其木格
- 作品数：9 被引量：17H指数：3
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- 弓形虫ROP4基因的克隆及序列分析
- 本研究提取Vero细胞培养的弓形虫RH株基因组DNA,利用PCR技术扩增ROP4基因片段,将目的基因片段与克隆载体pMD-18T Simple连接,转化至感受态大肠埃希氏菌BL21,将PCR鉴定和酶切鉴定均为阳性的克隆质...
- 其木格陈健贾立军张守发
- 关键词：弓形虫克隆
- 文献传递
- 犬新孢子虫NcSRS2基因片段的克隆及原核表达被引量：3
- 2008年
- 以含有犬新孢子虫NcSRS2基因的质粒pMD18-NcSRS2为模板,应用PCR方法扩增Nc-SRS2基因,将该基因片段克隆至原核表达载体pGEX-4T-2,构建了重组表达质粒pGEX-Nc-SRS2,转化大肠杆菌BL21中并诱导表达。结果显示,克隆的基因片段长1100bp,SDS-PAGE、Western blotting分析显示,重组质粒pGEX-NcSRS2在大肠杆菌中得到了高效表达。
- 丁德贾立军其木格薛书江张守发
- 关键词：犬新孢子虫NCSRS2基因克隆原核表达
- 应用PCR方法调查东北三省部分地区猪附红细胞体病流行情况被引量：6
- 2008年
- 为了解东北三省猪附红细胞体感染情况,应用血液压滴标本镜检法和PCR检测方法对东北三省部分地区600头份猪血液样本进行了检测。结果:血液压滴标本镜检法检测阳性率为87.3%(524/600),PCR检测方法检测阳性率为91.5%(549/600)。其中种母猪阳性率为87.2%(34/39),育肥猪阳性率为90.8%(347/382),断奶仔猪阳性率为92.9%(78/84),哺乳仔猪阳性率为94.7%(90/95);黑龙江省阳性率为93.5%(187/200),辽宁省阳性率为89.5%(179/200),吉林省阳性率为91.5%(183/200)。结果表明,东北三省猪附红细胞体感染情况严重。
- 李月梅薛书江其木格张守发
- 关键词：PCR猪附红细胞体流行病学调查
- 羊泰勒虫不同PCR检测方法的比较被引量：1
- 2008年
- 为寻求快速、有效检测羊泰勒虫的PCR方法,本试验建立了检测羊泰勒虫18SrRNA基因和表面蛋白基因的两种常规PCR方法和一种检测18SrRNA基因的半套式PCR方法,并从其敏感性和临床样本检出率等方面进行了比较。结果显示:上述方法检测羊泰勒虫基因组DNA的最小检测量分别为1.6fg/μL、16fg/μL和0.016fg/μL;检测临床样本阳性检出率分别为31.37%(16/51)、17.64%(9/51)和45.10%(23/51)。3种方法中,检测18SrRNA基因的半套式PCR方法敏感性和临床样本检出率最高,其次为检测18SrRNA基因的常规PCR方法,最后为检测表面蛋白基因的常规PCR方法。结果说明,所建立的半套式PCR方法是一种较好的羊泰勒虫检测方法。
- 张守发田万年王中光其木格贾立军薛书江
- 关键词：羊泰勒虫PCRRRNA基因
- 弓形虫RH株ROP4基因的原核表达及重组蛋白的免疫原性分析
- 弓形虫病(Toxoplasmosis)又称弓形体病,是由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)所引起的一种人畜共患寄生虫病。该病呈世界性分布，在温血动物中广泛存在，猫科动物为其终宿主和重要的传染源，中间宿主包括...
- 其木格
- 关键词：弓形虫病原核表达免疫原性重组蛋白
- 文献传递
- 吉林株犬新孢子虫SAG1基因片段的克隆及蛋白抗原性预测
- 2009年
- [目的]对犬新孢子虫SAG1基因进行克隆与序列分析。[方法]从细胞培养的吉林株虫体中提取犬新孢子虫DNA,根据已发表的犬新孢子虫SAG1基因的核苷酸序列,设计并合成1对特异性引物,采用PCR技术,扩增犬新孢子虫SAG1基因片段,并成功克隆到pMD18-Tsimple载体上,对经PCR、酶切鉴定为阳性的重组质粒进行序列分析。[结果]对犬新孢子虫SAG1基因进行克隆后,获得阳性重组质粒。克隆的SAG1基因片段长780 bp,编码260个氨基酸,与已发表的美国株犬新孢子虫SAG1基因核苷酸序列(AF132217)的同源性为99.0%,氨基酸序列同源性为98.8%。通过分子生物学软件对翻译水平进行预测,发现吉林株核苷酸序列并不影响氨基酸翻译与蛋白质的表达。[结论]该试验成功克隆重组质粒,为建立犬新孢子虫的高效表达系统奠定了基础。
- 栾杨张守发薛书江贾立军其木格
- 关键词：犬新孢子虫克隆抗原性
- 弓形虫环介导等温扩增快速检测方法的建立被引量：5
- 2009年
- 为了建立弓形虫的快速检测方法,本研究建立了一种灵敏、特异、快速的分子生物学检测方法——环介导等温扩增技术(LAMP)。用10倍系列稀释的DNA样品对该检测方法的灵敏度进行了测试,同时通过对扩增产物做内切酶验证;为证明LAMP技术的特异性,对新孢子虫、附红细胞体、瑟氏泰勒虫等病原体进行检测。结果显示:利用LAMP技术成功检测到弓形虫基因区,此方法的灵敏度可达到能检测5个拷贝DNA分子水平,酶切分析结果正确,并且特异性强,对新孢子虫、附红细胞体、瑟氏泰勒虫等病原体检测均为阴性。说明LAMP技术可应用于弓形虫的快速检测。
- 李月梅薛书江其木格邢莹张守发
- 关键词：弓形虫环介导等温扩增技术
- 应用间接ELISA方法检测牛新孢子虫抗体的研究被引量：1
- 2009年
- 新孢子虫病（Neosporosis）是由犬新孢子虫（Neospora caninum）或类新孢子虫（Neosporalike）寄生于宿主动物所引起的多种家畜共患的一种原虫病。它可引起孕畜流产或死胎以及新生儿的运动障碍和神经系统疾病。目前，国外已研制出ELISA诊断试剂盒，但价格昂贵，不适合临床推广应用。而国内虽然建立了多种血清学诊断方法，但所用抗原均为重组蛋白，其敏感性、特异性将会受到不同程度的影响。因此，针对上述问题，试验对新孢子虫虫体抗原进行了分析，并应用新孢子虫虫特异性抗原建立了特异、敏感、稳定的血清学诊断方法，旨在为今后新孢子虫病的诊断和预防研究奠定基础。
- 陈健鲁承其木格高建伟贾文影王暖成
- 关键词：犬新孢子虫间接ELISA方法ELISA诊断试剂盒新孢子虫病抗体
- 弓形虫ROP4基因的克隆及原核表达载体的构建
- 2010年
- 其木格陈健贾立军李月梅金超张守发
- 关键词：原核表达载体弓形虫克隆有核细胞宿主细胞红细胞
