于洪巍
- 作品数：87 被引量：32H指数：3
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程农业科学化学工程更多>>
- Val22对恶臭假单胞菌扁桃酸消旋酶催化活性的影响
- 2011年
- 恶臭假单胞菌扁桃酸消旋酶的Val22位于20s环状结构上,是与底物结合相关的氨基酸之一。其中Val被替换为Arg后酶活性下降了75.9%。除了酶与底物疏水作用减弱以外,静电排斥作用增强也可能引起活性的下降。利用分子动力学模拟对酶与底物的米氏复合物进行分析,结果表明:突变后第22位氨基酸侧链与底物的静电势从0.036 kJ/mol升高至0.124 kJ/mol。这说明氨基酸侧链极性的改变增加了侧链与底物分子之间的静电排斥作用,因而静电排斥作用也是导致突变体活性下降的原因之一。同时,突变后系统势能增加了283 kJ/mol,进一步证实了第22位氨基酸侧链极性和带电性质的改变导致酶与底物结合状态的势能增大,从而引起活性大幅下降。因此,将来对酶的结合口袋区域进行理性设计时,除了考虑空间位阻效应外,还需考虑疏水作用和静电作用。
- 梅卓航刘击于洪巍
- 关键词：恶臭假单胞菌定点突变分子动力学
- 一种胞外分泌生育三烯酚的基因工程菌及其应用
- 本发明公开了一种胞外分泌生育三烯酚的基因工程菌及其应用。一种胞外分泌生育三烯酚的基因工程菌，包括底盘菌株和转入底盘菌株中的导入基因，所述底盘菌株为产生育三烯酚的工程菌株，所述导入基因包括红法夫酵母来源的香叶基香叶基焦磷酸...
- 于洪巍叶丽丹 焦学
- 一种利用葡萄糖从头合成12-氨基月桂酸的基因工程菌及其构建和应用
- 本发明公开了一种利用葡萄糖从头合成12‑氨基月桂酸的基因工程菌及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。所述基因工程菌以转化月桂酸合成12‑氨基月桂酸的工程菌株为出发菌，其基因组中整合了硫酯酶编码基因，或者宿主菌内含有包...
- 叶丽丹于洪巍葛佳炜
- 一种短链脱氢酶的突变体、编码基因及编码基因获得方法、突变体的应用
- 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种短链脱氢酶的突变体，所述突变体为突变体L104A、突变体A150Y、突变体Y155A、突变体I158A、突变体I202A或者突变体T205A；所述短链脱氢酶的氨基酸序列如SEQ I...
- 于洪巍李东炎夏娜娜
- D‑果糖‑6‑磷酸醛缩酶A突变体、重组表达载体、基因工程菌及其应用和反应产物
- 本发明提供催化活性显著提高的FSAA突变体及其核苷酸序列，以及含有相应突变体基因的重组表达载体和基因工程菌，通过这些FSAA突变体或含有相应突变体蛋白的基因工程菌不对称催化肉桂醛/α‑溴肉桂醛/4‑硝基肉桂醛/吡啶‑2‑...
- 于洪巍杨小红
- 氧化型辅酶Q10的发酵生产方法、及由其制备而得的高含量氧化型辅酶Q10
- 本申请涉及一种氧化型辅酶Q10的发酵生产方法、及由其制备而得的高含量氧化型辅酶Q10。该氧化型辅酶Q10的发酵生产方法的特征在于，在生产菌株的发酵过程中控制发酵液的氧化还原电势ORP为‑50～300mV，优选控制发酵液的...
- 袁慎峰于洪巍陈召峰朱永强闵一李永胡柏剡邱贵生于凯
- 文献传递
- 一种酶羟化3β-胆固醇乙酸酯制备7β-羟基-3β胆固醇乙酸酯的方法
- 本发明涉及一种制备7β-羟基-3β胆固醇乙酸酯的方法，尤其涉及了一种酶羟化3β-胆固醇乙酸酯制备7β-羟基-3β胆固醇乙酸酯的方法，包括下列步骤：将化合物3β-胆固醇乙酸酯溶解于助溶剂中，将溶解后的3β-胆固醇乙酸酯溶液...
- 于洪巍王博徐红娜
- 文献传递
- 一种生产视黄酸的基因工程菌及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种生产视黄酸的基因工程菌及其构建方法和应用，属于基因工程领域。本发明以产视黄醛的酵母工程菌株为出发菌，利用基因整合技术或者导入重组表达质粒的方式，使得来源于酿酒酵母的醛脱氢酶编码基因在工程菌株内成功表达，参...
- 叶丽丹于洪巍胡琼越
- 米黑霉脂肪酶基因的高效表达及活性测定被引量：4
- 2012年
- 为了实现米黑霉脂肪酶（Rhizomucor miehei Lipase,RML）基因在大肠杆菌中的高效表达,并得到大量的具有生物活性的脂肪酶,首先通过3种方式提高RML在大肠杆菌中可溶性蛋白的表达量：1）低温诱导（16℃）RML表达;2）新型分子伴侣（Skp）与RML N端融合表达;3）载体pET32a上的Trx.tag与RML N端融合表达。其次对各蛋白质进行纯化及活性测定,各种条件得到的RML比活在（226±10~247±10）U/mg。蛋白质表达结果显示：经低温诱导RML的效果最好,纯蛋白质量浓度为0.86 mg/mL,表明诱导温度是影响可溶性蛋白质表达量的关键因素;活性测定结果表明,Skp和Trx.tag与目的基因N端的融合没有影响RML活性中心（C末端）对底物的结合和催化能力。因此,RML不仅在大肠杆菌中得到高效表达,并且保持原有生物学活性,在工业生产中有应用价值。
- 王珏王丹张兵于洪巍
- 关键词：大肠杆菌活性
- 一种高立体选择性转氨酶突变体、编码基因及其应用
- 本发明公开了一种高立体选择性转氨酶突变体、编码基因及其应用，属于生物工程技术领域。所述转氨酶突变体是氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的紫色色杆菌来源转氨酶通过氨基酸突变所得的突变体，其中，所述氨基酸突变的位点为第1...
- 于洪巍衣晓敏叶丽丹
