关蕾 作品数:33 被引量:94 H指数:6 供职机构: 中山大学附属第三医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省医学科学技术研究基金 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体的制备 被引量:3 2006年 目的:用不同的方法制备Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体,探索Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗可行的应用途径。方法:采用冻融法、逆相蒸发法、钙融合法分别制备Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体,在透射电镜下观察脂质体颗粒的大小,应用紫外分光光度计检测蛋白疫苗的包封率,并用ELISA法对Hsp70-HSV-2gD抗原活性进行测定。结果:逆相蒸发法制备的Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体包封率最大,达到(53±2.0)%,所制备的脂质体粒圆形,直径大小较一致,约600 nm,具有抗原活性。结论:成功制备了Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体,逆相蒸发法为制备Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体的最好方法。 樊建勇 杨慧兰 王捷 关蕾 王颖 成桂明 仕瑶慧关键词:单纯疱疹病毒 阳离子脂质体 蛋白疫苗 表现为脂溢性皮炎的艾滋病2例临床分析 报告2例表现为脂溢性皮炎的艾滋病病例并对相关文献复习和临床分析.例1为46岁男性,起病1年前曾与婚外4个女性有过性关系,例2为51岁女性,起病15年前有输血史,3年前患“尖锐湿疣”,2例患者均表现为泛发性分布的红斑鳞屑性... 龚子鉴 赖维 陆春 苏向阳 朱国兴 许庆芳 谢淑霞 关蕾关键词:脂溢性皮炎 艾滋病 文献传递 小干扰RNA抑制2型单纯疱疹病毒作用的研究 被引量:2 2011年 目的 研究小干扰RNA(siRNA)在体外抑制2型单纯疱疹病毒(HSV-2)的作用。方法 根据HSV-2 VP16和DNA聚合酶基因序列设计、合成siRNA。采用病毒产量减少实验测定siRNA对病毒复制的抑制,在预防性作用研究中,24孔板Vero细胞转染siRNA,4 h后换液并接种HSV-2病毒(0.02 ~ 0.05 PFU/细胞);在治疗性作用研究中,24孔板Vero细胞接种HSV-2,1 h后转染siRNA。荧光定量RT-PCR测定siRNA对病毒靶基因mRNA水平的影响。结果 分别针对HSV-2 VP16基因及DNA聚合酶基因设计的siRNA——VP2-1和DP2-1,在预防性及治疗性作用研究中均能有效抑制病毒复制,使病毒滴度降低约1个log10 。siRNA VP2-1使病毒VP16 mRNA的水平在感染后6 h和12 h分别降低58.6%和79.5%,而siRNA DP2-1使病毒DNA多聚酶的mRNA水平分别降低59.8%和77.4%。结论 HSV-2 VP16和DNA聚合酶基因的siRNA体外能有效抑制HSV-2复制,VP16和DNA多聚酶基因可以作为RNA干扰抑制HSV病毒复制的靶基因。 张云青 赖维 谢淑霞 关蕾 李欢 李刚关键词:RNA干扰 pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗阳离子脂质体的制备 被引量:1 2006年 目的 制备pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗阳离子脂质体,为基因免疫和基因治疗寻找一种简单、经济、有效的DNA投递系统。方法 采用逆向蒸发法,用卵磷脂、胆固醇、十八胺制备成阳离子脂质体包封pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗,在透射电镜下观察脂质体颗粒的大小,应用紫外分光光度计检测DNA疫苗的包封率,免疫组化检测其转染真核细胞的效果。结果 制备的脂质体呈圆形、粒径大小较一致,平均粒径为580nm,DNA疫苗脂质体包封率达到50%~55%,能有效转染真核细胞。结论 成功制备了pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗阳离子脂质体。该方法作为提高基因免疫效果的简单、经济、有效的手段之一,为其进一步的研究打下了基础。 樊建勇 杨慧兰 关蕾 王颖 仕瑶慧关键词:单纯疱疹病毒 阳离子脂质体 包封率 DNA疫苗 热休克蛋白70-Ⅱ型单纯疱疹病毒糖蛋白DDNA疫苗的构建及表达 被引量:7 2007年 目的:针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)包膜糖蛋白D(gD),以热休克蛋白70(Hsp70)为载体,构建pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗。方法:将Hsp70和HSV-2gD蛋白的基因分别克隆至真核表达载体pVAX,构建成重组质粒pVAX-Hsp70-gD并测序鉴定。重组质粒pVAX-Hsp70-gD转染COS-7细胞,用免疫组化、SDS-PAGE和W est-ern b lotting方法鉴定重组质粒的表达情况。结果:测序证实重组质粒序列正确,表达产物的SDS-PAGE分析发现,在相对分子量为92 000处有外源蛋白表达,与预期蛋白带一致。免疫组化方法和W estern b lotting也证明,构建的重组质粒能在COS-7细胞内表达。pVAX-Hsp70-HSV2gD组核酸疫苗免疫的小鼠,其脾淋巴细胞培养上清中γ-干扰素的水平高于其他组(P<0.05)。结论:成功构建了pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗,为其进一步的研究打下了基础。 樊建勇 杨慧兰 关蕾 王颖 仕瑶慧关键词:热休克蛋白70 糖蛋白D 单纯疱疹病毒 DNA疫苗 单纯疱疹病毒2gD-Hsp70融合蛋白基因的构建及表达 被引量:4 2006年 构建并原核表达Hsp70-HSV2gD融合蛋白。将Hsp70和HSV-2gD蛋白基因分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,构建成重组质粒pGEX-4T-Hsp70-gD,并测序鉴定。重组质粒pGEX-4T-Hsp70-gD转化大肠杆菌DH5α后,IPTG诱导表达并进行SDS-PAGE分析。表达产物纯化后做Westernblot检测。将其肌注免疫BALB/c小鼠,检测融合蛋白对免疫小鼠脾淋巴细胞增殖、γ-干扰素产生以及血清中gDIgG水平的影响。表达产物的SDS-PAGE分析发现,在相对分子量为118kD处有外源蛋白表达,与预期蛋白带一致。用GST柱得到了纯化的Hsp70-HSV2gD融合蛋白。Westernblot证实,表达产物具有良好的活性。GST-Hsp70-gD组蛋白疫苗免疫的小鼠,其脾淋巴细胞刺激指数和脾淋巴细胞培养上清中γ-干扰素的水平高于其它组(P<0.05)。血清单纯疱疹病毒-2gD蛋白的抗体水平高于其它组(P<0.05)。 樊建勇 杨慧兰 王颖 关蕾关键词:热休克蛋白70 单纯疱疹病毒 疫苗 误诊为眼睑炎的眼睑单纯疱疹合并病毒性结膜炎1例 眼睑单纯疱疹是由单纯疱疹病毒感染引起的,临床上较常见。但由于有部分病例的首发症状仅表现为红斑伴肿胀,因而易被误诊误治。本文介绍了某科门诊接诊1例误诊为眼睑炎的眼睑单纯疱疹合并病毒性结膜炎病例的案例,阐述了本病的诊断要点,... 关蕾 赖维关键词:眼睑炎 单纯疱疹 病毒性结膜炎 病毒感染 文献传递 单纯疱疹病毒Ⅱ型新型DNA疫苗的构建 被引量:1 2009年 目的:针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)包膜糖蛋白gD以及包膜糖蛋白gB的CTL表位,构建重组真核表达质粒pVAX-gD-CTL。方法:根据Gene Bank提供的HSV-2 G株糖蛋白D基因(gD)序列设计PCR引物,以已构建好的pc-gD为模板,特异性扩增HSV-2 gD片段,将其克隆于pVAX1载体中构建成质粒pVAX-gD,再将其双酶切后引入CTL片段构建重组真核表达质粒pVAX-gD-CTL。结果:将重组的pVAX-gD-CTL真核表达质粒转化大肠杆菌后,筛选阳性克隆进行酶切及测序鉴定。结论:初步构建HSV-2 pVAX-gD-CTL重组真核表达质粒。 关蕾 赖维 杨慧兰 朱国兴 许庆芳 陆春关键词:CTL表位 DNA疫苗 2008年广州地区化妆品皮肤病监测结果分析 2009年 目的了解广州地区2008年化妆品皮肤病发病的流行病学特点,为化妆品卫生监督规范的制定和修订提供依据。方法采用回顾性分析方法,对2008年到广州卫生部化妆品皮肤病诊断机构投诉和就诊的240例患者的资料进行分析。结果发病以青年女性为主,20~29岁年龄段发病率最高,占59.2%;职业以自由职业、公司职员及学生为主,占66.3%。临床表现主要为化妆品接触性皮炎(占93.8%)。共涉及502个品种的化妆品,其中普通化妆品446种,以乳液水剂面霜护肤类为主,共224种,占44.6%,特殊化妆品56种,占11.2%,祛痘类产品的投诉突出,且引起的不良反应较为严重。结论本研究结果认为,2008年广州地区化妆品皮肤病发病以接触性皮炎为主,主要涉及女性自由职业者和公司职员及女大学生,护肤类产品是主要的致病因素。建议祛痘类产品应作为特殊类型化妆品加强监控。 谢淑霞 杨素莲 关蕾 区凤仙 赖维 万苗坚 叶张章 郑跃关键词:化妆品 化妆品皮肤病 流行病学 发疹性朗格汉斯细胞组织细胞增生症1例 被引量:2 2005年 报告1例发疹性朗格汉斯细胞组织细胞增生症。患者男,27岁。四肢、躯干皮肤粟粒至黄豆大播散性丘疹、结节4年余,不伴系统损害,进展缓慢。皮损组织病理检查示真皮团块状组织细胞浸润,免疫组化染色结果示S-100蛋白(+),CD1a(+),LYSO(+),电镜下组织细胞内找到Birbeck颗粒。经糖皮质激素软膏外用,皮损有所消退,但停药后复发。随访2年,患者皮损进展缓慢,其他系统未累及。 杨慧兰 林挺 杨军 陈晓东 关蕾 刘仲荣关键词:朗格汉斯细胞组织细胞增生症 发疹性