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地西泮单克隆抗体筛选及其用途: 本发明公开了涉及一种地西泮单克隆抗体的制备方法，特别是公开了一种地西泮单克隆抗体在快速检测ELISA方法中应用，属于生物技术领域。经羧基化改造后的地西泮EDC法与载体蛋白偶联，腹腔注射免疫5-6周龄Balb／c小鼠，结合...; 高志贤宁保安彭媛白家磊李桂敏孙思明; 文献传递

T7噬菌体尾蛋白P11的表达、纯化及鉴定: 2014年; 目的:表达、纯化T7噬菌体尾蛋白P11并进行鉴定。方法:PCR扩增T7噬菌体尾蛋白P11基因片段,EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后连接表达载体pTIG-TRX,重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,纯化目的蛋白,SDS-PAGE分析P11蛋白的相对分子质量大小,并多次免疫新西兰大白兔制备其多克隆抗体,Western blot鉴定蛋白活性。结果:PCR扩增P11基因后,成功诱导表达了含6×His标签的P11蛋白,SDS-PAGE显示所表达蛋白的相对分子质量约为25 000,通过多次免疫获得了抗P11的多克隆抗体并对其纯化;制备的多克隆抗体能够识别T7噬菌体和P11蛋白,具有较高特异性。结论:成功表达了P11蛋白并制备了其多克隆抗体,为T7噬菌体展示系统的应用奠定了基础。; 赵翠娇宁保安范献军李桂敏高志贤; 关键词：多克隆抗体

酶量热法检测农药阿特拉津: <正>目的在全世界范围内,三嗪类农药广泛应用于农业生产,每年因此减少了数以百亿元计的损失。但是该类农药具有环境持久性,已在土壤、表层水、人体组织及体液中检测到其存在。因次,建立对三嗪类农药残留现场、快速、有效的检测方法具...; 郄志伟吕志强柳明彭媛白家磊范献军李桂敏宁保安高志贤; 文献传递

量热免疫分析技术快速检测几种农兽药残留的研究: <正>目的近几年来中国食品安全问题频发,不仅严重影响食品品质,同时对人们身体健康构成严重威胁。食品生产过程中农兽药的非法、不合理使用是造成这种现状的重要因素之一。农兽药通过食物链进入人体,可造成多种危害。因此,建立针对典...; 郄志伟原林彭媛白家磊李桂敏田静菡刘原媛宁保安高志贤; 文献传递

同时检测己烯雌酚和雌二醇的免疫层析技术研究: <正>目的己烯雌酚和雌二醇作为雌激素调节剂被广泛使用。但由于药物滥用、工厂乱排等,此类化合物已在水和土壤中被发现,其半衰期长,易富集于动物体内,并通过食物链进入人体,影响人体激素水平,甚至致癌,严重危害人类健康。许多国家...; 白家磊范献军李桂敏彭媛赵丽赵翠娇姜随意原林宁保安高志贤; 文献传递

地西泮单克隆抗体的制备及其酶联免疫吸附检测方法的建立被引量：10: 2014年; 目的：制备地西泮(diazepam, DZP)单克隆抗体,并且对制备的抗体进行一系列性质鉴定。方法利用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐[1-ethyl-3-(3-dimethyllaminopropyl) carbodi imide hydrochloride, EDC·HCl]法合成免疫原和包被原,用免疫原免疫Balb/C小鼠,当效价到1：16000以后取小鼠脾脏与SP2/0进行细胞融合。然后采用竞争结合双阳性两步筛选法,筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,并且利用有限稀释亚克隆方法得到单株细胞,采用体内诱生法制备腹水型单克隆抗体。利用辛酸-饱和硫酸铵法对腹水型抗体进行纯化,利用酶联免疫吸附法、表面等离子共振仪(surface plasmon resonance, SPR)等方法对纯化后的抗体进行性质鉴定。结果成功合成了地西泮免疫原和包被原,免疫Balb/C小鼠7次后效价达到1：16000,最终制备出单克隆抗体,抗体解离常数(dissociation constants, KDs)为4.0985×10-7 mol/L,且与大部分结构类似物没有明显的交叉反应。应用此抗体建立间接竞争ELISA法,抗体的IC50=10.8 ng/mL,检测范围为0.45~862.00 ng/mL。结论本研究制备出了地西泮单克隆抗体,为地西泮的免疫学检测提供了有力的支持。; 李桂敏宁保安白家磊赵丽赵翠娇高志贤; 关键词：地西泮杂交瘤技术单克隆抗体酶联免疫吸附法

消减免疫法制备单增李斯特菌单克隆抗体及其用途: 本发明公开了一种消减免疫法制备单增李斯特菌的方法，属于生物技术领域。本发明首先用除单增李斯特菌以外的李斯特菌制备耐受原，用单增李斯特菌制备免疫原，用耐受原腹腔注射免疫5-6周龄Balb／c小鼠，注射完耐受原后10min，...; 高志贤宁保安彭媛白家磊李桂敏孙思明王春燕; 文献传递

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李桂敏