贾丽丽 作品数:35 被引量:56 H指数:4 供职机构: 中国食品药品检定研究院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
我国云南登革4型病毒减毒株生物学特性和全基因组序列研究 目的:对两株登革4型病毒减毒株(Ban18 HK20和Ban18 HK30)的部分生物学特性进行研 究,同时测定其全基因组序列并与母株(Ban18)序列比较,分析与毒力相关的位点.方法:将两株减毒株及 其母株在Vero细... 陈柠 李玉华 俞永新 贾丽丽 徐宏山 刘欣玉 王志伟 岳广智 杨立宏 董关木关键词:登革4型病毒 减毒株 毒力 免疫原性 我国云南登革4型病毒减毒株生物学特性及全基因组序列分析 被引量:1 2014年 目的 对我国云南登革4型病毒分离株(Ban18)及其减毒株(Ban18 HK20和Ban18 HK30)的生物学特性进行分析,测定原株和减毒株的全基因组序列并进行比对,分析与毒力相关的位点。方法 将各毒株在Vero细胞传代后进行空斑形态观察、小鼠脑内致病力和免疫原性检测;减毒株经空斑纯化后,挑选单克隆,检测其小鼠脑内致病力;提取减毒株基因组RNA,RT-PCR法分段扩增其全基因组序列并测序,应用DNAStar软件包进行序列比对分析。结果Ban18 HK20和Ban18 HK30毒株在Vero细胞上形成的空斑较其原株稍大,但边界较模糊;两个代次的减毒株对KM小鼠不致病,对2~4日龄乳鼠的脑内致病力也明显低于其原株;Ban18原株和Ban18 HK20毒株免疫的小鼠经3个剂量的国际标准株H241株脑内攻击后,均无死亡,但Ban18 HK30毒株与对照组相比,未显示出保护作用;Ban18 HK20毒株的9个克隆株中,3株对乳鼠的脑内致病力低于其他6株克隆株,Ban18 HK30毒株的5个克隆株对乳鼠的脑内致病力无明显差异;减毒株的两个代次病毒与其原株存在3个氨基酸[A→V(C-111)、I→T(E-155)、I→L(E-369)]和一个核苷酸[G→A(3’UTR-219)]的共同差异。结论 通过原代地鼠肾细胞传代的两个代次(HK20和HK30)病毒对小鼠的脑内致病力明显减弱,其中Ban18 HK20免疫原性较好,并从空斑克隆中筛选出3株毒力较Ban18 HK20更低的克隆株;C-111、E-155、E-369和3’UTR-219突变与毒力减弱密切相关。 陈柠 俞永新 徐宏山 刘欣玉 王志伟 杨立宏 岳广智 贾丽丽 董关木 李玉华关键词:登革4型病毒 减毒株 毒力 免疫原性 乙型脑炎减毒活疫苗质量控制中趋势分析的应用 目的应用趋势分析对乙型脑炎减毒活疫苗进行质量控制。方法采用统计学方法,对乙型脑炎减毒活疫苗生产企业和中国食品药品检定研究院的检测结果进行连续性趋势分析和周期性趋势分析。结果乙型脑炎减毒活疫苗批间一致性较好,企业的生产工艺... 刘欣玉 贾丽丽 董关木 徐苗 沈琦关键词:乙脑减毒活疫苗 文献传递 2016~2018年乙脑减毒活疫苗批签发概况和质量分析 被引量:4 2020年 随着脊髓灰质炎逐渐被消灭,流行性乙型脑炎(简称乙脑)成为亚洲儿童神经系统病毒感染和残疾的主要原因。乙脑由乙脑病毒引起,主要在东南亚地区流行,近年流行范围逐步扩大至澳大利亚。全球每年约发生70000例病例,病死率为10%~30%,另有30%~50%引起严重的神经和心理后遗症[1]。儿童是乙脑病毒主要易感人群,在我国除新疆、西藏、青海外均有发病与流行,对人民健康造成极大危害,国家卫生健康委员会将其列为乙类传染病。 刘欣玉 贾丽丽 徐宏山 李玉华关键词:乙型脑炎减毒活疫苗 批签发 我国云南登革4型病毒减毒株生物学特性和全基因组序列研究 【目的】对两株登革4型病毒减毒株(Ban18HK20和Ban18HK30)的部分生物学特性进行研究,同时测定其全基因组序列并与母株(Ban18)序列比较,分析与毒力相关的位点。【方法】将两株减毒株及其母株在Vero细胞传... 陈柠 俞永新 贾丽丽 徐宏山 刘欣玉 王志伟 岳广智 杨立宏 董关木 李玉华关键词:登革4型病毒 减毒株 毒力 免疫原性 文献传递 麻疹腮腺炎乙型脑炎联合减毒活疫苗及其制备方法 一种麻疹腮腺炎乙型脑炎联合减毒活疫苗的制备方法,其步骤包括:(1)分别制备麻疹疫苗原液、腮腺炎疫苗原液和乙型脑炎疫苗原液;(2)将三种单价疫苗原液分别与疫苗保护剂明胶蔗糖和人血白蛋白混合,得麻疹、腮腺炎、乙型脑炎三种单价... 李萍萍 贾丽丽 杨晓明 方志正 董关木 孙凌聪 易玲 桂金柱 吕文利 岳广智 刘晓娜 夏莉莉 刘钢 胡德祥 胡志雄 王志伟 徐宏山 刘欣玉文献传递 低神经外毒力乙脑病毒M47株的分子生物学特征 被引量:1 2014年 目的探究低神经毒力乙脑病毒M47株的分子生物学特征,以期找出其低毒力的分子基础。方法采用RTPCR法扩增M47株病毒全长基因片段,测定其序列,并与GenBank中19株代表性乙脑病毒株全基因序列进行核苷酸和氨基酸比对分析。结果 M47株属于基因Ⅲ型,与GenBank中19株代表性乙脑病毒株核苷酸序列同源性为79.4%-99.6%,氨基酸序列同源性为91.3%-99.6%;氨基酸序列比对发现,该毒株存在一个独特的氨基酸位点改变E-29(S-R)。结论 M47株独特的氨基酸位点改变E-29(S-R)可能是导致其低神经外毒力的原因。 刘欣玉 俞永新 贾丽丽 李玉华关键词:乙脑病毒 全基因序列 钴^(60)-γ射线辐照法对骨蜡中指示病毒灭活效果的验证 被引量:6 2013年 目的验证钴60-γ射线辐照对骨蜡中模拟污染指示病毒的灭活效果。方法将固体骨蜡制成腔壁0.7 cm厚的空心圆柱体的辐照用样品,空腔中分别加入6.61 Lg PFU/ml辛德毕(Sindbis)病毒、7.07 LgTCID50/0.1 ml脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)和6.01 LgTCID50/0.1 ml猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV),分别经5、10、15、20及25 kGy的钴60-γ射线进行辐照后,收集样品腔中的病毒液,采用噬斑形成法检测Sindbis病毒滴度,采用微量半数细胞病变法检测PPV和EMCV滴度。结果经不同剂量kGy钴60-γ射线辐照,Sindbis病毒、EMCV及PPV的病毒滴度随辐照剂量的增加而下降,辐照剂量增加至25 kGy时,可灭活3种病毒的量分别达6.03~6.60 LgPFU/ml、6.25~6.32 Lg TCID50/0.1 ml和4.75~4.88 LgTCID50/0.1 ml以上。结论 25 kGy的钴60-γ射线对骨蜡中的包膜和无包膜病毒均有较好的灭活效果。 岳广智 杨立宏 徐宏山 刘欣玉 董关木 贾丽丽关键词:Γ射线 骨蜡 脑心肌炎病毒 猪细小病毒 灭活 新一代高通量RNA测序在黄热减毒活疫苗(鸡胚细胞)毒种库质控中的应用 被引量:2 2023年 目的采用新一代Illumina/Solexa测序平台对黄热减毒活疫苗(鸡胚细胞)毒种在基因组水平进行质量控制。方法将黄热减毒活疫苗YF17D-204毒株接种原代鸡胚细胞,筛选鸡胚细胞黄热减毒活疫苗适应株,建立YFV17D-CEC三级毒种库;提取各级毒种病毒基因组RNA,制备RNA文库,采用新一代Illumina/Solexa测序平台进行高通量RNA测序,采用FastQC、Trimmomatic、SPAdes、GapFiller、PrInSeS-G、Prokka、RepeatMasker、CRT、NCBI Blast^(+)、KAAS、HMMER3、TMHMM,SignalP,LipoP、ProtCamp、MegAlign等生物学软件,对黄热病毒全基因组核酸序列进行基因组系统化分析。结果YFV17D-CEC三级毒种库全基因组全长为10862个核苷酸,其中119~10354位(10236 bp)为1个开放阅读框,编码3412个氨基酸。序列比对分析显示,YFV17D-CEC三级毒种库序列与YFV17D RKI(JN628-279.1)、YF/Vaccine/USA/Sanofi-Pasteur-17D-204/UF795AA/YFVax(JX503529.1)YFV17D-204(KF769015.1)同源性均为100%,三级毒种库全基因组未发生突变。比较黄热减毒活疫苗不同疫苗株序列发现,黄热病毒具有多个多态性位点。结论YFV17D-CEC在原代鸡胚细胞上具有良好的遗传稳定性。利用高通量RNA测序技术可快速检测YFV17D-CEC三级毒种库全基因组信息,序列分析数据可对黄热疫苗毒种库进行基因水平的质量控制。 徐宏山 黄艳秋 刘欣玉 贾丽丽 李玉华关键词:基因表达 黄热减毒活疫苗(鸡胚细胞)三级毒种库的建立和质量控制研究 2024年 目的:筛选黄热减毒活疫苗17D-204原代鸡胚细胞适应株,制备三级毒种库,并对毒种库质量控制研究。方法:筛选黄热减毒活疫苗生产毒种17D-204株,在原代鸡胚细胞上适应和驯化培养,获得鸡胚细胞适应株,并对毒种库进行质量控制研究。结果:黄热减毒活疫苗17D-204在原代鸡胚细胞最适宜培养温度为37℃,最适宜感染复数(multiplicity of infection,MOI)为0.0048;建立了黄热减毒活疫苗(17D-204(CEC))原始种子、主代种子批、工作种子批三级毒种库。对毒种库鉴别试验、病毒滴度测定、无菌检查、支原体检查、外源病毒因子检查、分枝杆菌检查等项目研究,均符合《中华人民共和国药典》三部规定。高通量测序显示,17D-204(CEC)在原代鸡胚细胞上传代7代,其基因序列未发生改变。也未发现内、外源病毒因子污染。结论:筛选出了鸡胚细胞17D-204适应株17D-204(CEC),建立了三级毒种库,传代稳定性和遗传稳定性均良好,为原代鸡胚细胞取代鸡胚卵黄囊制备黄热减毒活疫苗奠定了坚实基础。 徐宏山 黄艳秋 刘欣玉 贾丽丽 李玉华关键词:黄热病毒