辛伟光
- 作品数：4 被引量：22H指数：3
- 供职机构：哈尔滨医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 微重力三维动态诱导骨髓间充质干细胞复合可注射型支架材料Pluronic F-127修复关节软骨缺损被引量：12
- 2007年
- 目的:利用三维动态诱导的同种异体非软骨来源种植细胞,复合可注射型支架材料聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物Pluronic F-127修复关节软骨缺损。方法:实验于2005-06/2006-03在哈尔滨医科大学附属第一医院动物实验中心完成。①选取2个月龄新西兰大白兔27只,3只用于骨髓间充质干细胞的分离,剩余24只随机数字表法分为诱导细胞复合支架组、单纯支架组、空白对照组,8只(16膝)/组。可注射型支架材料Pluronic F-127为白色粉沫状,无味,其水溶液在低温4℃呈液态,37℃形成固态凝胶(sigma公司,产品批号P2443)。②兔麻醉后穿刺抽取胫骨骨髓,分离培养骨髓间充质干细胞,取3代细胞进行实验。③收集细胞,离心成团,分4组不同诱导条件。三维动态培养组:10g/L藻酸钠溶液洗涤并重新悬浮细胞,细胞浓度为5×1010L-1,滴入200mmol/L氯化钙溶液,立即形成藻酸钙凝胶微球,细胞被悬浮固定于球内部,静止5min,取出凝胶微球,置于旋转式细胞培养系统,微重力条件下动态诱导。二维动态培养组:细胞直接接种于旋转式细胞培养系统,微重力条件下动态诱导。三维静态培养组:藻酸钙凝胶微球悬浮细胞接种于培养瓶静态培养。二维静态培养组:细胞直接接种于平面培养瓶静态培养。各组细胞诱导培养2周,制备切片,分别行甲苯胺蓝染色及Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色。柠檬酸钠溶液溶解藻酸钙凝胶微球,测定各组胶原和蛋白多糖含量。④各组兔的双膝均制备膝关节全层软骨缺损模型。诱导细胞复合支架组选取诱导分化最佳的骨髓间充质干细胞与25%可注射型支架材料Pluronic F-127在低温下混匀,重悬,细胞终浓度为5×1010L-1,注入股骨内髁软骨缺损区。单纯支架组只将25%Pluronic F-127注入股骨内髁软骨缺损区。空白对照组关节软骨缺损区不作任何处理。各组分别于术后4,8,12,24周取材,大体及镜下观察关节软骨表
- 王会才张震宇辛伟光
- 关键词：间质干细胞骨髓细胞
- 微重力条件下动态三维诱导骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞:与静态培养的比较被引量：6
- 2007年
- 目的:观察微重力条件下动态三维诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞的分化,并与静态培养作比较。方法:实验于2005-08/2006-04在哈尔滨医科大学附属第一医院中心实验室完成。穿刺抽取2月龄新西兰大白兔骨髓,密度梯度离心法分离纯化,体外培养扩增。取第3代骨髓间充质干细胞分组诱导培养:三维动态培养组:1%藻酸钠溶液洗涤并重新悬浮细胞,细胞密度为5×1010L-1,滴入200mmol/L氯化钙溶液,立即形成藻酸钙凝胶微球,细胞被悬浮固定于球内部,静止5min,取出凝胶微球,磷酸盐缓冲液充分洗涤,置于旋转式细胞培养系统,微重力条件下动态诱导。二维动态培养组:细胞直接接种于平面培养瓶,置于旋转式细胞培养系统,微重力条件下动态诱导。三维静态培养组:藻酸钙凝胶微球悬浮细胞静态培养。二维静态培养组:细胞直接接种于平面培养瓶静态培养。诱导培养2周后取材,甲苯胺蓝染色、Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,测定胶原和蛋白多糖含量。结果:①藻酸钠接触钙离子迅速形成透明凝胶微球,直径约为1.0mm,均匀一致,有光泽,易于操作。倒置显微镜下见凝胶微球中的细胞呈球形,核仁清晰,动、静态培养后立体结构相似。甲苯胺蓝染色阳性,表达Ⅱ型胶原,无明显Ⅰ型胶原表达。平面培养组细胞形态由梭形向多角形、多边形转变,核周可见黑色颗粒。甲苯胺蓝染色弱阳性,仅少数细胞表达Ⅱ型胶原。②与静态培养相比,动态培养出现明显软骨分化,动态培养组胶原和蛋白多糖产量均高于静态培养培养组,以三维动态培养组效果最佳[胶原:0.078±0.004,0.069±0.003,0.048±0.002,0.035±0.004;蛋白多糖:0.111±0.003,0.092±0.002,0.069±0.003,0.058±0.002,(P<0.05)]。结论:立体诱导优于平面诱导,微重力动态培养可提高细胞诱导分化质量。
- 王会才张震宇辛伟光
- 关键词：骨髓细胞干细胞软骨细胞
- 尺神经和尺动脉损伤同时修复46例被引量：4
- 2006年
- 尺神经在腕部的损伤尤为常见，并且通常合并有尺动脉的损伤。目前多数学者主张一期同时修复尺神经和尺动脉。自2000年1月至2004年9月间我院对46例尺神经合并尺动脉断裂伤患者行一期同时修复，手术前后检测掌指尺侧血流量改变，随访观察尺神经术后各项临床指标，提出修复尺动脉对尺神经功能恢复具有临床意义，现报道如下。
- 刘伟毕郑钢张震宇王会才辛伟光
- 关键词：动脉损伤尺神经神经功能恢复血流量改变尺动脉动脉断裂
- 可诱导共刺激分子基因表达抑制降低大鼠T淋巴细胞活化增殖能力的研究
- 2008年
- 目的RNAi抑制大鼠T淋巴细胞可诱导共刺激分子（ICOS）基因表达，观察其对T淋巴细胞功能的影响。方法选择4个干扰位点，插入pSilencer4．1-CMV neo载体，转染大鼠淋巴细胞。RT-PCR检测ICOS基因的抑制程度，流式检测ICOS表达变化。MLR检测细胞的增殖能力，ELISA法检测细胞因子IFN-γ和IL4分泌水平。结果转染后，T淋巴细胞ICOS的mRNA和ICOS分子表达水平下降（P〈0.05），淋巴细胞增殖能力明显降低，同时IFN-γ和IL4的水平也减低。结论大鼠淋巴细胞ICOS基因的表达抑制，降低了T淋巴细胞活化增殖能力。
- 刘伟毕郑钢陆晓峰张震宇张世谦辛伟光薄超钢
- 关键词：T淋巴细胞RNA干扰可诱导共刺激分子
