGF表达、促进肝癌血管生成的途径之一。
- 刘利平陈孝平张万广杨盛力梁慧芳徐涛任利张伟
- 关键词：血管内皮生长因子类基因表达调控乙型肝炎病毒X蛋白
- P糖蛋白与乙型肝炎病毒X蛋白在肝癌原发灶和门静脉癌栓中的表达及其临床意义被引量：1
- 2007年
- 目的探讨P糖蛋白与乙型肝炎病毒X蛋白肝癌原发灶和门静脉癌栓中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化染色法检测36例肝癌原发灶及相应转移灶中P糖蛋白和乙型肝炎病毒X蛋白的表达。结果在肝癌原发灶及其转移灶中,P糖蛋白表达的吸光度值分别为0.247±0.060,0.251±0.071。P糖蛋白在肝癌原发灶和转移灶之间的表达并无显著性差异(P>0.05)。且P糖蛋白的表达同乙型肝炎病毒X蛋白的表达呈正相关(γ=0.911,P<0.05)。结论乙型肝炎病毒X蛋白与肝癌化疗耐药密切相关;P糖蛋白在肝癌原发灶和转移灶之间的表达具有较高的一致性,可以通过检测门静脉癌栓中P糖蛋白的表达,预测肝癌原发灶及其他转移灶对化疗药物的耐药性,为肝癌的个性化化疗提供较好的参考依据。
- 杨盛力张万广陈孝平彭静刘利平靖凯
- 关键词：P糖蛋白乙型肝炎病毒X蛋白肝癌原发灶门静脉癌栓多药耐药
- 乙肝病毒X蛋白通过激活核因子-κB信号通路上调MDR1的表达被引量：3
- 2008年
- 目的探讨核因子（NF）-κB信号通路是否是乙肝病毒X蛋白（HBx）上调多药耐药基因（MDR1）的途径之一。方法建立稳定转染HBx基因的L02（L02／HBx）细胞系，用NF-κB信号通路阻断剂吡咯二硫代氨基甲酸酯（PDTC）阻断NF-κB信号通路。采用荧光双标激光扫描共聚焦显微镜观察转染前后及PDTC加入前后NF—κB信号通路的激活失活，同时用实时聚合酶链反应（Real-time PCR）和Western blot检测转染前后及PDTC加入前后MDR1的表达。结果转染HBx基因后NF-κB信号通路被激活，MDR1表达明显上调（P〈0．05）；PDTC加入后NF-κB信号通路被阻断，MDR1表达明显下调（P〈0．05）。结论NF-κB信号通路可能是HBx介导肝癌多药耐药，上调多药耐药基因MDR1的途径之一。
- 杨盛力陈孝平张万广刘利平梁慧芳金炜东
- 关键词：乙型肝炎病毒核因子-ΚB信号通路肝细胞
- 乙型肝炎病毒X基因诱导卵圆细胞恶性转化的研究被引量：2
- 2009年
- 目的研究乙型肝炎病毒X（HBx）基因对卵圆细胞转化和分化的影响。方法用稳定表达HBx的转基因卵圆细胞株pEGFP—HBx卵圆细胞作为实验组，pEGFP卵圆细胞及LE／6卵圆细胞作为对照组，运用倒置相差显微镜和透射电镜、流式细胞术、糖原染色、软琼脂生长、实时定量PCR、细胞免疫化学技术观察和检测pEGFP-HBx卵圆细胞在细胞形态、细胞周期、分化标志物、癌基因c—myc及TGF-α的变化。结果（1）与对照组相比，pEGFP—HBx卵圆细胞体积增大，核具有明显异型性；（2）流式细胞仪检测显示，与对照组相比，pEGFP—HBx卵圆细胞GO／G1期细胞百分比下降，S期和G2／M期细胞百分比明显升高，而且非整倍体细胞明显增多；（3）糖原染色显示，pEGFP—HBx卵圆细胞胞质内可见大量糖原颗粒；（4）软琼脂中可见pEGFP—HBx卵圆细胞克隆形成；（5）癌基因c-myc及TGF-α表达量明显增高，卵圆细胞分化指标HNF-4α、AFP表达上升，CK-7、CK-19表达下降，未见有cpsl mRNA表达。结论HBx基因可以引起卵圆细胞异常分化，并直接诱导卵圆细胞发生恶性转化。
- 王艳军梁慧芳陈孝平董为李常海陈琳刘利平
- 关键词：肝炎病毒乙型卵圆细胞恶性转化
- 沉默缺氧诱导因子-1α对肝癌细胞化疗敏感性影响及相关机理的研究被引量：4
- 2008年
- 目的观察应用短发夹RNA(shRNA)沉默缺氧诱导因子(HIF)-1α对肝癌细胞化疗敏感性的影响并探讨其相关机理。方法脂质体包裹HIF-1αshRNA表达载体(pshRNA-HIF-1α)转染到肝癌细胞HepG2细胞中,G418筛选,建立稳定的HIF-1α沉默的细胞系,并以转染空白质粒(pHK)作对照。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测沉默HIF-1α后HIF-1αmRNA和多药耐药基因1(mdr1)mRNA变化;免疫印迹(Western blot)检测细胞HIF-1α及P-糖蛋白(P-gp)的变化。CoCl2模拟缺氧环境下,MTT和流式细胞术检测不同剂量的化疗药物(阿霉素)在HIF-1α沉默后对细胞生长抑制率和凋亡率的影响。结果pshRNA-HIF-1α转染细胞后HIF-1α干扰率在mRNA水平和蛋白水平分别为82.18%和75.51%。沉默HIF-1α后细胞mdr1 mRNA和P-gp表达显著降低(P<0.05),生长抑制率和凋亡率明显增高(P<0.05)。结论shRNA沉默HepG2细胞HIF-1α可以通过下调mdr1 mRNA和P-gp表达逆转肝癌化疗耐药,增强肝癌细胞对化疗的敏感性;可通过沉默HIF-1α作为肝癌基因治疗的一种新途径。
- 刘利平陈孝平杨盛力张万广徐涛金炜东梁慧芳
- 关键词：肝脏肿瘤缺氧诱导因子-1Α化疗敏感性
- 加热对肝癌HepG2细胞肺耐药蛋白表达及耐药性的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:研究多次加热对肝癌HepG2细胞肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)表达的影响以及加热后HepG2细胞对阿霉素敏感性的变化。方法:肝癌HepG2细胞在42℃恒温水浴箱中加热,60min/次,1次/d,共10d,获取稳定生长的加热HepG2细胞。以未加热HepG2细胞为对照,应用荧光定量PCR和Western Blot检测两种细胞LRP的mRNA和蛋白水平;通过体外细胞毒实验(MTT法)观察阿霉素对两种细胞生长抑制的影响,分析加热后HepG2细胞对阿霉素敏感性的变化;应用流式细胞技术检测两种细胞内阿霉素的平均荧光强度,分析加热对细胞内药物浓度的影响。结果:加热HepG2细胞的LRP mRNA和蛋白水平较未加热HepG2细胞分别增加(4.01±0.23)和(4.67±0.36)倍,差异有统计学意义(P<0.05);未加热HepG2细胞半数抑制浓度/加热HepG2细胞半数抑制浓度=3.18;应用阿霉素1h、2h后,加热HepG2细胞内平均荧光强度分别比未加热HepG2细胞高46.1%和33.9%。结论:加热虽然使LRP表达上调,但不足以引起耐药性增加;加热能够显著提高肝癌HepG2细胞对阿霉素的敏感性,其机制可能与细胞膜通透性增加,细胞内药物浓度增高有关。
- 张金良陈孝平张万广任利杨盛力刘利平梁慧芳
- 关键词：高温抗药性肿瘤肝肿瘤
