杨建勇
- 作品数:6 被引量:26H指数:4
- 供职机构:北京生物制品研究所更多>>
- 发文基金:云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生化学工程更多>>
- 二苯氧乙醇对Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗效力的影响及安全性研究被引量:6
- 2007年
- 目的 检测二苯氧乙醇对3价减毒株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin IPV)效力的影响及其毒性。方法 将每毫升(每剂量)含二苯氧乙醇5、7mg的Sabin IPV分别放在4℃、37℃2和7d,用ELISA方法检测病毒D抗原含量,并进一步测定小鼠和豚鼠的免疫反应。按《中国生物制品规程通则异常毒性试验规程》检测其毒性。结果 含两种浓度二苯氧乙醇的Sabin IPV于37℃保存2、7d,两种疫苗中的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原含量、中和抗体的效价与不含二苯氧乙醇的对照组相比,无明显差异。观察期内,小鼠和豚鼠全部健存,没有异常反应。结论 二苯氧乙醇对Sabin IPV效力没有影响,安全性好,可以作为Sabin IPV的防腐剂。
- 卞传秀姜述德杨建勇孙明波谢明学张新文廖国阳李卫东
- 关键词:脊髓灰质炎
- 口服脊髓灰质炎减毒活疫苗猴体神经毒力试验参考品合格标准的统计分析被引量:1
- 2005年
- 验证口服脊髓灰质炎减毒活疫苗的猴体神经毒力试验参考品合格标准是否发生改变及其对疫苗猴体神经毒力试验检测结果的影响.按照WHO推荐的猴体神经毒力中枢神经系统病理学检定方法,统计分析了1996~2002年中猴体神经毒力试验三个型参考品各五批以上的实验数据.并对Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型参考品的病变好发部位腰、颈、脑的病变分数进行了比较.结果表明,Ⅰ、Ⅱ型参考品合格标准上、下限及C值有所下降;Ⅲ型参考品合格标准上、下限及C值略有升高.从病理学记分结果显示,三型参考品在腰、颈、脑部的致病力存在着差异;Ⅲ型参考品的致病变力向颈、脑部位扩散的指数明显增大.Ⅰ、Ⅱ型参考品合格标准对疫苗猴体神经毒力试验合格界线趋于严格,而Ⅲ型参考品猴体神经毒力病变指数由腰部向颈、脑部蔓延趋势的增大导致病变扩散指数和强度指数增大,从而使Ⅲ型参考品合格标准对疫苗的猴体神经毒力试验合格界线范围趋大,有可能对Ⅲ型疫苗制品合格率增大.
- 杨建勇王红燕柯为华郝容宽马建民
- 关键词:口服脊髓灰质炎减毒活疫苗神经毒力恒河猴参考品
- 抗脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原单克隆抗体的研制被引量:4
- 2006年
- 目的应用杂交瘤技术制备抗脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原的单克隆抗体。方法用脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原免疫雌性Balbc小鼠,取其致敏脾脏淋巴细胞与SP20小鼠骨髓瘤细胞融合。间接ELISA法筛选阳性克隆,制备腹水。检测McAb效价、抗体亚类和杂交瘤细胞核型。结果获得4株阳性杂瘤细胞株,选择一株制备腹水,ELISA效价为1∶2.4×106,中和试验效价1∶1.3×104,蛋白浓度为27.2mgmL。McAb与Ⅱ型Sabin株C抗原(ⅡC)、Ⅰ型Sabin株及Ⅲ型Phizer株D抗原(ⅠD、ⅢD)不发生交叉反应,具有高度特异性。结论成功的制备了针对脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原的McAb,为进一步研究IPV效力检测奠定了基础。
- 褚学者姜述德孙明波周铁群方捍华杨建勇张新文潘玥李卫东廖国阳
- 关键词:单克隆抗体D抗原
- W135群脑膜炎球菌发酵工艺的研究被引量:9
- 2005年
- 为研究A、C、Y、W135群流脑多糖疫苗,针对W135群脑膜炎球菌的生长特性,采用国产50L发酵罐,针对流脑半综合液体培养基中葡萄糖浓度;培养温度、菌种接种浓度、pH、通氧量及搅拌速度等因素对W135群脑膜炎球菌生长的影响,选择最适的培养条件.结果表明,选择半综合培养基中补加1%的葡萄糖培养效果良好,菌种接种浓度直接影响多糖复合物产量;最适pH值6.5~7.5的范围可维持W135群链球菌快速生长;温度控制在36.5±0.2℃可得到较高的培养产物;培养过程中加大通气量及搅拌速度对培养结果有明显改善.确立了W135群脑膜炎球菌的最适培养条件,在确定培养条件后连续进行3批500L罐放大中试培养,达到规模化生产要求.
- 杨建勇刘梅影林云张达伦王复禄吕世泽陈云张燕斌单璞王建华
- 关键词:发酵培养荚膜多糖
- A、C群脑膜炎奈瑟球菌免疫原性及毒性和传代稳定性研究被引量:1
- 2008年
- 目的为保证疫苗质量的一致性和可控性,对A、C群脑膜炎奈瑟球菌结合疫苗生产用菌株CMCC(B)29201和CMCC(B)29205株进行毒性和抗原传代稳定性研究,并对30代次菌进行脑腔毒性、免疫原性和产糖质量分析。方法将A、C群脑膜炎奈瑟球菌工作种子批菌种分别连续传代至30代次并收获3、5、10、15、20、25及30代次菌液,小鼠腹腔注射观察各代次毒性,试管凝集试验和间接ELISA测定各代次抗原性。其中30代次菌液进行小鼠脑腔攻击观察是否引起脑组织病理改变,小鼠皮下免疫观察免疫原性,同时进行发酵培养提取荚膜多糖的质量分析。结果CMCC(B)29201株和CMCC(B)29205株工作种子批菌种的半数致死量(LD50)均≥10^9个/ml,30代次内的LD50也均≥10^9个/ml,30代次菌液脑腔毒性测定显示均无病理改变;抗原性试管凝集效价均达1:320,30代次内的试管凝集效价均达1:320,ELISA几何平均滴度(GMT)分别为1:4835和1:3915,且30代次内的ELISA效价分别为1:4315和1:3752以上;30代次菌液的血清杀菌抗体均≥1:32,用第30代次工作种子批菌种生产的A群和C群脑膜炎奈瑟球菌荚膜多糖各项检定指标均达到国家标准。结论A、C群脑膜炎奈瑟球菌结合疫苗生产用菌株CMCC(B)29201和CMCC(B)29205株毒性低、抗原性和免疫原性良好,连续传代至30代次仍保持较低的毒性和较好的抗原性及免疫原性,纯化的A群和C群脑膜炎奈瑟球菌荚膜多糖质量符合质控要求。
- 王建华刘梅影王雪薇杨建勇陈芸吕世泽刘钰许正莉王义萍
- 关键词:脑膜炎奈瑟球菌免疫原性毒性抗原性荚膜多糖
- 双顺反子载体构建及其在基因联合免疫中的应用被引量:5
- 2006年
- 目的为了便于多价DNA疫苗的制备和基因表达的研究。方法以pcDNA3·0为基础构建了pcDNA3·0BA双顺反子载体,将HBVpreS2S与HCVpc154基因插入pcDNA3·0BA构建了单价和双价质粒。质粒转染Cos-7细胞瞬时表达,并经肌肉免疫BALB/c小鼠测定抗体应答和淋巴细胞增殖能力。结果pcDNA3·0BA全长为6·4kb,具有两个外源基因表达单元,其调控元件均为CMV启动子和BGHpolA;两个表达单元中多克隆位点单酶切分别为:MCS1为EcoRⅤ、NotⅠ、XhoⅠ;MCS2为:KpnⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ。双价质粒在Cos-7细胞中preS2S与HCVpc154两个基因都同时表达,诱导小鼠产生了抗HBs和HCV核心蛋白抗体,抗体效价和淋巴细胞对抗原刺激的增殖能力单价和双价质粒相比差异不显著。结论pcDNA3·0BA双顺反子载体可以共表达多个基因,并诱导产生免疫应答。
- 廖国阳毕胜利杨建勇李卫东陈俊英张新文姜述德