郭葆玉
- 作品数:76 被引量:197H指数:7
- 供职机构:第二军医大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金福建省农科院青年科技人才创新基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学一般工业技术政治法律更多>>
- 生物技术与生物技术药物
- 生物技术药物(biotech drugs)或称生物药物(biopharmaceutics)是集生物学、医学、药学的先进技术为一体,以组合化学、药物基因组学、功能抗原学、生物信息学等高技术为依托,以分子遗传学、分子生物、生...
- 郭葆玉
- 关键词:生物技术生物药物生物制药
- 文献传递
- 小鼠CCR5基因在活体内表达受迟发型超敏反应的调节
- 1997年
- 趋化因子(chemokine)在机体的免疫监视和慢性炎症反应中起着重要作用。β-趋化因子受体5(CCR5)是巨噬细胞嗜性(M-tropic)HIV-1进入靶细胞的一个重要辅助因子。作用在成功克隆一新的趋化因子受体5(muCCR5)中研究了该基因在小鼠活体内的表达。结果表明,muCCR5 cDNA全长2888 bp。
- 郭葆玉汪见斌原田明久久野耕嗣孙树汉向田直史
- 关键词:CCR5基因活体内趋化因子受体小鼠
- CCR5膜外一、二环模拟短肽对二甲苯致小鼠耳肿胀抑制作用的研究被引量:2
- 2010年
- 目的研究与CC趋化因子受体5(CC chemokine receptor 5,CCR5)第一、二膜外襻特异结合的模拟肽,对二甲苯致小鼠耳肿胀抑制作用。方法用噬菌体随机7肽库筛选与CCR5特异结合的多肽序列,建立二甲苯致小鼠耳肿胀模型;合成4段氨基酸序列分别为STFTTTL(SL)、TPITQLL(TL)、SLPLPKP(SP)、QTSSAAL(QL)的CCR5模拟肽,将4段短肽分别腹腔内注射至耳肿胀模型小鼠,以阿司匹林为抗炎药效学实验的阳性对照药。分别通过称重小鼠左、右耳片和将小鼠耳片HE染色的方法,观察4段CCR5模拟肽对二甲苯致小鼠耳肿胀模型小鼠的抗炎活性。结果左、右耳片通过称重,HE染色后,发现4段CCR5模拟肽均能显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀模型小鼠耳朵水肿、充血和炎性细胞的浸润。抑制率分别为53.4%、47.3%、31.3%、25.2%,效果显著(P<0.05)。结论合成的4段CCR5模拟肽具有对二甲苯致耳肿胀模型小鼠明显的抑制作用,提示CCR5可能在二甲苯致耳肿胀模型小鼠的发病进程中发挥着重要的作用。
- 郑慧敏郭葆玉
- 关键词:模拟肽耳肿胀
- 克隆人胸腺素α原cDNA及RNA二级结构分析和带Xa因子的融合表达被引量:11
- 2000年
- 目的:克隆表达具有重要生物功能的胸腺素α原cDNA(hum an prothym osinα, huPTMAα)。方法:从健康中国人PBMCpoly(A)+ RNA中采用RT-PCR法克隆huPTMAαcDNA,并作RNA二级结构分析。结果:克隆出长度为300 bp,编码100 个氨基酸的huPTMAαcDNA,经氨基酸序列分析发现在37~41 位缺失Asn37 -Gly38 -Asn39 -Ala40-Glu41 和65~68 位缺失Glu65-Glu66 -Glu67 -Glu68 ,与国际基因库连接检索证明是与huPTMAα有86.4% 同源性的一个新亚型,融合表达蛋白的相对分子质量为3.7×104,有促进IFN和TNF产生的生物学活性。结论:本研究克隆的huPTMAαcDNA是中国人中新发现的一个多态型基因序列,它的克隆并表达成功为今后该基因的免疫功能研究及中国人基因型研究分析提供了有用的材料。
- 郭葆玉余建国张淑英道书艳苗红邱磊
- 关键词:胸腺素Α原RNA克隆CDNA
- 腺相关病毒末端反向重复顺序折叠结构在真核细胞染色体基因组上的整合作用
- 1994年
- 腺相关病毒(Adeno-associatedvirus,AAV)是一类线状单股DNA(SS-DNA)的微小病毒。依据Cavalier-Smith的SS-DNA病毒复制模型原理,将其末端反向重复顺序(ITRs)分离,变为折叠十字架结构,再以其发夹中的3'-OH为引物合成另一股姊妹染色体DNA,然后共价连接到亲代分子上,与辅助病毒Ad2和PAAV/Ad共转染真核生物细胞。Southern印迹分子杂交结果表明:插入这一折叠结构中由SV40早期启动子控制的报告基因-新霉素抗性基因拷贝已整合到细胞基因组染色体上,这种以无细菌DNA分子为支架的折叠结构不仅证明了Cavalier-Smith的理论,而且可望为外源基因导入真核细胞提供新的又一系统。
- 郭葆玉胡宗林徐惠敏孔宪涛陆德如
- 关键词:腺相关病毒折叠结构基因转导
- 融合表达pGEX-Tα1的发酵研究被引量:1
- 2003年
- 为了研究重组人胸腺素α1(Tα1)工程菌的发酵工艺 ,在NBS MICROS15L自动控制发酵罐中 ,利用分批培养和补料分批培养技术培养含融合表达载体 pGEX Tα1的大肠杆菌DE3 (lys)。采用分批培养 ,得到的最终菌体密度OD60 0 为 8,GST Tα1融合蛋白的含量为 0 .1g L(发酵液 ) ;通过限制性流加补料 ,促进体系溶解氧能使发酵菌体密度及融合蛋白的含量显著提高 ,OD60 0 可达 3 2 ,融合蛋白的含量为 0 .7g L(发酵液 ) ,且融合蛋白主要以可溶形式表达 ,为后续蛋白纯化工作提供了便利。本研究确定了周期短、产率高且稳定的发酵工艺 。
- 苗红郭葆玉
- 关键词:发酵大肠杆菌胸腺素Α1
- 融合表达β趋化因子受体5NH_2端膜外第一襻及其特异抗体F(ab′)_2的制备被引量:3
- 1999年
- 目的:研究β趋化因子受体5(CCR5)NH2端膜外第一襻结构域的功能及其特异抗体F(ab′)2的制备。方法:计算机分析趋化因子超基因家族,定位超基因家族中同源顺序最低的结构域NH2端膜外结构域,PCR扩增出该结构域114个核苷酸序列。构建融合表达载体pGEX-IN/NR5,经测序鉴定正确后,在E.coli中表达,经纯化后免疫新西兰兔。蛋白A亲和层析和胰蛋白酶消化IgG,经Sepharose-12柱层析制备F(ab′)2。结果:经还原和非还原聚丙烯酰胺凝胶电泳和FAX分析证明得到抗CCR5NH2端的特异性抗体。结论:本方法为一简捷快速的特定功能结构域抗体F(ab′)2制备方法,对研究该基因在体内的表达及生物学功能提供了重要的实验材料,同时也对超基因家族中亚家族特异抗体研制提供了一种研究思路和方法。
- 郭葆玉张淑英程振球程振球松岛纲治
- 关键词:融合蛋白抗体CCR5
- 重组人MCP-1蛋白在骨肉瘤HD-MTX化疗过程中的辅助作用
- 2006年
- 目的:观察重组人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在骨肉瘤化疗过程中的作用。方法:建立裸鼠荷人骨肉瘤动物模型。应用重组人MCP-1和高剂量氨甲碟呤(HD-MTX)分别及联合对其进行治疗,设立空白对照。观察瘤体的生长及病理指标。结果:MCP-1抑制了骨肉瘤体的生长,但效果尚不理想;MTX明显抑制了骨肉瘤体的生长,效果显著,但可出现肿瘤再生长;MCP-1不但增强了HD-MTX对瘤体的抑制作用,而且使肿瘤再生长的时间明显延迟。结论:重组人单核细胞趋化蛋白-1在骨肉瘤进行高剂量氨甲蝶呤化疗过程中可起到显著的增强治疗作用。
- 陈宗雄徐皓郭葆玉陈锦华郑智勇陈金水杨国义
- 关键词:单核细胞趋化蛋白-1骨肉瘤裸鼠
- 乙型肝炎前S1蛋白的融合表达被引量:3
- 2000年
- 郭葆玉李文捷杜风鸣张淑英汤琰程振球
- 关键词:乙型肝炎前S1蛋白基因表达
- 胸腺素а原的生物学活性及基因表达谱芯片分析被引量:3
- 2002年
- 目的 :对一个新的胸腺素α原 (human prothymosinα,Pro Tα)进行生物学活性研究及基因表达谱分析。 方法 :用体外刺激小鼠脾细胞增殖进行实验及 EL ISA法检测 Pro Tα对 IL - 2和 TNF-α的诱导分泌作用 ,并用基因芯片技术对其表达谱进行分析。结果 :Pro Tα对小鼠脾细胞有明显的促进增殖作用 ,对 IL - 2和 TNF-α有明显的诱导分泌作用 (P<0 .0 1)。基因芯片研究发现 Pro Tα对蛋白酪氨酸磷酸酶基因、淋巴细胞抗原 6复合体、增殖相关基因 A等的表达有上调作用。 结论 :该新型Pro Tα在体外实验中有免疫调节活性 ,并诱导一些基因的表达。
- 邱磊郭葆玉苗红道书艳张冉袁鹏群杨旭
- 关键词:胸腺素Α原生物学活性基因表达谱芯片分析