邓坤龙
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 供职机构:南华大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金湖南省科技厅项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 转录激活因子样效应物核酸酶对Hela细胞株CCR5基因靶点编辑作用研究
- 目的:含转录激活因子样效应物核酸酶(Transcription activator-like effectorsnucleases,TALENs)左臂TALEN F16.5与右臂TALEN R18.5的重组穿梭质粒pDC...
- 邓坤龙
- 关键词:CCR5HELA细胞
- 文献传递
- 基因突变敏感性分子开关检测β地中海贫血基因突变被引量:3
- 2012年
- 目的:采用高保真DNA聚合酶介导的基因突变敏感性分子开关准确、快速检测β地中海贫血。方法:首先提取正常人血液基因组DNA,根据已知β珠蛋白基因热点突变CD41-42、IVS2-654区域序列,分别设计突变序列扩增引物,利用低保真酶进行引物延伸反应,将其PCR产物克隆到pMD19-T载体,得到β地中海贫血常见的两个突变位点的基因突变克隆:CD41-42、IVS2-654,然后以这两个突变位点为检测靶点,分别设计3′末端与野生型基因位点或突变基因位点配对的引物,硫化磷酸修饰3′末端并偶联高保真DNA聚合酶构成的基因突变敏感性分子开关,对含有相应突变的阳性质粒模板及正常人基因组DNA模板进行引物延伸反应,并通过凝胶成像系统对其进行分析。结果:当引物与模板完全配对时,引物被延伸,有PCR产物;当引物与模板不完全配对时,引物不被延伸,无PCR产物。结论:高保真DNA聚合酶介导的基因突变敏感性分子开关能准确、快速筛查β地中海贫血CD41-42、IVS2-654突变,提示其在单基因遗传病的诊断中具有广阔的应用前景。
- 兰芬郭紫芬邓坤龙廖端芳李凯
- 关键词:Β地中海贫血