郭爱莲
- 作品数：5 被引量：18H指数：3
- 供职机构：河南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省高校科技创新团队支持计划河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 日本沼虾表皮几丁质合成酶基因克隆及表达分析被引量：2
- 2015年
- 为了解日本沼虾几丁质合成酶(Chs)基因在蜕皮过程中的作用,本实验采用RACE技术首次从表皮中克隆了几丁质合成酶基因(Mn Chs)c DNA全长,并用生物软件对其序列进行生物信息学分析,RT-PCR技术检测该基因的时空表达模式。结果表明,其c DNA全长5 133bp,5'UTR为283 bp,3'UTR为159 bp,开放阅读框(ORF)长度为4 701 bp,编码1 566个氨基酸,分子量为179.57 ku,理论等电点为6.09,包含2个几丁质合成酶的标签序列EDR和QRRRW及Chitin-synth-C结构域。经BLAST比对,与日本仿长额虾、淡水枝角水蚤Chs相似性分别为89%和63%。RT-PCR结果显示,在蜕皮周期各阶段,不同组织Mn Chs的表达量差异显著:头胸甲在A期达到最高,胃肠在D0和D4期均较高,尾扇和肌肉在D4期最高,肝胰腺则普遍较低。结果表明,Mn Chs基因转录物不仅存在于表皮,在其他组织中也有分布,且mRNA水平的变化与蜕皮周期有关,作为几丁质生物合成的关键酶,推测该基因的表达在新外表皮和内表皮的形成中发挥重要作用。
- 王佩郭爱莲张宇吕艳杰宁黔冀
- 关键词：日本沼虾几丁质合成酶克隆
- 咪唑类物质KK-42提高日本沼虾成活率机制的研究被引量：1
- 2014年
- 目的：探讨KK-42提高感染嗜水气单孢菌后的日本沼虾成活率的机制.方法：首先将虾分为两组,分别用1.95×10^-4mol/L的KK-42溶液（处理组）或不含KK-42的溶液（对照组）浸泡1 min后取出,放置养殖水槽中饲养12h后,进行嗜水气单胞菌感染实验,每组又分别分为两个亚组（Challenged和Unchallenged）;于感染后的不同时刻,分别测定日本沼虾的成活率、细菌清除率及proPO基因（甲壳动物重要的免疫因子）表达水平和酶活力的变化.结果：KK-42预处理可以提高感染嗜水气单孢菌后的日本沼虾的成活率及细菌清除率;KK-42处理后3、12和24 h,proPO基因表达明显提高,PO活力也于6～48 h持续升高,在24 h达到最高值,是对照组的2.3倍.嗜水气单胞菌刺激也可诱导血细胞proPO mRNA水平及血清中PO活力的增加,但对照组分别在菌注射后3h和6 h,mRNA表达突然升高,而KK-42实验组则在整个时期处于缓慢升高趋势;PO活力变化趋势和基因表达相一致.结论：KK-42可以诱导proPO mRNA表达水平及PO活力的升高,并能提高沼虾细菌清除能力,可能是KK-42提高日本沼虾成活率的分子机制之一.
- 王文锋关建义郭爱莲杨洪宁黔冀
- 关键词：嗜水气单胞菌
- 日本沼虾血淋巴RNA提取方法的改进被引量：5
- 2012年
- 介绍了一种提取日本沼虾(Macrobrachium nipponensis)血淋巴RNA的改进方法.针对日本沼虾血淋巴中RNA含量较少,易被降解的问题,比较了常规的血淋巴RNA提取方法和改进后的RNA血淋巴提取方法,并进行了血淋巴酚氧化酶的扩增.结果表明,用改进的方法提取的RNA降解少,含量多,纯度高,可用于进一步分子生物学的操作,有着重要的实际意义.
- 刘清兰陈香丽郭爱莲宁黔冀
- 关键词：日本沼虾血淋巴RNA提取
- KK-42对日本沼虾蜕皮激素及其受体表达的影响被引量：8
- 2013年
- 用1.95×10-4 mol.L-1的KK-42处理日本沼虾1min,不同时刻抽取血淋巴、解剖肝胰腺.HPLC测定血淋巴中20E滴度,RT-PCR测定EcR和RXR mRNA水平.结果:KK-42处理后3h,6h,20E滴度分别比对照组增加了121.71%(P<0.05)、268.96%(P<0.01);EcR mRNA水平在处理后6h,12h,分别比对照组提高了233.56%(P<0.01)、110.73%(P<0.05);RXR mRNA水平在处理后3h、12h,分别比对照组提高了195.53%(P<0.01)、80.83%(P<0.05).表明KK-42可显著提高血淋巴中20E的滴度,并诱导肝胰腺中EcR和RXR的基因转录.
- 刘方陈香丽郭爱莲宁黔冀
- 关键词：日本沼虾ECRRXR
- KK-42对日本沼虾D_3期头胸甲表皮结构的影响被引量：6
- 2014年
- 为探讨KK-42缩短日本沼虾幼虾蜕皮周期的机制,实验采用组织学方法观察了幼虾头胸甲表皮结构,定量测定了肝胰腺N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)的活力。将体长(3.3±0.5)cm的日本沼虾随机分为两组,分别用1.95×10-4mol/L的KK-42溶液(实验组)或不含KK-42的溶液(对照组)浸泡处理1 min之后,选取处于蜕皮前期D3期的日本沼虾,观察头胸甲表皮结构,测定肝胰腺NAGase活力。结果显示,KK-42处理后第1天,头胸甲外表皮厚度与对照组相比显著增长42.83%;第3天和第9天,内表皮的厚度同比提高70.72%、77.27%,整个头胸甲的厚度同比显著增厚。KK-42处理后第3天,上皮细胞的高度比对照组提高31.69%。KK-42处理后6、12和24 h,NAGase活力分别比相应的对照组升高42.53%、34.28%和18.36%。研究表明,KK-42处理可显著增加D3期日本沼虾头胸甲外骨骼的厚度,提高肝胰腺NAGase活力。
- 吕艳杰陈香丽郭爱莲王佩宁黔冀
- 关键词：日本沼虾头胸甲NAGASE
