李苌清
- 作品数：27 被引量：92H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省重点科技攻关项目四川省应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 临床耐药革兰氏阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶及新型酶抑制剂研究
- 凌保东谢勇恩雷军张翔刘毅刘刚李苌清
- 该项目采用基因治疗技术对脱氧核酶作为新型酶抑制剂的抑制效应进行了初步研究。结果发现：⑴临床G-B产生ESBLs是导致其对第三代头孢菌素产生耐药性的主要机制之一，且呈现多重耐药和多基因耐药的特性。⑵本地区产ESBLs菌株通...
- 关键词：
- 关键词：酶抑制剂抗菌药物耐药性合理用药
- 儿科感染常见病原菌与头孢噻肟舒巴坦的抗菌活性分析被引量：1
- 2011年
- 细菌感染性疾病严重威胁我国儿童的健康。头孢噻肟舒巴坦作为新上市的抗感染药物，尚缺乏儿科临床使用经验。为了头孢噻肟舒巴坦在儿科临床中得到合理应用．本文对近几年临床儿科中常见病原菌及其耐药性进行调研，对头孢噻肟舒巴坦的体内外抗菌活性研究进行综述。
- 徐月娥阳国平李苌清谢莹莹王霆
- 关键词：耐药性抗菌谱合理用药
- 儿科感染常见病原菌与哌拉西林舒巴坦的抗菌活性分析被引量：2
- 2010年
- 细菌感染性疾病严重威胁我国儿童的健康。哌拉西林舒巴坦是专门针对产酶耐药菌感染而研发的新型β-内酰胺类复方抗生素,具有高效安全的优势,已用于儿科各类细菌性感染疾病的治疗。为了哌拉西林舒巴坦在儿科临床中得到合理应用,本文对近几年临床儿科中常见病原菌及其耐药性进行调研,对哌拉西林舒巴坦的体内外抗菌活性研究进行综述,以供临床儿科医师参考。
- 徐月娥阳国平李苌清谢莹莹王霆
- 关键词：哌拉西林舒巴坦革兰阳性菌革兰阳性菌合理用药
- 携带人PPARγ1受体基因高效真核表达载体的构建及其意义被引量：1
- 2007年
- 目的:构建高效表达人过氧化物酶体增殖物激活受体γ1(hPPARγ1)的真核表达载体,为hPPARγ1受体功能和基于hPPARγ1受体靶点的药物筛选提供分子研究平台。方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从HepG2细胞总RNA克隆hPPARγ1全长基因,与经XhoI、SmaI相同双酶切的pIRES2-EGFP载体连接,构建重组质粒phPPARγ1-IRES2-EGFP,经酶切及测序鉴定重组质粒中hPPARγ1基因的完整性和忠实性;荧光显微镜观察重组质粒转染的293细胞GFP报告基因表达强度,并对转染细胞hPPARγ1的表达进行荧光定量PCR及免疫细胞化学检测。结果:经酶切和测序证实重组质粒构建正确,并在转染的293细胞中获得hPPARγ1的高效表达。结论:成功构建phPPARγ1-IRES2-EGFP重组质粒,为基于hPPARγ1受体靶点的药物筛选平台的建立及受体功能研究提供了高效表达载体。
- 章涛李苌清杨俊卿万敬员蒋建新周岐新
- 关键词：基因克隆真核表达
- 小檗碱抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及其与过氧化物酶体增殖物激活受体γ的关系被引量：12
- 2009年
- 目的探讨小檗碱对人乳腺癌细胞MDA-MB-231体外生长的影响及其与过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的关系,以评价其在乳腺癌治疗中的应用潜力。方法采用MTT法检测小檗碱对MDA-MB-231细胞的生长抑制效应;TUNEL法检测细胞凋亡;联合PPARγ拮抗剂GW9662,分析小檗碱对MDA-MB-231细胞增殖的影响与PPARγ受体的关系;实验同时采用罗格列酮作为阳性药进行平行比较分析。结果小檗碱呈量-效和时-效关系抑制MDA-MB-231细胞生长,24h的半数抑制浓度(IC50)为0.21μmol/L;小檗碱诱导MDA-MB-231细胞凋亡作用随药物浓度的增加而增强;PPARγ受体拮抗剂不能逆转小檗碱对细胞增殖的抑制作用。结论小檗碱可明显抑制MDA-MB-231细胞生长,但与罗格列酮不同,其作用不通过PPARγ受体介导;小檗碱诱导MDA-MB-231细胞凋亡的效应较罗格列酮更为显著;小檗碱可望成为治疗乳腺癌的有效药物。
- 章涛李苌清杨俊卿刘颖菊万敬员周岐新
- 关键词：小檗碱MDA-MB-231细胞抗肿瘤效应
- 人PPARδ受体cDNA全长序列的克隆及测序
- 2007年
- 目的:对人过氧化物酶体增殖物激活受体δ(hPPARδ)全长cDNA序列进行克隆并测序,为构建含hPPAR δ基因真核表达载体及其受体功能研究奠定基础。方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从HepG2细胞总RNA克隆hPPARδ全长cDNA序列,胶回收目的条带后与pMD19-T载体连接并转化DH5α感受态菌,用BamHI、SalI双酶切及基因测序筛选、鉴定阳性克隆pMD19-hPPARδ-T载体中hPPARa基因的完整性和忠实性。结果:经酶切和测序证实pMD19-hPPARδ-T载体中插入的hPPARδ基因序列与GeneBank中提交的序列(AY919140)一致。结论:成功克隆了hPPARδ基因,构建了pMD19-hPPARδ-T中间载体,为含hPPARδ基因真核表达载体的构建和受体功能研究打下了良好的基础。
- 章涛袁野李苌清杨俊卿周元国周岐新
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体ΔCDNA克隆T载体测序
- 哌拉西林舒巴坦在儿科细菌感染性疾病治疗中的应用被引量：2
- 2010年
- 细菌感染性疾病严重威胁我国儿童的健康。哌拉西林舒巴坦是专门针对产酶耐药菌感染而研发的新型β-内酰胺类复方抗生素,具有高效安全的优势,已用于儿科各类细菌性感染疾病的治疗。但作为上市不久的创新抗感染药物,尚缺乏充足的儿科临床使用经验。为此,本文对哌拉西林舒巴坦在儿科各类细菌性感染疾病治疗中的合理应用进行分析,以供临床儿科医师参考。
- 徐月娥阳国平李苌清谢莹莹王霆
- 关键词：哌拉西林舒巴坦革兰阳性菌革兰阴性菌合理用药
- 耐头孢他啶大肠埃希氏菌产β-内酰胺酶的特性研究被引量：3
- 2005年
- 目的:研究耐头孢他啶大肠埃希氏菌产β-内酰胺酶的特性。方法:采用K-B纸片扩散法和等电聚焦对2株耐药大肠埃希氏菌产β-内酰胺酶类型进行初步判断;采用碱裂解法提取质粒并进行PCR扩增测序;β-内酰胺酶经饱和硫酸铵反抽提及SephadexG-75凝胶过滤和DE-52阴离子交换层析法纯化;以SDS-PAGE法测定其分子量及紫外分光光度法测定其酶动力学参数。结果:2株菌产生一种等电点为8.7的超广谱β-内酰胺酶(CTX-M-1V),分子量为29kDa,能水解头孢噻肟和氨曲南,不能水解亚胺培南,对舒巴坦(IC50=94nmol/L)和他唑巴坦(IC50=5nmol/L)敏感。结论:CTX-M-1V为对抑制剂敏感的CTX-M型超广谱-内酰胺酶。
- 李苌清谢勇恩凌保东周岐新雷军余娴
- 关键词：头孢他啶大肠埃希氏菌
- 硫酸铵反抽提法在纯化β内酰胺酶中的应用
- 2006年
- 硫酸铵价廉，不易导致蛋白质变性，常用于蛋白的分离和纯化。但硫酸铵抽提的分离纯化作用较弱，主要用于蛋白的浓缩。硫酸铵反抽提是根据在硫酸铵溶液中析出的蛋白质再次溶解有较高的选择性原理而建立的纯化方法。本研究采用配对设计对硫酸铵反抽提和抽提两法在纯化超广谱β内酰胺酶（ESBL）中的作用进行了比较，旨在为临床检验科室纯化ESBL提供简便易行的方法。
- 凌保东李苌清谢勇恩雷军余娴
- 关键词：超广谱Β内酰胺酶硫酸铵蛋白质变性纯化方法ESBL
- 人PPARγ1 LBD融合蛋白表达质粒的构建和诱导条件优化被引量：2
- 2008年
- 目的制备高纯度的人PPARγ1LBD融合蛋白,为筛选其配体奠定基础。方法以人脂肪组织总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增出人PPARγ1LBD基因的cDNA片段,将其插入表达载体pMAL-p2X的麦芽糖结合蛋白(maltose binding protein,MBP)编码基因malE的下游,转化宿主菌E.coli.TB1。并对重组质粒在大肠杆菌TB1中的表达条件进行了优化。结果经BamHⅠ和HindⅢ双酶切,获得分子量为909bpDNA条带;当诱导剂IPTG浓度为0.4mmol.L-1,30℃振荡诱导培养6h时,重组菌TB1高效表达MBP-PPARγ1LBD融合蛋白,表达量可达胞质总蛋白的38.54%。结论成功构建了能在TB1中高效表达人PPARγ1LBD融合蛋白的重组质粒,获得了具有高生物活性的融合蛋白。
- 田蜜李苌清常伟师凌云周岐新
- 关键词：MBP
