倪虹
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
- 供职机构:四川大学生命科学学院遗传医学研究所更多>>
- 发文基金:重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 荧光定量PCR法在人类宫颈癌RNA干扰中的应用被引量:1
- 2007年
- 研究荧光定量PCR法在RNA干扰(RNA i)技术抑制宫颈癌Caski细胞人乳头瘤病毒16型E6基因(HPV16 E6)的应用情况,并与传统使用的灰度值分析法进行比较。构建shRNA重组质粒干扰载体转染至Caski细胞中。通过荧光定量PCR法和灰度值分析法检测干扰后细胞HPV16 E6基因的mRNA及蛋白质表达水平。实验表明HPV16 E6基因mRNA及蛋白质的表达量都有明显降低,与阴性对照空白质粒组相比有显著差异(P<0.01);RNA i对宫颈癌Caski细胞中HPV16 E6基因的表达具有较高的抑制率;荧光定量PCR法较之传统的灰度值分析法更为准确。
- 曾索丁显平倪虹曾梅李小波
- 关键词:RNA干扰人类乳头瘤病毒宫颈癌荧光定量PCR
- 靶向Survivin的shRNA表达载体的构建和对宫颈癌Caski细胞Survivin表达的影响
- 2008年
- [目的]探讨RNA干扰对Caski细胞Survivin基因表达的抑制作用。[方法]构建针对Survivin基因编码区和非编码区的两对短发夹状RNA真核表达载体,分别命名为pGenSur1、pGenSur2。以脂质体介导的转染方法将其导入宫颈癌Caski细胞株,采用荧光定量RT-PCR和western blot检测转染后24、48、72h Survivin基因mRNA和蛋白质表达水平。[结果]成功构建Survivin基因shRNA真核表达载体pGenSur1、pGenSur2。与野生型Caski细胞、阴性对照相比,Caski/pGenSur1细胞和Caski/pGenSur2细胞中SurvivinmRNA和蛋白表达随着干扰时间增加有显著性减少(P﹤0.01),72h到达最低值,mRNA抑制效率分别达到63.3%±1.44%和79.7%±2.12%,蛋白抑制效率达到64.2%±2.02%和79.4%±1.77%。[结论]靶向Survivin的shRNA质粒载体均可显著抑制宫颈癌Caski细胞内源Survivin的mRNA和蛋白的表达(P﹤0.01)。
- 倪虹丁显平曾索
- 关键词:宫颈癌SURVIVINCASKI
- 孕妇血浆游离DNA的定量分析被引量:2
- 2007年
- 目的探讨孕妇血浆游离DNA在唐氏筛查和非创伤性产前诊断中的价值。方法从正常女性、孕中期孕妇、唐氏高危孕妇和孕晚期孕妇的血浆中分离游离DNA,并采用实时定量荧光PCR检测3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)及男性特有Y性别决定区基因(sex determining regionY,SRY)。结果未孕妇女、孕中期、唐氏高危、孕晚期孕妇GAPDH拷贝数均值分别为(6.40×103±1.94×103)copy/mL、(4.28×103±1.36×103)copy/mL、(3.08×104±1.67×104)copy/mL和(4.33×104±2.32×104)copy/mL;孕中期、唐氏高危、孕晚期孕妇SRY拷贝数均值分别为(174.02±98.56)copy/mL、(1065.01±588.72)copy/mL、(2627.58±1257.94)copy/mL。孕晚期和唐氏高危孕妇血浆游离DNA含量较孕中期孕妇增加(P<0.001或P<0.005)。结论孕妇血浆游离DNA的定量分析在唐氏筛查和无创伤性产前性别诊断中有重要的应用价值。
- 李小波丁显平倪虹陈伟
- 关键词:孕妇外周血产前诊断