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细粒棘球蚴全长cDNA文库的构建及初步鉴定被引量：11: 2001年; 目的　分离目的基因构建cDNA文库的经典方法繁琐且不易得到全长cDNA(3’和 5’端 ,尤其是基因的 5’非翻译区 )。本研究通过构建细粒棘球蚴全长cDNA文库 ,筛选全长目的基因 ,研究其结构和功能。方法　采用TRIZOL试剂提取E .granulosus总RNA ,用ClonTech公司的SMARTTMcDNA文库构建试剂盒构建E .granulosus原头节全长cDNA文库 ,文库的包装使用EICENTERTECHNOLOGIES公司提供的包装蛋白。结果与结论　成功构建细粒棘球蚴全长cDNA文库 ,文库滴度为 1.4× 10 7pfu/ml。文库的重组效率达到 99%以上 ,插入片段长度约为 1.1kb。; 陆家海陈慧红余新炳冯德元郭中敏; 关键词：细粒棘球蚴全长CDNA文库基因构建

恶性疟原虫FCC1/HN株CTP基因真核表达载体的构建(英文): 2002年; 目的　构建恶性疟原虫 CTP基因的真核表达载体 ,以便进一步研究其功能。　方法　根据 Genbank已发表恶性疟原虫CTP基因序列 (序列号为 X0 84 0 4 1) ,自行设计并合成了一对引物 ,通过聚合酶链反应扩增出 CTP基因 ,经 Hind 和 Bam H 消化后定向克隆入测序载体 p UC19,构建重组质粒 p UC19- CTP。经双酶切、PCR扩增和序列测定 ,证实插入片段与已知 CTP编码序列完全相同。用 Hind 和 Bam H 消化 p UC19- CTP,将双酶切下的 CTP编码基因片段定向亚克隆入真核表达载体 pc DNA3。　结果经双酶切和 PCR扩增鉴定证实 CTP基因正向插入真核表达载体 pc DNA3中。　结论　真核表达质粒 pc DNA3-; 陈慧红余新炳吴忠道陆家海徐劲; 关键词：恶性疟原虫聚合酶链反应真核表达载体基因表达

恶性疟原虫基因组结构研究进展: 2001年; 恶性疟原虫基因组结构研究进展较快,本文对恶性疟原虫在这方面的进展进行了综述,旨在为我国恶性疟原虫分子生物学的研究提供参考。; 陈慧红吴忠道余新炳; 关键词：恶性疟原虫基因组

恶性疟原虫海南株CTP基因测序重组质粒及真核表达重组质粒的构建: 2002年; 目的　构建恶性疟原虫CTP基因的测序重组质粒和真核表达重组质粒 ,以便进一步研究CTP基因的结构与功能。方法　根据已发表恶性疟原虫CTP基因的序列〔1〕,设计并合成一对引物。将扩增的CTP基因的PCR产物连接于测序载体pUC19上 ,经测序反应确定无误。用HindⅢ和BamHⅠ双酶切将CTP基因从测序载体中切下 ,构建于真核表达载体pcDNA3上。结果　构建了恶性疟原虫CTP基因的测序重组质粒 ,并对其进行了测序。并将恶性疟原虫的CTP基因从测序重组质粒中切下 ,克隆进真核表达重组质粒 pcDNA3。结论　成功地构建了恶性疟原虫CTP基因的测序重组质粒和真核表达重组质粒。; 陈慧红余新炳吴忠道徐劲; 关键词：恶性疟原虫聚合酶链式反应基因测序真核表达重组质粒

日本血吸虫新基因Sj Dad1的DNA免疫动物保护性实验研究被引量：8: 2002年; 目的　观察日本血吸虫未知基因SjDad1的DNA免疫保护动物实验效果 ,探讨其作为疫苗候选分子的可能性。方法　构建SjDad1的真核表达载体 pEGFP -N3 -SjDad1,两次质粒DNA免疫BALB/c小鼠后给予小鼠日本血吸虫尾蚴攻击感染 ,设置生理盐水对照组 (NS)和pEGFP -N3 对照组 ,攻击感染后 4 2天处死小鼠 ,计算减虫率和减卵率。结果　双酶切和PCR反应以及测序结果证实重组真核表达载体 pEGFP -N3 -SjDad1构建成功 ,DNA免疫动物的保护实验证明 pEGFP -N3 -SjDad1与生理盐水组相比对小鼠没有显著的减虫作用 (P >0 0 5 ) ,减卵效果具有显著性意义 (P <0 0 1) ,减卵率是6 5 74 %。结论　日本血吸虫 pEGFP -N3 -SjDad1有抗血吸虫生殖作用 ,具有疫苗研究开发价值。; 李焱余新炳吴忠道孟玮陈慧红彭寨玉; 关键词：日本血吸虫 DNA免疫动物实验免疫保护

利用RT-PCR的方法检测恶性疟原虫海南株FCC1/HN CT基因在红细胞内期的表达及CTP基因真核表达载体的构建(英文): 2001年; 目的利用反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）的方法检测ＣＴＰ基因是否在恶性疟原虫红内期表达，并构建ＣＴＰ因的真核表达载体，以便进一步研究其功能。方法按常规方法体外培养红内期恶性疟原虫，用Ｔｒｉｚｏｌ试剂提取红内期疟原虫总ＲＮＡ．通过ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增恶性疟原虫ＦＣＣ１／ＨＮ珠ＣＴＰＭ码基因并构建ＣＴＰ基因的真核表达载体。结果获得了恶性疟原虫ＣＴＰｃＤＮＡ的全编码区序列并将其克隆入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３。结论（ＣＴＰ基因在恶性疟原虫ＦＣＣ１／ＨＮ株红细胞内期表达并成功地构建了ＣＴＰ基因的重组表达质粒。; 陈慧红余新炳吴忠道徐劲陆家海; 关键词：恶性疟原虫反转录聚合酶链式反应基因基因真核表达载体

恶性疟原虫海南株CTP基因的克隆测序及序列分析: 2001年; 目的　测定恶性疟原虫 (P f)海南株CTP基因序列 ,了解该虫株CTP基因序列与其它种类的CTP基因序列的差异 ,用于药物靶位的筛选。方法　用PCR的方法特异性的扩增CTP基因 ,并将此基因克隆于测序载体 pUC19,采用Sanger双脱氧链末端终止法测序。结果　我国海南株的CTP基因序列与其它的CTP基因有不同程度的差异。结论　P .; 陈慧红余新炳吴忠道陆家海徐劲; 关键词：恶性疟原虫基因测序

细粒棘球蚴抗原B亚单位基因序列分析被引量：4: 2000年; 【目的】获得细粒棘球蚴抗原B亚单位基因序列 ,并进行序列分析。【方法】从包虫病羊体内获取细粒棘球蚴原头节 ,使用TRIZOL试剂提取总RNA ,逆转录成cDNA。根据E .granulosus抗原B亚单位基因的已知序列设计一对引物 ,采用RT PCR技术扩增出抗原B亚单位基因 ;将PCR产物纯化后用双脱氧链末端终止法进行序列测定 ,并进行序列分析。【结果】用RT PCR成功扩增出细粒棘球蚴抗原B亚单位基因序列 ,测序表明该基因ORF为 2 70bp ,和已发表基因核苷酸序列相比 ,缺失 3个碱基 ,同源性为 84 2 % ,推导编码氨基酸序列同源性为 77 8%。【结论】从E .granulosuscDNA扩增出抗原B亚单位基因 ,该基因编码 8ku亚单位前体蛋白。; 陆家海余新炳高劲松单志新陈慧红郭中敏; 关键词：细粒棘球蚴抗原B 基因扩增

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陈慧红