丁晓婧
- 作品数：5 被引量：15H指数：2
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- H2型松弛素对慢性支气管哮喘小鼠气道重塑与肺组织细胞周期蛋白D1表达的影响被引量：7
- 2012年
- 目的研究H2型松弛素（H2 Relaxin）对慢性支气管哮喘（简称哮喘）模型小鼠气道重塑及肺组织细胞周期蛋白D1（cyclinD。）表达的影响，探索松弛素在哮喘治疗中的可能作用。方法将40只BALB／c小鼠按随机数字表法分为健康对照组、哮喘组、阴性对照组（vehicle）、松弛素组4组，每组10只；卵清白蛋白（OVA）致敏、激发建立慢性哮喘小鼠模型；vehicle组和松弛素组每日分别给予生理盐水和松弛素（0．25mg·kg-1·d-1）皮下注射。HE和马森（Masson）染色观察各组小鼠气道炎症及胶原沉积情况；采用免疫组织化学半定量法测定气道壁α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达；酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测肺组织羟脯氨酸含量；用逆转录一PCR（RT—PCR）及免疫印迹法（Westernblot）分别测定各组小鼠肺组织中cyclinD、mRNA和蛋白表达水平。结果哮喘组、vehicle组与健康对照组相比，嗜酸粒细胞浸润增多，气道管腔狭窄，平滑肌层增厚，胶原纤维增生，而松弛素组上述改变较此2组轻。与健康对照组相比，哮喘组、vehicle组小鼠支气管仪一SMA阳性染色面积／支气管基底膜周径显著增加（均P〈0．05），松弛素组小鼠支气管α-SMA阳性染色面积／支气管基底膜周径低于哮喘组和vehicle组（均P〈0．05）；哮喘组和vehicle组小鼠羟脯氨酸含量[每克肺组织中分别为（0．68±0．10）mg、（0．67±0．10）mg]高于健康对照组的（0．26±0．05）mg（q值分别为16．61和16．01，均P〈0．01），松弛素组小鼠羟脯氨酸含量为（0．40±0．06）mg，低于哮喘组和vehicle组（q值分别为10．88和10．26，均P〈0．05）；Westernblot检测结果显示，cyclinD．在哮喘组、vehicle组和松弛素组的表达（分别为1．38±0．18、1．50±0．10和0．724-0．13）高于健康对照组的0．38±0．10（q值分别为13．00、14．65和4．49，均P〈0．05），�
- 韩曙光吕蓓丽丁晓婧张洁黄茂
- 关键词：哮喘松弛素气道重塑
- Sunitinib对支气管哮喘气道重塑小鼠模型Erk通路和cyclin D1表达的影响被引量：6
- 2012年
- 目的探讨sunitinib对支气管哮喘(简称哮喘)气道重塑的干预作用及可能的作用机制。方法 18只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组以及sunitinib组,每组6只;以卵清蛋白(OVA)致敏、激发,建立慢性哮喘气道重塑模型。Sunitinib组每次雾化吸入前半小时给予sunitinib(40mg/kg)灌胃给药。OVA末次激发结束后24h处死小鼠,HE染色观察气道炎症及形态学改变,采用ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-13和血清总IgE的表达,免疫组织化学法观察肺组织增殖细胞核抗原(proliferatingcell nuclear antigen,PCNA)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达水平。蛋白印记法(Westernblot)测定细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,Erk)蛋白磷酸化水平及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达。结果 HE染色示哮喘组小鼠黏膜下层和平滑肌层增厚,管腔狭窄,大量炎性细胞浸润,sunitinib组上述改变较哮喘组为轻;sunitinib干预后哮喘小鼠BALF中Th2细胞因子IL-4、IL-13和血清总IgE以及肺组织羟脯氨酸含量显著降低(P<0.01)。哮喘组小鼠气道PCNA阳性细胞百分比、α-SMA表达及肺组织Erk磷酸化水平、cyclin D1蛋白表达较对照组明显升高(P<0.01),sunitinib干预后其表达均降低(P<0.01)。结论 Sunitinib可能通过抑制Erk途径影响cyclin D1的表达,抑制了慢性哮喘模型中气道平滑肌的增殖,发挥抗气道重塑作用。
- 张洁韩曙光吕蓓丽丁晓婧姚欣黄茂
- 关键词：气道重塑SUNITINIB细胞周期蛋白D1
- Quercetin对人气道平滑肌细胞增殖和迁移的影响及机制被引量：2
- 2012年
- 目的体外培养人气道平滑肌细胞（human airway smooth muscle cells，HAsMcs），探讨槲皮素（Quercetin，Que）对血小板源性生长因子BB（PDGF-BB）刺激的HASMCs增殖和迁移的影响及其机制。方法体外培养HASMCs，分为六组：对照组、PDGF-BB组、Que与PDGF-BB联合干预组、Que组、U0126组、U0126与PDGF-BB联合干预组。四甲基偶氮唑蓝（MTT）微量比色法测定HASMCs增殖，transwell法观察细胞迁移，Western blot法检测ERK的磷酸化及Cyclin D1表达水平。结果与对照组相比，PDGF-BB（20μg／L）显著诱导HASMCs增殖和迁移（P＜0．05），Que（20-80／μmol／L）呈浓度依赖性抑制PDGF-BB诱导的HASMCs的增殖和迁移（P〈0．05）。PDGF-BB组ERK磷酸化及CyclinD1表达水平较对照组明显增高（P〈0．05）。Que（80／μmol／L）及PDGF-BB干预组其表达量低于PDGF-BB组，此抑制作用与ERK特异性拮抗剂U0126作用相当（P〉0．05）。结论Que抑制PDGF-BB诱导的HASMCs的增殖和迁移，可能是通过调节ERK／Cyclin D1通路起作用。
- 吕蓓丽丁晓婧韩曙光张洁黄茂
- 关键词：人气道平滑肌细胞CYCLIN
- sunitinib对人气道平滑肌细胞分泌纤维连接蛋白的影响及其机制研究
- 2012年
- 目的探讨sunitinib对血管内皮生长因子165（VEGFm）刺激的人气道平滑肌细胞（human airway smooth muscle cells，HASMCs）合成、分泌纤维连接蛋白（fibronectin，FN）的影响及其相关机制。方法将HAsMCs分成6个组：对照组、VEGF165组、VEGF。与sunitinib联合干预组、sunitinib组、U0126组、U0126与sunitinib联合干预组。Western blot检测P—VEGFR2、P—ERK表达水平。ELISA检测细胞上清液中FN的表达水平。结果与对照组相比，VEGFt6。组p—VEGFR2、p-ERK及FN表达水平增高（P〈0．05）；sunitinib（3nmol／L）干预后p-VEGFR2、p-ERK及FN表达水平下降（P〈0．05），其对ERK磷酸化及FN表达的抑制作用与ERK特异性拮抗剂U0126对ERK磷酸化及FN表达的抑制作用相当（P〉0．05）。结论sunitinib抑制VEGF165；诱导的HASMCs合成、分泌FN，可能是通过抑制VEGFR2磷酸化水平从而进一步调控ERK通路起作用。
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- 关键词：气道重塑人气道平滑肌细胞SUNITINIB血管内皮生长因子纤维连接蛋白
- Sunitinib对支气管哮喘气道重塑小鼠模型Erk通路和cyclin D1表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨sunitinib对支气管哮喘（简称哮喘）气道重塑的干预作用及可能的作用机制。方法18只BALB／c小鼠随机分为对照组、哮喘组以及sunitinib组，每组6只；以卯清蛋白（OVA）致敏、激发，建立慢性哮喘气道重塑模型。Sunitinib组每次雾化吸入前半小时给予sunitinib（40mg／kg）灌胃给药。OVA末次激发结束后24h处死小鼠，HE染色观察气道炎症及形态学改变，采用ELISA法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IL-13和血清总IgE的表达，免疫组织化学法观察肺组织增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）、α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）表达水平。蛋白印记法（Western blot）测定细胞外信号调节蛋白激酶（extracellular signal-regulated kinase，Erk）蛋白磷酸化水平及细胞周期蛋白D1（cyclin D1）的表达。结果HE染色示哮喘组小鼠黏膜下层和平滑肌层增厚，管腔狭窄，大量炎性细胞浸润，sunitinib组上述改变较哮喘组为轻；sunitinib干预后哮喘小鼠BALF中Th2细胞因子IL-4、IL-13和血清总IgE以及肺组织羟脯氨酸含量显著降低（P〈0．01）。哮喘组小鼠气道PCNA阳性细胞百分比、α-SMA表达及肺组织Erk磷酸化水平、cyclin D1蛋白表达较对照组明显升高（P〈0．01），sunitinib干预后其表达均降低（P〈0．01）。结论Sunitinib可能通过抑制Erk途径影响cyclin D1的表达，抑制了慢性哮喘模型中气道平滑肌的增殖，发挥抗气道重塑作用。
- 张洁韩曙光吕蓓丽丁晓婧姚欣黄茂
- 关键词：气道重塑SUNITINIB增殖细胞核抗原
