蒋满波
- 作品数:18 被引量:32H指数:4
- 供职机构:广东省中医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学机械工程更多>>
- 卵巢早衰患者来源的诱导多能干细胞的建系、鉴定及诱导分化被引量:8
- 2016年
- 目的:建立和鉴定卵巢早衰(又称原发性卵巢功能不全,primary ovarian insufficiency,POI)患者来源的诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs),研究其向原始生殖细胞分化的潜能。方法:将表达Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4和Lin28基因的p EB-C5和表达SV40 T抗原的p EB-Tg质粒转染POI患者的外周血单个核细胞,将其重编程为i PSCs并检测其干细胞多能性特性。添加转化生长因子β1(transfroming growth factor-β1,TGF-β1)和骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)后,应用real-time PCR和Western blot方法分别检测原始生殖细胞标志物的mRNA及蛋白表达水平。结果:通过碱性磷酸酶染色、细胞免疫荧光、拟胚体及畸胎瘤形成检测,证明了POI患者外周血来源的i PSCs可成功向3胚层细胞分化并保持多能性。添加TGF-β1和BMP4后,诱导组原始生殖细胞特异性标志物干细胞生长因子受体(stem cell growth factor receptor,c-Kit)、发育多能性相关蛋白3(developmental pluripotency-associated 3,STELLA/DPPA3)和DEAD盒多肽4(DEAD box polypeptide 4,VASA/DDX4)的mRNA水平明显升高(P<0.05),VASA/DDX4蛋白表达水平亦明显增加(P<0.05)。结论:POI患者外周血单个核细胞在体外可被成功诱导成无外源性基因整合的i PSCs,并且具有多能分化特性,添加TGF-β1和BMP4后可向原始生殖细胞分化。
- 文艳飞蔡柳洪何文曾敏慧蒋满波
- 关键词:诱导多能干细胞原始生殖细胞
- 纳米银避孕泡沫对阴道微生态的影响被引量:5
- 2014年
- 目的研究纳米银避孕泡沫对阴道微生态的影响。方法采用用药前后自身对比的方法,对30例使用纳米银避孕泡沫的性活跃期妇女进行阴道分泌物检测。结果妇女使用纳米银避孕泡沫后阴道炎症反应明显改善,白细胞脂酶降低,差异有统计学意义(P<0.05);而阴道菌群密集度稍上升,差异有统计学意义(P<0.05);对阴道细菌的多样性和优势菌的影响差异无统计学意义(P>0.05)。结论纳米银避孕泡沫对阴道微生态无不良影响,并且具有一定的抗菌效果。
- 蔡柳洪曾敏慧张滨林慧蒋满波文艳飞
- 关键词:纳米银阴道菌群阴道微生态
- 地中海贫血患者来源外周血及脐带血细胞诱导式多能干细胞的建系和造血分化被引量:4
- 2015年
- 目的探讨地中海贫血(地贫)患者特异诱导式多能干细胞系(i PSCs)细胞模型的建立及造血分化能力。方法采集Hb H病引产胎儿(α地贫)的脐带血、双重杂合子β地贫输血患者(基因型为IVS-Ⅱ-654/CD17)外周血各1例,分离单核细胞后进行短期培养,核转染再程序化为i PSCs,检测i PSCs未分化状态和多能性标志物。i PSCs与OP9细胞共培养向造血干细胞诱导分化,进行吉姆萨染色检查和流式细胞术检测造血干细胞的分化结果。结果地贫患者i PSCs表达干细胞多能性标志物Oct4、SSEA4、Tra-1-60、Tra-1-81,碱式磷酸酶染色阳性,悬浮培养可以形成类球形拟胚体,畸胎瘤形成实验显示地贫患者i PSCs可分化为内、中、外胚层细胞。流式细胞术检测结果显示CD34+细胞分别为8.71%(α-i PSCs分化结果)和4.46%(β-i PSCs分化结果)。结论α、β地贫患者外周血与脐带血可再程序化为i PSCs,该细胞系具有多能分化特性,与OP9共培养能分化为造血干细胞。
- 曾敏慧蒋满波文艳飞彭澄张滨蔡柳洪
- 关键词:地中海贫血造血分化
- 不育男性精子自发顶体反应率、顶体酶活性与精液常规参数及精子功能指标的相关性分析被引量:6
- 2021年
- 目的探讨不育男性精子自发顶体反应率、顶体酶活性与精液常规参数及精子功能指标的相关性。方法选取2019年4月至2020年2月广东省中医院生殖医学科诊治的77例不育男性作为研究对象。收集其实验室检测的精液分析数据进行回顾性分析。收集患者精子自发顶体反应、顶体酶活性、精子-透明质酸结合试验、精子DNA碎片、精子核蛋白、混合抗球蛋白反应试验(MAR)、精液常规分析的数据资料。采用Spearman相关性分析精子自发顶体反应率、顶体酶活性与精液常规参数及精子功能指标的相关性。结果精子自发顶体反应率与精子总数、尾部畸形率呈正相关(r=0.221、0.278,P=0.045、0.015),与平均路径速度(VAP)、顶体酶活性呈负相关(r=-0.223、-0.253,P=0.043、0.037);精子顶体酶活性与精子存活率呈正相关(r=2.84,P=0.018),与尾部畸形率呈显著负相关(r=-0.304,P=0.001)。精子自发顶体反应率、顶体酶活性与精子DNA碎片率、精子核蛋白不成熟度、精子-透明质酸结合率及MAR均无明显相关性(P>0.05)。结论精子自发顶体反应率、顶体酶活性与部分精液参数有相关性,但与多项精子功能指标无明显相关性。
- 周欢群蒋满波周文谢妍吴爱华王爱爱倪运萍陆杉
- 关键词:顶体酶活性精子DNA碎片
- 不同促排卵方案对宫腔内人工授精周期的疗效影响
- 目的:宫腔内人工授精是治疗不孕的重要手段之一,不同促排卵方案对卵泡发育、妊娠率等都有影响.方法:将2009年5月到2014年1月在中山大学附属第三医院不育与性医学科进行第一周期宫腔内人工授精(IUI)共458周期,按是否...
- 曾敏慧文艳飞蒋满波邢卫杰陶欣蔡柳洪
- 补肾活血方对精索静脉曲张大鼠生精功能的影响
- 2023年
- 目的:基于细胞周期调控因子细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖激酶4(cdk4)的表达探讨补肾活血方改善精索静脉曲张大鼠生精功能的机制。方法:将30只大鼠随机均分为假手术组,模型组,补肾活血方低、中、高剂量组,每组各6只。建立左侧精索静脉曲张模型,造模成功后补肾活血方低、中、高剂量组分别灌胃补肾活血方药液6、12、24 g/kg·d^(-1),其余2组灌胃10 ml/kg·d^(-1)的0.9%氯化钠注射液,灌胃30 d。检测精子浓度、活力、畸形率及DNA碎片率,HE染色观察睾丸组织形态,免疫组化分析睾丸cyclin D1、cdk4表达。结果:在大鼠浓度、精子活力、精子畸形率、精子DNA碎片率、睾丸病理评分及cyclin D1、cdk4表达方面模型组与假手术组比较,补肾活血方低、中、高剂量组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);补肾活血方低、中、高剂量组精子浓度、活力、畸形率、DNA碎片率组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:补肾活血方可能通过调控cyclin D1、cdk4表达来改善精索静脉曲张大鼠的精子发生。
- 周文陆杉蒋满波郑细闰谢妍袁启龙周欢群
- 关键词:精索静脉曲张补肾活血方CDK4
- NPT在男性勃起功能障碍法医临床鉴定中的作用和局限(附137例报告)
- 目的:总结男性勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)法医临床鉴定137例,评价夜间阴茎胀大(Nocturnal penile tumescence,NPT)检查对ED鉴定诊断的作用及局限.方法:整...
- 蒋满波蔡柳洪张滨陈俊齐涛王博李晓明
- 男性勃起功能障碍法医鉴定结果148例分析
- 目的:通过对男性勃起功能障碍法医鉴定案例的分析,探讨诊断勃起功能障碍时,全面考虑阴茎长度、勃起角度和硬度的重要性.方法:回顾性分析2009年1月到2013年5月间,中山大学附属第三医院不育与性医学科进行法医鉴定的男性勃起...
- 蒋满波蔡柳洪文艳飞曾敏慧张滨
- 新型内镜技术治疗射精管梗阻性严重少或无精子症
- 目的:探讨一种新型内镜技术(自然腔道精囊镜)治疗射精管梗阻性严重少或无精子症的有效性和安全性。方法:回顾性分析2009年12月至2017年3月间采用自然腔道精囊镜技术治疗46例射精管梗阻性严重少或无精子症患者临床资料。
- 肖恒军蒋满波齐涛陈俊王博臧志军张炎张浩庞俊高新
- 关键词:精囊镜梗阻性无精症射精管梗阻
- 神经生长因子β亚基基因修饰大鼠脂肪源干细胞的构建
- 2016年
- 目的构建过表达神经生长因子β亚基(h NGFβ)大鼠脂肪源性干细胞(ADSCs),为基因修饰ADSCs移植治疗神经损伤性勃起功能障碍(ED)大鼠模型提供种子细胞。方法获取人NGFβ基因,并与线性化的慢病毒载体p LV5-EGFP定向克隆连接。构建p LV5-h NGFβ-EGFP穿梭质粒转染HEK293T细胞,采用Western Blot检测h NGFβ基因在HEK293 T细胞中的表达情况。利用LV5慢病毒包装系统包装产生重组慢病毒,包装后扩增纯化并测定病毒滴度。h NGFβ基因重组慢病毒转染大鼠ADSCs,观察EGFP表达情况,用Western Blot检测h NGFβ基因表达情况。结果经实时荧光定量(PCR)鉴定、限制性酶切分析、测序鉴定和目的质粒Western Blot表达检测鉴定,证实p LV5-h NGFβ-EGFP重组慢病毒载体构建成功。重组慢病毒包装成功且病毒滴度为1.0×10^9 PFU/ml。Western Blot于大鼠ADSCs中检测到约13.5 KDa大小条带,其与h NGFβ蛋白分子量大小相一致。结论h NGFβ基因修饰的ADSCs构建成功,从而为基因修饰ADSCs移植治疗ED提供了良好的基因工程细胞。
- 齐涛王博吴杰英陈俊蒋满波叶雷张滨
- 关键词:神经生长因子干细胞慢病毒勃起功能障碍