管晓梅
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
- 供职机构：广西大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 兔胎儿成纤维细胞核型的分析
- 本试验以兔胎儿成纤维细胞为研究对象,采用Giemsa染色法制备染色体常规玻片,通过比较体外传代培养后不同代数的普通成纤维细胞和转染EGFP基因的成纤维细胞具有正常染色体睡的细胞比例,确定体外培养至第17代之前的普通兔胎儿...
- 管晓梅张顺杨金姬石金月蒋建荣陆凤花石德顺
- 关键词：繁殖生物技术成纤维细胞体外培养
- 文献传递
- 水牛卵巢颗粒细胞的分离培养及凋亡测定
- 本研究通过对水牛卵巢颗粒细胞进行分离培养，并对其增殖和凋亡情况进行测定，以了解水牛卵巢颗粒细胞体外生长特性，从而建立一种较为完善的水牛卵巢颗粒细胞的体外培养体系，为进一步研究水牛卵巢颗粒细胞在卵母细胞体外成熟中的作用机制...
- 高亚可陆凤花马帆陈施蓓乔树叶管晓梅石德顺
- 关键词：水牛胚胎学卵巢颗粒细胞体外培养
- 水牛胎儿成纤维细胞转染hTERT基因及其核移植效果的研究
- 胎儿成纤维细胞是常用的体细胞核移植供体细胞类型,但由于存在体外培养代次有限、转基因后损伤大等问题,限制了其在体细胞核移植中的应用。人端粒酶逆转录酶(hTERT)是端粒酶的核心成分,在端粒酶延长端粒过程中发挥重要的作用。本...
- 管晓梅
- 关键词：人端粒酶逆转录酶生物学特性体细胞核移植
- 文献传递
- 水牛胎儿成纤维细胞电转染条件的优化被引量：2
- 2013年
- 高活力的转基因细胞的制备是转基因克隆动物研究的关键环节。为了高效制备转基因细胞,外源基因转入水牛胎儿成纤维细胞的条件需要优化。采用组织块贴壁法分离获得水牛胎儿成纤维细胞,经染色体核型分析表明获得的细胞具有正常的生物学功能,可用于细胞转染。采用电穿孔法将载体EGFP-N1导入水牛胎儿成纤维细胞,分别比较不同电压(200V,250V,300V,350V)、不同电击时间(5ms,10ms,15ms)和不同细胞代数(第3代、第5代、第10代)的转染效率,并利用优化的电转染条件将乳腺特异性表达的水牛促乳素(PRL)基因导入水牛胎儿成纤维细胞,G418筛选获单克隆并进行鉴定。结果发现电压为300 V,脉冲时间为10 ms时,细胞GFP阳性率为35.5%,转染效率较高。随传代次数的增加,细胞的转染效率下降;传至第10代的细胞转染效率显著低于第3代的水牛胎儿成纤维细胞(30%VS 35.5%,P<0.05)。运用优化条件转染、筛选可获得转PRL单克隆细胞,转染效率为2.1×10-5(84/4×106)。挑取单克隆细胞扩大培养,经PCR鉴定和核型分析,证实单克隆稳定整合促乳素基因,并且核型分析正常,可作为核供体,用于生产水牛转基因克隆胚胎。为采用体细胞克隆技术生产水牛转基因胚胎奠定了基础。
- 罗婵任艳萍龚云杨素芳阮秋燕管晓梅蒋建荣石德顺
- 关键词：电穿孔转基因细胞
- 水牛孤雌胚胎印迹基因IGF2甲基化的研究
- 2014年
- 为了研究胰岛素样生长因子2(IGF2)如何调控早期胚胎的发育情况,试验采用亚硫酸盐修饰的方法并结合特异性PCR技术检测IGF2的调控区域在水牛孤雌胚胎的2-细胞、8-细胞、桑椹胚(morula)以及囊胚(blastocyst)时期甲基化水平的表达情况。结果表明:该基因的调控区域在孤雌激活胚胎发育的这几个时期甲基化水平差异不显著(P>0.05)。说明该区域的序列在孤雌胚胎的发育过程中没有发生甲基化修饰的变化。
- 阮子芸李政达马玉洁孙洪亮苏节管晓梅石德顺陆凤花
- 关键词：孤雌胚胎印迹基因甲基化水牛
- 兔胚胎移植影响因素研究被引量：1
- 2013年
- 【目的】探讨分析兔胚胎移植的影响因素，为提高兔胚胎移植效率及生产转基因兔奠定基础。【方法】采集获得的交配胚胎经体外培养后，按单只受体移植胚胎数、受体类型（经产母兔与青年母兔）、受体同期发情方式随机分组，对比观察胚胎移植后受体母兔的妊娠情况。【结果】单只受体兔每次移植10～20枚和20～30枚胚胎获得的妊娠率分别为23．1％和20．0％，二者差异不显著（P〉0．05）；采用经产母兔为受体可获得显著高于青年母兔的妊娠率（27．8％vs13．3％，P〈0．05）；以自然同期发情为受体母兔胚胎移植后获得的妊娠率显著高于诱导同期发情的受体母兔（30．7％vs10．0％，P〈0．05）。【结论】兔胚胎移植时选择自然发情的经产母兔作为受体能获得较好的胚胎移植效果，单只受体移植胚胎数以控制在10-30枚为宜。
- 黎江张顺管晓梅敖秋桅石金月刘荣立杨金姬向舒陆凤花韦英明石德顺
- 关键词：胚胎移植影响因素同期发情受体妊娠率
