肖少波
- 作品数：215 被引量：733H指数：16
- 供职机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生理学更多>>
- 一种猪干扰素λ4重组蛋白及其制备方法和应用
- 本发明属于生物技术领域，涉及一种猪干扰素λ4重组蛋白及其制备方法和应用。猪干扰素λ4（sIFN‑λ4）重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。将sIFN‑λ4片段连接到质粒中获得重组质粒，sIFN‑λ4的核苷酸...
- 肖少波肖循方六荣彭旋卢佑新周艳荣方谱县刘诗雨
- 伪狂犬病病毒Ea株糖蛋白gK基因的克隆、序列分析以及在大肠杆菌中的表达被引量：4
- 2003年
- 根据伪狂犬病病毒 (PRV) Ka株序列 ,合成 1对包含 g K基因完整编码区的引物 ,以 PRV Ea株 Bam H 5′片段为模板 ,扩增出 0 .9kb特异性带。将纯化的扩增产物克隆到 p Bluescript SK+ 中 ,构建了重组质粒 p SKg K,用双脱氧末端终止法进行序列测定 ,并同国外 Ka株进行比较。结果表明 ,Ea株 g K基因全长 939bp,编码 313个氨基酸 ,与 Ka株比较 ,Ea株 g K基因有 2 2处点突变 ,但无插入突变和缺失 ,同源性达 97.78%。将 g K基因克隆到原核表达载体p GEX- 2 T中 ,构建了 g K全基因原核表达载体 p2 Tg K939。再用 Bam H 、Xho 酶切 p2 Tg K939,回收 5 88bp g K小片段 ,克隆到原核表达载体 p GEX- KG中 ,构建了 g K部分基因原核表达载体 p KGgk5 88。经 IPTG诱导 ,g K全基因不表达 ,而 g K部分基因表达约 4 0 0 0 0融合蛋白。用 PRV高免血清经 Western blotting证明 ,g K有免疫原性。提取 g K包涵体并制备高免血清 ,EL ISA检测抗体效价为 1∶ 6 4
- 徐引弟陈焕春肖少波何启盖钱平
- 关键词：糖蛋白大肠杆菌伪狂犬病病毒基因表达基因克隆
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒侵入和释放依赖细胞膜胆固醇被引量：2
- 2011年
- 胆固醇是细胞膜脂质的重要组成成分.目前的研究发现细胞膜胆固醇在病毒的感染中扮演十分重要的作用.本研究对细胞膜胆固醇在猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染MARC-145细胞中的作用进行了探讨.通过TCID50检测和Real-Time RT-PCR分析发现,用胆固醇萃取剂甲基-β-环糊精预处理消除细胞膜胆固醇可显著抑制PRRSV的感染,并呈剂量依赖性;而补充外源性胆固醇后可部分恢复PRRSV的感染性,提示PRRSV感染能力的下降确实是由于细胞膜胆固醇的去除而导致的.进一步的研究证实,细胞膜胆固醇的去除对PRRSV感染性的影响主要是通过影响PRRSV的侵入和释放过程.上述结果表明,细胞膜胆固醇是影响PRRSV感染的一个重要因子.
- 孙颖肖少波王荡罗锐李彬陈焕春方六荣
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒胆固醇
- 对三种猪肠道冠状病毒易感的猪回肠上皮细胞株
- 本发明属于生物工程技术领域。具体涉及对三种猪肠道冠状病毒均易感的猪回肠上皮细胞株。通过对IPI‑2I细胞的克隆筛选，获得了一株对猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪δ冠状病毒(PDCoV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)均敏...
- 方六荣肖少波汪训磊刘康王荡方谱县
- 文献传递
- 一种Nluc标记的重组猪δ冠状病毒感染性克隆质粒的构建及其应用
- 本发明公开了一种Nluc标记的重组猪δ冠状病毒感染性克隆质粒构建及其应用，针对猪δ冠状病毒，采用BAC系统和CRISPR/Cas9技术相结合的方式，基于已构建成功的PDCoV感染性克隆质粒，先通过CRISPR/Cas9切...
- 方六荣方谱县肖少波张慧畅夏思进任杰张健淞
- 一种重组伪狂犬病－猪繁殖与呼吸综合征基因工程毒株及应用
- 本发明属于动物病毒基因工程技术领域，具体涉及重组伪狂犬病-猪繁殖与呼吸综合征基因工程毒株的构建、疫苗制备及应用。本发明得到一株重组伪狂犬病-猪繁殖与呼吸综合征基因工程毒株Pseudorabies virus HzauAV...
- 方六荣江云波陈焕春肖少波金梅林吴斌刘正飞
- 文献传递
- 一株猪流行性腹泻病毒变异弱毒株及应用
- 本发明属于动物病毒学与动物传染病技术领域，具体涉及一株猪流行性腹泻病毒变异弱毒株及应用。该弱毒株为猪流行性腹泻病毒AJ1102‑R株(保藏号CCTCC NO:V201433)，经细胞传代、蚀斑克隆和培育证明增殖性能稳定。...
- 方六荣曾松林肖少波王荡董楠丁珍
- 文献传递
- 伪狂犬病病毒Ea株ORF-1基因在BHK-21细胞上的表达被引量：2
- 2009年
- 以伪狂犬病毒Ea株BamHⅠ5′片段为模板,PCR扩增出约0.6kbORF-1基因完整编码区序列,将该基因克隆到pBluescriptⅡSK+中,构建重组载体pSKORF1。进一步将该片段插入真核表达载体pEGFP-C1的增强型绿荧光蛋白EGFP下游,构建真核表达载体pEGFPORF1,脂质体法转染BHK-21细胞,G418加压筛选至正常细胞完全死亡。在倒置荧光显微镜下观察,可见pEGFPORF1转染的细胞在细胞膜和细胞浆中发出较强的荧光,证明ORF-1基因在BHK-21细胞中获得了表达。
- 徐引弟陈焕春肖少波
- 关键词：伪狂犬病病毒克隆
- 牛疱疹病毒I型ul49(VP22)基因的序列分析及其表达被引量：3
- 2003年
- 余晓岚肖少波方六荣金梅林陈焕春
- 关键词：基因表达
- 湖北白猪CD154基因的克隆及表达
- 2007年
- 目的克隆湖北白猪CD154基因,并在大肠杆菌及HeLa细胞中表达。方法利用RT-PCR方法从湖北白猪外周血单核细胞中扩增出猪CD154基因的完整编码区,进一步PCR扩增获得缺失信号肽、跨膜区的截短型CD154,将其克隆至原核表达载体pQE-80L的6×His下游,获得原核表达质粒pQE-tCD154,转化大肠杆菌DH5α进行诱导表达。同时,将完整CD154基因克隆至真核表达载体pEGFP-C1的EGFP基因下游,获得融合蛋白表达质粒pEGFP-C1-CD154,转染HeLa细胞进行表达。结果原核表达质粒pQE-tCD154,转化大肠杆菌DH5α诱导表达出相对分子量(Mr)为29000的融合表达蛋白6×His-tCD154,Western blot分析证实表达的融合蛋白能与抗6×His的单克隆抗体(mAb)发生特异性反应。融合蛋白表达质粒pEGFP-C1-CD154,转染HeLa细胞,荧光显微镜观察到EGFP-CD154融合蛋白的表达主要定位于细胞膜。结论成功地克隆并表达了猪CD154基因。
- 袁明涛肖少波方六荣方亮陈焕春
- 关键词：湖北白猪CD154克隆
