许珏 作品数:17 被引量:113 H指数:7 供职机构: 中山大学附属第三医院 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 广东省社会发展领域科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
乙型肝炎病毒核心基因在毕赤酵母中的表达及表达产物在乙型肝炎病毒核心抗体检测中的使用评价 如何改善抗原质量,提高HBcAb检测的准确性,是医学检验工作者面临的严峻课题,也是我国目前肝脏疾病免疫诊断规范化发展的主要任务之一.本研究采用毕赤酵母表达系统,构建表达HBcAg的工程菌株,探讨酵母表达的HBcAg在HB... 梁敏坚 洪国强 李朝霞 胡波 许珏 李林关键词:乙型肝炎病毒 核心基因 毕赤酵母 抗体检测 文献传递 联合检测血清尿酸、β2微球蛋白和尿液轻链在多发性骨髓瘤早期诊断中的应用 被引量:16 2018年 目的探讨联合检测血清尿酸(UA)、β2微球蛋白(β2-MG)和尿液κ、λ轻链在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)早期诊断中的应用价值。方法选择96例MM患者(MM组)和85例健康体检者(对照组)作为观察对象,分别采用尿酸酶法和免疫透射比浊法测定血清中的UA、β2-MG含量;采用散射比浊法测定尿液中κ、λ轻链含量。结果不同性别、不同年龄段MM患者血清UA、β2-MG和尿液κ、λ轻链水平比较,差异均无显著性(P>0.05),MM组患者三项指标与对照组比较差异均有显著性(P<0.05)。联合检测血清UA、β2-MG和尿液κ、λ轻链用于诊断MM的灵敏度和特异度均高于三者单项检测和两两联合检测;三项平行联合检测灵敏度为93.32%,系列联合检测特异度为97.90%。结论联合检测血清UA、β2-MG和尿液κ、λ轻链可用于MM的早期诊断,具有较高的临床价值。 罗敏琪 张宏斌 许珏 覃舒琪 董慧敏关键词:多发性骨髓瘤 血清尿酸 血清Β2微球蛋白 急性胰腺炎患者血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素10水平变化及意义 被引量:17 2005年 目的探讨急性胰腺炎(AP)患者血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)的水平变化,以分析其变化规律及对病情判断的价值。方法应用ELISA法测定38例急性胰腺炎(LAP)及30例对照组血清TNF-α和IL-10水平。结果AP患者血清TNF-α和IL-10水平明显高于对照组(P<0.01),在发病第1天,重症AP患者TNF-α水平明显高于轻症AP患者,而IL-10则轻症AP患者较高,差异有显著性(P<0.01)。结论TNF-α和IL-10参与了急性胰腺炎的发生发展过程,可作为AP早期诊断的指标。 胡波 陈忠城 罗敏琪 许珏 吴宗华关键词:急性胰腺炎 肿瘤坏死因子Α 白细胞介素10 乙型肝炎病毒核心基因在毕赤酵母中的表达及表达产物用于乙型肝炎病毒核心抗体检测的评价 如何改善抗原质量,提高HBcAb检测的准确性,是医学检验工作者面临的严峻课题,也是我国目前肝脏疾病免疫诊断规范化发展的主要任务之一.本研究采用毕赤酵母表达系统,构建表达HBcAg的工程菌株,探讨重组抗原在HBcAb免疫检... 梁敏坚 洪国强 李朝霞 胡波 许珏 李林关键词:乙型肝炎病毒 核心基因 毕赤酵母 抗体检测 工程菌株 文献传递 基因工程重组乙型肝炎表面抗原与乙型肝炎Dane颗粒在乙型肝炎表面抗体检测中的联合应用 被引量:2 2005年 目的用DNA重组技术在毕赤酵母中表达多聚组氨酸融合重组乙型肝炎病毒表面抗原S蛋白,与血源乙型肝炎Dane颗粒联合使用,制备乙型肝炎表面抗体酶免试剂盒。方法将S基因插入酵母表达载体,转化毕赤酵母菌后表达重组抗原。表达产物包被聚丙乙烯反应板,与辣根过氧化物酶标记Dane颗粒配对,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测HBsAb。结果用重组HBsAg和Dane颗粒酶标记物制备的试剂对卫生部临床检验中心HBsAb质控物及血清标本进行检测,灵敏度达10mIu/ml,特异性达100%,重复性及线性良好,与进口商品试剂检测结果一致。结论毕赤酵母表达系统表达的具有良好免疫反应性和特异性的重组HBsAg,可与酶标记血源Dane颗粒配对制备HBsAb免疫检测试剂,Dane颗粒的其他抗原成分不会干扰检测的特异性。 梁敏坚 洪国强 胡波 许珏 李林关键词:HB 乙型肝炎表面抗体 血源 乙型肝炎病毒合成e基因在毕赤酵母中的表达及产物免疫学特性 被引量:7 2006年 目的合成适合酵母表达的乙型肝炎病毒(HBV)e 抗原基因,在毕赤酵母中表达出高免疫反应性和特异性的重组乙型肝炎病毒 e 抗原(HBeAg)。方法采取基因搭桥法及 Taq 酶聚合反应,选用酵母菌偏爱的同义密码子替换野生型 e 基因的部分密码子,制备合成 e 基因,插入 pPICZαA酵母菌表达载体。携带有合成 e 基因的 pPICZαA转化毕赤酵母菌株 GS115,经甲醇诱导表达 HBeAg。结果酶切电泳及 DNA 测序证实合成的 e 基因已正确克隆到表达载体中;聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、immunoblt 及 ELISA 显示 HBeAg 在毕赤酵母中高效分泌表达,表达量约为63mg/L,培养上清液 ELISA 测定效价1:81920,最大吸光度值达2.8;重组 HBeAg 与乙型肝炎病毒核心抗体间无交叉反应。结论毕赤酵母表达系统高效分泌表达出与乙型肝炎病毒核心抗原间无交叉抗原性、具有良好免疫反应性的 HBeAg。 李朝霞 席云 洪国强 胡波 梁敏坚 许珏 李林关键词:基因表达 毕赤酵母 酶联免疫吸附测定 肾病综合征患者TNF-α与IL-6水平变化及其意义 被引量:5 2006年 目的研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)在肾病综合征(NS)患者中的水平变化及其临床意义。方法采用特异性酶联免疫吸附实验检测40例体检健康者,30例NS发作组和28例NS缓解组患者血清中TNF-α和IL-6水平及其动态变化。结果NS发作组TNF-α及IL-6水平均明显高于正常对照组(P<0.01)及NS缓解组(P<0.01),而NS缓解组TNF-α及IL-6水平与正常对照组差异无显著性。结论研究提示TNF-α及IL-6水平升高可作为NS活动性的检测指标。 胡波 陈忠城 罗敏琪 吴宗华 许珏关键词:肾病综合征 肿瘤坏死因子-Α 白细胞介素-6 妊娠期糖尿病患者血清IL-6水平变化及意义 2007年 目的:探讨妊娠期糖尿病患者血清白细胞介素6(IL-6)水平变化及临床意义。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA夹心法)检测28例妊娠期糖尿病患者和30例健康对照者及22例正常孕妇组血清IL-6水平。结果:妊娠期糖尿病患者血清IL-6水平均明显高于正常孕妇组(P<0.01)和正常对照组(P<0.01)。结论:监测IL-6水平变化有助于了解妊娠期糖尿病的发病机制,并为临床诊断、病情监测及预后提供有益的参考。 许珏 吴宗华 张宏斌关键词:妊娠期糖尿病 白细胞介素6 慢性阻塞性肺疾病患者血清IL-8检测及其临床意义 被引量:7 2006年 目的:探讨血清IL-8水平在慢性阻塞性肺疾病(COPD)中的作用及临床意义。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测COPD患者急性期、稳定期及正常人的血清IL-8水平。结果:COPD患者急性期血清IL-8水平明显高于稳定期及正常对照组水平,差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。COPD患者稳定期血清IL-8水平明显高于正常对照组水平,差异有显著性(P<0.01)。结论:血清IL-8间接反映COPD病情严重程度,可作为监测治疗的一个重要指标。 林美玲 张宏斌 许珏关键词:COPD IL-8 ELISA 乙型肝炎病毒核心基因在毕赤酵母中的表达及表达产物在乙型肝炎病毒核心抗体检测中的应用评价 被引量:13 2005年 目的在毕赤酵母中表达出高免疫反应性和特异性的重组乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg),探讨该表达产物在乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)免疫检测中的应用。方法用PCR从含有乙型肝炎病毒DNA模板的质粒中扩增出编码HBcAg的C基因,插入pPIC9酵母表达载体。携带有C片段的pPIC9转化毕赤酵母菌株GS115,经甲醇诱导表达HBcAg。分别用分子筛纯化毕赤酵母表达的HBcAg(A)、单克隆HBcAb特异结合纯化毕赤表达的HBcAg(B)、分子筛纯化大肠杆菌表达的HBcAg(C)、单克隆HBcAb特异结合纯化大肠杆菌表达的HBcAg(D)作为固相抗原,辣根过氧化物酶标记多克隆HBcAb为探测抗体,用竞争抑制法酶联免疫吸附测定(competitiveinhibitionELISA)检测HBcAb标准品及含有乙型肝炎病毒PCR阳性和阴性血清的临床标本。结果聚丙烯酰胺凝胶电泳、immunoblot、ELISA显示HBcAg在毕赤酵母中高效表达;分别用抗原A、B、C、D制备的试剂检测中国药品生物制品检定所HBcAb国家参考品:试剂A与B结果相同:阴性符合率(-/-)15/15,阳性符合率(+/+)15/15;最低检出量(稀释度):灵敏度参考品2#=1∶128,3#=1∶16,4#=1∶64。试剂C与D结果相同:阴性符合率(-/-)15/15;阳性符合率(+/+)14/15;最低检出量(稀释度):灵敏度参考品2#=1∶32;3#=1∶16;4#=1∶32;大肠杆菌抗原的灵敏度明显低于毕赤酵母抗原。对乙型肝炎病毒PCR阳性及阴性的临床标本进行检测,结果如下:PCR阳性组HBcAb阳性检出率:试剂A97.8%;试剂B98.1%;试剂C96.6%;试剂D91.4%;A、B、C三组间比较差异无统计学意义(P>0.05);D分别与A、B、C相比较差异均有统计学意义(P<0.005)。PCR阴性组HBcAb阴性检出率:试剂A80.3%;试剂B80.9%;试剂C75.0%;试剂D85.7%;AB两组比较差异无统计学意义(P>0.05);AC、AD、BC,BD、CD相比较差异均有统计学意义(P<0.005);分子筛纯化的大肠杆菌HBcAg含有干扰检测的杂质,结果出现假阳性;大肠杆菌HBcAg存在表位缺失导致结果� 梁敏坚 洪国强 李朝霞 胡波 许珏 李林关键词:乙型肝炎病毒核心基因 乙型肝炎病毒核心抗原 HBCAB 毕赤酵母表达系统 阳性符合率