- 多药耐药分子生物学研究进展
- 2000年
- 何琳胡杰英
- 关键词：多药耐药分子生物学肿瘤基因治疗
- 人类端粒酶基因反义核酸对恶性肿瘤细胞端粒酶抑制的实验研究被引量：1
- 2003年
- 目的 :研究人类端粒酶 (hTR)基因的反义核酸对K5 62细胞、Hep 2细胞端粒酶活性和K5 62细胞凋亡的影响。方法 :采用TRAP法检测K5 62细胞、Hep 2细胞在反义核酸处理前后端粒酶活性的变化以及采用TUNEL法观察反义核酸处理前后K5 62细胞凋亡的变化。结果 :hTR基因反义核酸能有效抑制K5 62细胞和Hep 2细胞的端粒酶活性 ,并且诱导K5 62细胞发生凋亡。结论 :hTR基因反义核酸能显著抑制肿瘤细胞的端粒酶活性 。
- 胡杰英蒋东霞何琳
- 关键词：反义核酸恶性肿瘤细胞端粒酶
- 树突状细胞介导恶性肿瘤的生物治疗
- 2000年
- 胡杰英何琳
- 关键词：树突状细胞恶性肿瘤生物治疗介导
- CIK细胞抗肿瘤作用及对mdr-1基因逆转的应用研究
- 蒋东霞胡杰英徐虹杨晓博何琳买玲杨胜利赵婷茹
- 该项目在医学领域肿瘤学研究方面，应用细胞生物技术和分子生物学方法对CIK抗肿瘤活性及体外逆转肿瘤细胞MDR进行了研究、探索。主要完成了以下科研工作，得出如下研究结果：1、研究CIK的生物学特性，采用FCM分析CIK的免疫...
- 关键词：
- 关键词：免疫活性细胞流式细胞仪
- 细胞因子诱导杀伤细胞联合阿霉素逆转多药耐药的研究被引量：11
- 2007年
- 目的:探讨细胞因子诱导杀伤细胞联合阿霉素逆转多药耐药的可能性及其机制。方法:以人外周血分离单个核细胞后进行体外诱导、扩增作为效应细胞,联合不同浓度的阿霉素与其耐药靶细胞K562/ADR进行共培养,经四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法计算半数抑制浓度(IC50)、耐药倍数和逆转倍数;流式细胞仪检测细胞内阿霉素相对含量和P糖蛋白表达水平;RT-PCR检测mdr-1基因mRNA表达。结果:未经细胞因子诱导杀伤细胞联合阿霉素处理时,阿霉素对K562和K562/ADR的IC50分别为(0.68±0.04)μmol/L和(66.23±4.38)μmol/L;K562/ADR对阿霉素的耐药倍数为97.43倍;经细胞因子诱导杀伤细胞联合阿霉素处理48 h(效靶比1∶5、阿霉素1.1μmol/L)后,IC50为(32.15±0.79)μmol/L,联合逆转倍数为2.06倍,细胞内的阿霉素相对含量增加1.83倍;P糖蛋白表达下调36.7%,mdr-1基因mRNA相对表达值也呈下调趋势。结论:细胞因子诱导杀伤细胞联合阿霉素可提高耐药细胞K562/ADR胞内的阿霉素浓度,下调mdr-1基因及P糖蛋白的表达,提高阿霉素对耐药细胞K562/ADR的敏感性,使细胞因子诱导杀伤联合阿霉素对多药耐药的逆转效果得以显现。
- 蒋东霞胡杰英徐虹何琳买玲杨胜利宋永平
- 关键词：肿瘤细胞因子诱导杀伤细胞阿霉素
- 抗肿瘤药物体外诱导新鲜癌组织及其外周血淋巴细胞mdr-1基因表达的相关性研究被引量：9
- 2002年
- 目的 :通过对恶性肿瘤患者的癌组织细胞及其外周血淋巴细胞进行抗肿瘤药物的体外诱导 ,用RT PCR法检测其mdr 1基因表达状况 ,从而找出两者之间的相关性 ,从基因水平解决非手术癌患者化疗用药个体化。方法 :在采集手术标本的同时抽取该患者外周血 ,用 8种抗肿瘤药物进行体外诱导 ,RT PCR法检测 32例恶性肿瘤患者癌组织细胞及其外周血淋巴细胞的mdr 1基因表达状况。利用SAS软件计算两者之间的相关关系。结果 :32例恶性肿瘤患者的新鲜癌组织细胞与其外周血淋巴细胞的抗肿瘤药物体外诱导mdr 1基因表达呈正相关关系。结论 :对于失去手术机会或病灶很小不能取材的患者可以用外周血淋巴细胞替代癌细胞做RT PCR体外药敏检测。
- 何琳张巧胡杰英
- 关键词：抗肿瘤药物体外诱导癌组织外周血淋巴细胞MDR-1基因
- 与CIK细胞共培养降低K562/ADR来源DC细胞MDR-1基因表达被引量：1
- 2008年
- 蒋东霞徐虹胡杰英何琳买玲杨胜利宋永平
- 关键词：MDR-1基因表达K562/ADR细胞共培养DC细胞CIK免疫活性细胞
- 细胞因子诱导的杀伤细胞体外逆转K562/ADR细胞株多药耐药性观察被引量：7
- 2008年
- 目的:研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)体外逆转K562/ADR细胞株多药耐药(MDR)的可行性。方法:在含细胞因子(人重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、人重组白细胞介素-1、人重组白细胞介素-4和人重组肿瘤坏死因子-α)的RPMI1640完全培养液中诱导K562细胞株、K562/ADR耐药细胞株分化成树突状细胞(DC)。正常人外周血单个核细胞(PBMC)在上述细胞因子诱导下培养成CIK,与成熟的DC共培养成CIK+K562/ADR-DC。应用流式细胞术检测CIK及CIK+K562/ADR-DC的细胞表型。MTT法测定CIK和K562/ADR-DC对K562/ADR的细胞毒作用,流式细胞仪检测CIK组和CIK+K562/ADR-DC组细胞中糖蛋白(P-gp)、阿霉素(ADR)的含量,RT-PCR检测mdr-1基因表达。结果:CIK、CIK+K562/ADR-DC细胞经流式细胞仪检测,均具有自己独特的表型。PBMC诱导培养4d后,CIK开始增殖,第7～9天细胞数量明显增多。K562/ADR来源的DC和CIK共培养后,细胞增殖速度明显加快,9d以后与CIK相比2组细胞的增殖速度呈现明显差异。CIK+K562/ADR-DC细胞对K562/ADR的细胞毒作用在效靶比20:1范围内明显高于CIK细胞(P<0.05)。CIK组和CIK+K562/ADR-DC组细胞的P-gp和Mdr-1与对照组相比显著降低(P<0.05),ADR表达明显升高。结论:CIK+K562/ADR-DC对高表达P-gp的K562/ADR耐药细胞株表现出了特异性细胞毒作用,有效提高了细胞内ADR的含量,下调了P-gp蛋白和mdr-1基因的表达,从而使免疫效应细胞体外逆转MDR的效果得以显现。
- 蒋东霞何琳徐虹胡杰英买玲宋永平杨萍
- 关键词：细胞因子杀伤细胞DC细胞多药耐药
- 细胞因子诱导杀伤细胞联合阿霉素逆转人红白血病耐药细胞株K562／ADR的研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨细胞因子诱导杀伤（CIK）细胞与阿霉素对肿瘤多药耐药逆转作用的影响。方法体外诱导、扩增人外周血单个核细胞（PBMC）作为效应细胞，联合不同浓度的阿霉素与其耐药靶细胞K562／ADR进行共培养，经四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法计算半数抑制浓度（IC50）、耐药倍数和逆转倍数；流式细胞仪检测细胞内阿霉素相对含量和P糖蛋白（PgP）表达水平；RT—PCR检测mdr-1基因mRNA表达。结果阿霉素对K562和K562／ADR的IC50分别为（0．68±0．04）μmol／L和（66．23±4．38）μmol／L；K562／ADR对阿霉素的耐药倍数为97．43倍；经CIK细胞联合阿霉素处理48h（效靶比1：5、ADR1．1μmol／L）后，IC50为（32．15±0．79）μmol/L，联合逆转倍数为2．06倍。细胞内的阿霉素相对含量增加的同时PgP表达降低。mdr-1基因mRNA相对表达值也呈下调趋势。结论CIK细胞联合阿霉素可增加化疗药物阿霉素对耐药靶细胞K562／ADR的敏感性，提高耐药靶细胞内的阿霉素浓度，有效下调mdr-1基因及PgP的表达，使CIK联合阿霉素对多药耐药的逆转效果得以显现。
- 蒋东霞胡杰英杨晓博徐虹何琳买玲
- 关键词：细胞因子杀伤细胞阿霉素
- CIK细胞诱导及对K562细胞毒作用的研究被引量：1
- 2007年
- 目的体外诱导细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK),并研究其生物学活性。方法从外周血分离单个核细胞(PBMC),经过细胞因子诱导、培养并扩增CIK细胞,以LAK细胞作比较,检测CIK的增殖能力,流式细胞仪检测CIK细胞表面标志CD3、CD56,MTT法检测对K562细胞系杀伤活性。结果CIK细胞第二周进入快速增殖期,到第21d扩增倍数超过120倍,CD3+、CD56+细胞扩增倍数达15倍以上;CIK对K562细胞的杀伤能力明显优于LAK细胞。结论CIK细胞是一种具有很强杀瘤活性的免疫活性细胞,具有临床应用前景。
- 胡杰英蒋东霞徐虹何琳买玲宋永平杨胜利
- 关键词：K562细胞杀伤活性
