李权
- 作品数:5 被引量:13H指数:3
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- 腺苷对人结直肠癌细胞hMLH1基因甲基化的影响被引量:3
- 2014年
- 目的 探讨腺苷对人结直肠癌SW480细胞hMLH1基因甲基化的影响.方法 分别以0、1.5、3.0、4.5 mmol/L的腺苷干预SW480细胞72 h后,采用亚硫酸氢盐测序(BSP)法检测hMLH1基因启动子区CpG岛甲基化情况、反转录PCR法检测hMLH1 mRNA的表达、Western印迹法检测hMLH1蛋白的表达、采用流式细胞术检测细胞凋亡率;分别以0、1.5、3.0、4.5 mmol/L的腺苷干预SW480细胞24、48、72、96 h后通过四甲基偶氮唑盐(MTr)法检测各组细胞活力.结果 腺苷干预后1.5、3.0、4.5 mmol/L各组甲基化程度分别为65%±4%、45%±11%和16%±4%,均明显低于对照组(80%±4%,均P<0.01);hMLH1 mRNA转录水平、蛋白表达水平、细胞凋亡水平均明显高于对照组(0.230±0.032、0.359±0.029和0.570±0.019比0.079±0.010,0.353±0.016、0.654±0.018和0.854 ±0.014比0.126±0.016,11.9%±0.6%、20.0%±1.8%和35.8%±1.8%比3.9%±1.4%,均P<0.01).MTT法显示不同浓度腺苷干预细胞后,各组细胞活力均明显低于对照组(均P<0.05),有一定的时间-剂量依赖性.结论 腺苷可逆转hMLH1启动子区异常甲基化状态,使hMLH1表达增加,抑制细胞的增殖,促进细胞凋亡.
- 谢凯王亚旭申海鹰张灵敏曾令海舒宁波李权
- 关键词:结直肠肿瘤腺苷甲基化
- 腺苷干预人结直肠癌SW480细胞RECK基因甲基化及其机制
- 目的:探讨腺苷干预人结直肠癌SW480细胞RECK基因甲基化及其机制。 方法:分别用0,3.0 mmol/L的腺苷干预SW480细胞72 h后,亚硫酸氢盐测序法(BSP)检测RECK基因启动子区CpG岛甲基化情况;逆转...
- 李权
- 关键词:腺苷SW480细胞RECK基因甲基化
- 5-碘代杀结核菌素对HT-29细胞DLC-1基因的去甲基化作用被引量:1
- 2015年
- 目的探讨5-碘代杀结核菌素(5-iodotubercidin,ITU)对人结肠癌细胞HT-29株增殖凋亡及DLC-1基因表达的影响。方法不同浓度(0.1、0.5、1、2、4、6、8、10μmol/L)ITU作用于HT-29细胞48 h,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测HT-29细胞的增殖活性;ITU(0、2、4、6μmol/L)作用于HT-29细胞48 h,流式细胞仪检测其凋亡率;ITU(0、2、4、6μmol/L)作用于HT-29细胞48 h,亚硫酸氢盐克隆测序法(BSP)检测DLC-1基因启动子区Cp G岛甲基化情况;同上的处理细胞的方法,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肝癌缺失基因-1(deleted in liver cancer-1,DLC-1)mRNA的表达;Western blot检测DLC-1基因蛋白表达。结果 1ITU可明显抑制HT-29细胞活力,在一定范围内随着药物浓度增加抑制细胞活力的作用越强(P<0.05),以6μmol/L组对HT-29细胞影响最大,IC50=(5.92±0.62)μmol/L。2分别以0、2、4、6μmol/L ITU作用于HT-29细胞后,流式细胞仪检测各组凋亡率,分别为(9.56±2.21)%、(22.18±3.16)%、(34.23±3.16)%、(40.50±3.16)%,表明随着ITU浓度增加,对HT-29细胞的促凋亡作用越强。3经0、2、4、6μmol/L ITU处理后DLC-1基因启动子区Cp G岛甲基化率分别为91.67%、75.00%、61.67%、43.33%,表明ITU可以引起DLC-1基因启动子区甲基化程度降低。4在HT-29细胞中可检测到少量DLC-1 mRNA和蛋白的表达;相同条件经0、2、4、6μmol/L ITU处理细胞后检测显示DLC-1基因mRNA和蛋白的表达增加,并随浓度增长,mRNA及蛋白表达随之增加。结论 ITU可抑制人结肠癌HT-29细胞增殖,促进HT-29细胞凋亡,而这种抑制增殖作用可能和ITU降低DLC-1基因启动子区甲基化水平而诱导DLC-1基因上调有关。
- 张灵敏王亚旭谢凯曾令海李权
- 关键词:甲基化结直肠肿瘤
- 腺苷干预人结直肠癌SW480细胞RECK基因甲基化及其机制被引量:3
- 2015年
- 目的探讨腺苷干预人结直肠癌SW480细胞RECK基因甲基化及其机制。方法分别用0、3.0 mmol/L的腺苷干预SW480细胞72 h后,亚硫酸氢盐测序法(BSP)检测RECK基因启动子区Cp G岛甲基化情况;逆转录PCR、Western blot、流式细胞仪检测腺苷处理前后RECK基因mRNA和蛋白的表达、甲基转移酶(methyltransferases DNMT1,DNMT3a)蛋白表达及细胞凋亡的变化。结果腺苷干预后RECK基因甲基化程度明显低于对照组[(49.14±2.38)%vs(74.84±2.38)%,P<0.01];腺苷干预后RECK基因mRNA转录及蛋白表达、细胞凋亡均明显高于对照组[0.335 3±0.350 2 vs 0.080 0±0.003 6,0.603 0±0.017 8 vs 0.090 0±0.003 0;(27.90±2.32)%vs(5.09±0.30)%,P<0.01];甲基转移酶(DNMT1、DNMT3a)蛋白表达均明显低于对照组(0.141 3±0.002 1 vs 0.645 0±0.009 2,0.130 0±0.004 6 vs 0.526 7±0.009 5,P<0.01)。结论腺苷通过抑制甲基转移酶的活性,降低RECK基因DNA启动子区域的甲基化水平,使RECK基因mRNA及蛋白表达水平增加,促使SW480细胞凋亡。
- 李权王亚旭申海鹰谢凯张灵敏曾令海
- 关键词:RECK基因腺苷甲基转移酶
- 超声消融子宫肌瘤时对子宫内膜影响的形态学研究
- 目的: 通过对HIFU消融治疗子宫肌瘤时引起子宫内膜反应(包括阴道流血或阴道流液)的相关因素的回顾性分析,筛出可能引起子宫内膜反应的因素。同时用细胞在超声近场内的反应情况,超声消融离体子宫肌瘤时内膜的形态学变化以及超声...
- 李权
- 关键词:高强度聚焦超声子宫肌瘤子宫内膜宫腔镜