马建忠
- 作品数：94 被引量：133H指数：7
- 供职机构：兰州理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 可激活酵母菌和植物细胞基因表达的多肽片段及验证方法
- 本发明提供了一种可激活酵母菌和植物细胞基因表达的多肽片段及其验证方法，通过在酵母菌单杂交系统中，对拟南芥AtDPBF4/EEL进行双向缺失突变分析，发现了可在酵母菌细胞中激活基因转录的两个多肽片段AD1和AD2；体外合成...
- 马建忠肖成斌马燕林王永刚张伟杰
- 文献传递
- 利用套叠PCR技术合成人胰岛素原基因的临床研究
- 2010年
- 目的设计并分子克隆适宜于大肠杆菌表达系统的人胰岛素原基因。方法以美国国家基因库(GenBank)发布的人胰岛素原的氨基酸序列为模板,参考大肠杆菌表达系统的密码子偏好性以及所用表达载体(pGEX-3x)的特点,经计算机分析、设计人胰岛素原基因为8个寡核苷酸片段,以重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术体外延伸获得完整的人胰岛素原基因,分子克隆后测定所得基因的核苷酸序列。结果经限制性内切酶分析确定为重组克隆的质粒进行核苷酸序列分析,结果表明,我们所克隆的基因序列完全符合我们先前的设计。结论SOE-PCR技术可用于体外寡核苷酸片段的延伸并获得完整长度的基因。TaqDNA聚合酶延伸反应前以Klenow片段处理可提高较短覆盖末端或较低专一性末端正确延伸的成功率。
- 马建忠周贤婧王永刚
- 关键词：人胰岛素原基因克隆
- 生物燃料:可再生物质能源的现状、发展与国际游戏规则
- 随着全球化的席卷，近年来生物燃料贸易谈判已经变得非常活跃。一般情况下，政策的改变主要源于对能源安全、经济目标、环境问题和意外事件的考虑。虽然各方都在呼吁一个公平竞争的生物燃料贸易规则，但目前这方面的动作还很小，政府和非政...
- 马建忠
- 关键词：对外贸易生物燃料可持续发展
- 嗜酸氧化亚铁硫杆菌RND家族转运蛋白基因(rnd-1)的克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2017年
- RND(resistance-nodulation-division)家族转运蛋白广泛分布于革兰氏阴性细菌中,具有催化胞内活性物质(胆酸盐,脂肪酸等)和外排金属离子(Cu^+,Ag^+)的作用。为探究嗜酸氧化亚铁硫杆菌(Acidithiobaeillus ferrooxidans,A.ferrooxidans)RND transporter的功能特性,以本实验室分离鉴定的A.ferrooxidans GB2为材料,采用PCR扩增技术克隆了rnd-1基因。运用生物信息学在线分析软件对该基因编码的氨基酸序列的理化性质、结构特征、功能结构域、系统发育以及可能参与的代谢通路等进行了预测。数据表明:该基因cDNA序列全长1 320 bp,编码439个氨基酸,分子式为C_(2100)H_(3330)N_(610)O_(604)S_(13),相对分子质量为47.204 kD,为亲水性蛋白;无信号肽,富含延伸链和无规则卷曲结构,三维结构预测表明其符合4KKU结构生物学特点;采用最大似然法构建系统发生树发现RND transporter蛋白在嗜酸氧化亚铁硫杆菌与嗜酸氧化硫硫杆菌中亲缘关系比较近;肽链含有10处磷酸化位点,10处糖基化位点,可能参与细胞质中磷酸化反应,从而对重金属胁迫进行感知和表达。本研究推测该基因在微生物抗重金属过程中有重要的作用。
- 冷非凡魏清伟王永刚景艳军孙尚琛麻慧王艳玲马建忠
- 关键词：嗜酸氧化亚铁硫杆菌RNDTRANSPORTER系统进化树
- 一种多功能多糖水凝胶的制备方法及用途
- 一种多功能多糖水凝胶的制备方法及用途，将川芎红花海带的混合，粉碎后用水提醇沉的方法提取多糖；得红川海粗多糖；然后加入无水乙醇/蒸馏水溶液中，在25℃下进行搅拌2小时；（3）取NaIO<Sub>4</Sub>，溶于水后加入...
- 张伟杰夏韵雅马建忠蒲秀瑛王永刚冷非凡王艳玲麻慧卢星如雷军强朵德祥郭登海
- 文献传递
- 靶向EGFR的重组蛋白光敏剂及其制备方法
- 靶向EGFR的重组蛋白光敏剂及其制备方法，涉及基因工程技术和抗肿瘤生物药物领域。本发明提供的重组蛋白质从N端到C端依次为表皮生长因子EGF干扰序列（从1到20共20个氨基酸）—linker蛋白序列（从21到35共15个氨...
- 张伟杰王永刚马建忠冷非凡蒲秀瑛陈卓张庭瑞
- 文献传递
- 三种蛋白质生物素化化学方法的比较研究
- 2023年
- 本文以N-羟基丁二酰亚胺(N-Hydroxy succinimide,NHS)活化酯偶联法原理为基础,探究结晶偶联法、反应液直接偶联法及二环己基碳二亚胺(dicyclohexylcarbodiimide,DCC)偶联法之间的优劣。旨在为实验室安全有效、快捷便利地进行蛋白质生物素化提供更优选择。分别用上述三种方法对牛血清白蛋白(bovine albumin,BSA)进行生物素偶联实验,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)以及紫外波谱扫描特征吸收峰鉴定偶联产物,用凝胶成像系统及Image Lab软件操作系统测定偶联产物相对分子质量,以此确定偶联比。结合上述定性、定量结果对三种偶联方法进行评价。结果显示,三种方法均可以将生物素偶联到BSA上。结晶偶联法首先通过化学合成活化酯并结晶,产率为37.28%,熔点为214~217,偶联比为8.9,单次反应成本128.71元;直接偶联法偶联比为7.0,单次反应成本34.01元;DCC偶联法偶联比为2.2,单次反应成本33.81元。综上可知,反应液直接偶联法相较于结晶法,其偶联效果与结晶偶联法相差无几;相较于DCC偶联法,其偶联反应进行过程中对载体蛋白的变性损失更小。且反应液直接偶联法操作简单,用时较短,过程安全,价格低廉。
- 童宇薛才王永刚马建忠
- 一种放线菌观测装置
- 本实用新型公开了一种放线菌观测装置，包括本体，所述本体的顶部固定连接有固定杆，所述固定杆的外侧活动连接有调节板，所述调节板的顶部开设有与固定杆配合使用的活动孔。本实用新型通过设置固定杆、调节板、活动孔、穿孔、定位装置、活...
- 唐丹高世欣李如姝马建忠张伟杰
- 文献传递
- 响应面法优化考马斯亮蓝G-250溶液的配制被引量：11
- 2013年
- 试验研究了各组分磷酸、乙醇、考马斯亮蓝G-250在考马斯亮蓝G-250溶液中的作用及其对测定蛋白质浓度灵敏度和准确度的影响,结合全波长扫描光谱法分析了溶液配制过程中的变色机理。在此基础上,以一系列牛血清白蛋白溶液标准浓度和测定值之间的差值平方和的均方(S值)为响应值,采用单因素试验和响应面分析法优化考马斯亮蓝G-250溶液的配制条件。结果表明,乙醇是用来降低水溶液的极性环境,促进考马斯亮蓝G-250的溶解;磷酸是为考马斯亮蓝G-250表面电荷发生变化的促进剂;两者构成了影响变色灵敏度的主要因素,考马斯亮蓝G-250分子在溶液中不同的存在形式使反应体系呈现出从蓝色→绿色→棕红色等颜色变化;响应面优化配制条件为:60 mg/L考马斯亮蓝G-250、50 mL/L 95%乙醇、130 mL/L 85%磷酸时,S值最小值为2.07,即在此配制条件下的牛血清白蛋白测定值与标准值最接近。同时以不同标准蛋白质为试样对所配制的溶液进行准确度和灵敏度试验,结果表明对牛血红蛋白、γ-球蛋白测定准确度和灵敏度较好,对胰蛋白酶、胃蛋白酶灵敏度较差,主要原因是由于蛋白质组成差异所引起的。
- 王永刚马建忠马雪青王玉丽苏移
- 关键词：磷酸乙醇响应面
- 一种抑制基因水平转移的方法
- 本发明公开了一种抑制基因水平转移的方法，涉及分子生物学领域及基因工程领域。本发明公开的抑制基因水平转移的方法，其包括：将目标外源质粒与loiP基因敲除的感受态宿主细胞混合。通过将宿主细胞的loiP基因敲除，降低转化率，该...
- 王永刚杨光瑞王玲陈凯马建忠冷非凡
- 文献传递
