林庆燕
- 作品数：60 被引量：201H指数：8
- 供职机构：深圳出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家质检总局科技计划项目深圳出入境检验检疫局科研项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学经济管理轻工技术与工程更多>>
- 蓝舌病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：6
- 2009年
- 用将纯化的蓝舌病病毒(BTV)免疫BALB/c小鼠,分离免疫鼠脾细胞,与SP2/0细胞融合,经间接ELISA筛选,得到了3株(1F5、4E5和6A1)可以稳定分泌抗BTV VP7特异性单抗的杂交瘤细胞株。用纯化的BTV免疫家兔,按常规方法制备BTV多抗。选用抗VP7单抗(1F5)包被ELISA板,用兔抗BTV多抗作为捕获抗体,建立了BTV双抗体夹心ELISA检测方法。用该ELISA方法分别检测BTV、鹿流行性出血病病毒、水疱性口炎病毒、赤羽病病毒、小反刍兽疫病毒阳性样品。结果表明,该ELISA方法具有良好的特异性。用该ELISA和RT-PCR同时检测259份临床样品,ELISA的特异性和敏感性分别为99.1%和85.7%,两种方法的符合率为97.7%。该方法的建立为BTV的检测及蓝舌病的流行病学调查提供了有效工具。
- 杨俊兴花群义陈焕春卢体康吕建强秦智峰陶红林庆燕陈兵徐聪郭莹洁
- 关键词：蓝舌病病毒双抗体夹心ELISA单克隆抗体
- 猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒A多重荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：15
- 2018年
- 为对引起腹泻症状的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪轮状病毒A(PRoVA) 3种病毒同时快速地鉴别检测,本研究对GenBank中登录的TGEV的S基因、PEDV的S基因、PRo VA的NSP基因进行序列分析,分别设计了针对3种病毒的特异性引物和用3种荧光基团标记的核酸探针,通过条件优化建立了针对这3种病毒的多重荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法能够特异性检测PEDV、TGEV和PRo VA,而与其它病原无交叉反应;对TGEV、PEDV和PRo VA的最低检测量分别为1.12拷贝/μL、39拷贝/μL和25拷贝/μL;组内和组间变异系数均小于5%;该方法与商品化的试剂盒检测结果符合率达100%。该方法快速、敏感,检测结果准确可靠,为猪病毒性腹泻疾病的流行病学调查和分子生物学快速诊断奠定了基础。
- 李军蔡良语陈兵刘建利孙洁陈书琨林庆燕陶虹吴绍强卢体康陈金顶秦智锋
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒猪流行性腹泻病毒荧光定量RT-PCR检测
- 三种家禽病毒多重RT-LAMP检测方法的建立与应用被引量：9
- 2016年
- LAMP检测方法由于具有扩增速度快、现场检测的潜力而备受关注。但目前的研究多是聚焦于单重LAMP扩增,只能进行单个目标的检测。本研究首次将禽流感、新城疫和传染性法氏囊三种病毒性疾病作为一个检测整体,建立了对三种疫病同时进行筛选检测的多重RT-LAMP检测方法。本研究首先通过减少LAMP标准反应体系中的外引物来减少引物之间的相互干扰;其次以Calcein为核酸染料,建立了禽流感、新城疫和传染性法氏囊三种病毒实时荧光多重反转录环介导等温扩增(multiplex real-time reverse transcription-LAMP,mRT-LAMP)检测方法;三是对该法特异性、敏感性及准确性进行了评价。试验结果显示:所建立的mRT-LAMP检测方法可对AIV、NDV和IBDV同时进行筛选检测,灵敏度可达到10个基因拷贝,与单重LAMP检测的灵敏度相当;所建立的方法特异性强,与其他病原体无交叉反应;小规模田间试验显示该法可用于三种病毒的快速筛选检测,结果准确可靠。结果表明:本实验建立的mRT-LAMP检测法可满足三种家禽病毒的快速筛选检测需求,具有一定的应用价值。
- 陈兵孙洁陈书琨曾少灵林庆燕刘建利陶虹曹琛福阮周曦吕建强杨俊兴吴绍强卢体康秦智锋
- 非洲猪瘟病毒VP73蛋白在昆虫细胞中的表达与间接ELISA方法的建立被引量：16
- 2013年
- 为了建立检测非洲猪瘟病毒(ASFV)间接酶联免疫吸附试验(iELISA),利用杆状病毒表达载体pFastBac HTA在昆虫细胞Sf9中表达非洲猪瘟病毒的VP73蛋白,SDS-PAGE和Western blot检测显示重组蛋白大小约65ku,能与ASFV标准阳性血清发生特异性结合。以此重组蛋白作为检测抗原包被酶标板,初步建立了检测ASFV血清抗体的iELISA方法。表达的重组蛋白具有良好的特异性,为制备ASFV免疫血清学诊断检测试剂和疫苗提供了材料。
- 曾少灵廖立珊唐金明杨俊兴阮周曦张彩虹曹琛福吕建强秦智锋林庆燕孙洁叶弈优谢晓露花群义
- 关键词：非洲猪瘟病毒间接ELISA
- 非洲猪瘟预警系统与快速检测技术
- 花群义徐自忠周晓黎秦智锋吕建强董俊杨建明杨云庆詹爱军林庆燕曾少灵阮周曦陈兵陶虹
- 该课题研究已按照合同规定的研究内容和考核指标，完成了项目的主要研究任务，达到了预期目标：1、根据Genebank中非洲猪瘟VP73基因序列，人工合成的VP73全基因克隆至pMD 18-T克隆载体质粒中，再进行亚克隆插入p...
- 关键词：
- 关键词：非洲猪瘟预警系统
- 近年深圳口岸进境饲料检测情况及安全性浅析
- 2011年
- 本文收集了近几年经深圳口岸进境的饲料在牛羊源性成分和沙门氏菌方面的检测情况,分析不同来源和种类饲料的质量安全情况,归纳引起有关进境饲料潜在风险的主要因素,对进境饲料进行安全性浅析。根据分析结果,结合深圳局进境饲料的实际情况,对进境饲料的检测提出建设性意见,为进一步提高问题饲料的检出率,杜绝劣质和危险饲料经深圳局口岸进境提供技术支持。
- 曾少灵秦智锋阮周曦孙洁廖立珊吕建强林庆燕陈泽华
- 关键词：牛羊源性成分沙门氏菌
- 小反刍兽疫病毒新型实用快速检测技术
- 刘胜利花群义卢体康秦智锋徐自忠吕建强林庆燕周晓黎曾少灵詹爱军阮周曦陈兵孙洁曹琛福张彩虹
- 小反刍兽疫（PPR）是一种严重的烈性、接触性传染病，被世界动物卫生组织（OIE）列为A类动物传染病，在我国被列为一类动物传染病。感染后发病率100%，严重暴发期致死率100%。2003年以来我国周边的老挝、孟加拉国、印度...
- 关键词：
- 关键词：小反刍兽疫病毒疫病
- 美洲型猪蓝耳病病毒高致病性变异株RT-LAMP检测方法的建立被引量：12
- 2010年
- 设计两套反转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)引物,建立了检测美洲型猪蓝耳病病毒及其高致病性变异株的RT-LAMP方法。采用RT-LAMP方法与实时荧光RT-PCR方法检测58份病料,结果一致,但RT-LAMP方法的灵敏度大约高出10倍。RT-LAMP方法特异性良好,检测猪瘟、伪狂犬病和细小病毒等均未出现交叉反应。结果表明,建立的美洲型猪蓝耳病病毒及其高致病性变异株RT-LAMP检测方法具有特异、灵敏、高效和简便的特点,在我国猪蓝耳病快速检测领域将有广阔的应用前景。
- 曾少灵孙洁秦智锋阮周曦林庆燕花群义曹琛福杨俊兴吕建强张彩虹陈兵陈书琨
- 关键词：RT-LAMP猪蓝耳病
- 猪蓝耳病病毒RT-LAMP和压电免疫蛋白传感器快速新型检测技术研究
- 秦智锋花群义卢体康詹爱军吕建强曾少灵孙洁林庆燕刘仲明李沛生阮周曦陈兵陈书琨张彩虹曹琛福
- 1987年，美国首次报道了猪蓝耳病,后该病呈世界性流行，给各国养猪业造成巨大损失。我国自1996 年首次分离到PRRSV病毒以来，该病先后在广东、上海、福建、内蒙古等省暴发和流行，目前该病在我国已普遍存在。但2006年～...
- 关键词：
- 关键词：猪蓝耳病病毒RT-LAMP
- H5N8亚型流感病毒双重实时荧光RT-PCR检测方法的建立与评价
- 2018年
- 流感病毒变异迅速,为研究和建立一种针对H5 N8亚型流感病毒核酸准确灵敏的检测方法,分别选择H5 N8亚型流感毒株序列相对保守的HA基因和NA基因作为H5 N8亚型流感病毒检测的靶序列,设计两套特异性的引物和探针,选择两种不同的荧光标记,建立基于TaqMan探针的双重荧光RT-PCR快速检测H5 N8亚型禽流感病毒检测方法。实验结果表明,所建立的H5 N8亚型流感病毒real time RT-PCR检测方法 HA基因检测的灵敏度为10-5,NA基因检测的灵敏度为10-5,重复性好,特异性佳。结果表明:本研究建立的双重荧光定量RT-PCR技术可以快速、准确地检测H5 N8亚型流感病毒,耗时短,可很快作出判定结果,适用于H5 N8流感病毒的分子生物学检测和监测。对于控制流感流行,减少经济损失,最大限度保护社会人群健康具有很大意义。
- 孙洁廖立珊廖立珊于力刘建利刘建利杨俊兴陶虹杨俊兴曾少灵林彦星黄超华
