李晖
- 作品数:3 被引量:5H指数:1
- 供职机构:辽宁医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 腺病毒骨形态发生蛋白2绿色荧光蛋白基因转染兔骨髓基质干细胞成骨及示踪作用被引量:4
- 2009年
- 目的观察腺病毒介导的人骨形态发生蛋白绿色荧光蛋白基因(Ad-GFP-hBMP-2)转染对骨髓间质干细胞(bMSCs)成骨能力的影响。方法取日本大耳白兔4只自双侧股骨远端抽取骨髓培养bMSCs。以Ad—GFP—hBMP-2基因(实验组)及Ad—GFP(对照组)基因转染bMSCs后,用ALP检测试剂盒检测两组细胞的ALP活性;原位杂交检测两组细胞Ⅰ型胶原的表达;Westernblot检测细胞中BMP-2的表达。将转染后24h的bMSCs接种到裸鼠体内,术后第4、8、12周观察成骨情况。结果转Ad—GFP—hBMP-2基因组和Ad—GFP组各时间段ALP分泌量差异分别有统计学意义(P〈0.01);实验组Ⅰ型胶原原位杂交实验组为阳性。实验组成骨阳性率为90%,对照组为40%。结论bMSCs经Ad—GFP—hBMP-2基因转染后能高效表达BMP-2并诱导成骨。腺病毒介导人BMP-2转基因可以提高bMSCs的成骨能力。
- 胡汉祥刘丹平张正李晖王栋梁巴彩凤
- 关键词:基因转染骨形态发生蛋白-2
- 犬骨髓基质干细胞与异种骨复合修复自体尺骨缺损被引量:1
- 2007年
- 目的:观察骨髓基质干细胞与异种脱蛋白松质骨复合修复尺骨缺损的可行性。方法:实验于2006-01在辽宁医学院附属第一医院外科实验室(省级重点实验室)完成。①实验材料:取12月龄健康杂种犬18只,体质量(15.0±2.2)kg。②实验方法:将所有动物的双侧尺骨制备成中断20mm骨-骨膜缺损模型,骨髓基质干细胞与脱蛋白松质骨于体外复合培养后,将其植入其中16只犬的右侧缺损处作为实验组,左侧植入单纯脱蛋白松质骨作为对照组,另2只犬不植入任何材料为空白组。③实验评估:在4,8,12周分别行大体标本、扫描电镜和组织学观察,比较3组骨缺损修复的能力。结果:纳入健康杂种犬18只,均进入结果分析。4周时实验组支架材料部分吸收,植入物表面有纤维骨痂形成,对照组支架材料少量吸收,植入物表面有少量骨样组织形成;8周时,大体标本及组织学观察,实验组中的支架材料已完全降解,骨缺损部分修复,对照组中植入物两端少量新骨形成,材料中为纤维骨样组织;12周时,实验组骨缺损完全修复,对照组植入物两端有新骨包绕,与骨端连接紧密。12周时空白组骨缺损未修复。结论:利用体外扩增培养的骨髓基质干细胞与异种骨组合,具有较强的骨传导和骨诱导活性。
- 李晖刘丹平
- 关键词:组织工程骨骨髓基质干细胞异种脱蛋白松质骨细胞培养
- 狗骨髓基质细胞的分离培养及成骨潜能的研究
- 2006年
- 目的 观察狗骨髓基质细胞(MSCs)的生长特点及诱导条件下的成骨能力,为利用狗的MSCs进行成骨研究提供实验基础。方法 从成年狗胫骨取骨髓进行MSCs培养,检测细胞周期;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察细胞增殖;测定碱性磷酸酶活性;用Von Kossa染色法观察钙化结节。观察在条件培养液中MSCs生长及成骨分化情况。结果 MSCs增殖能力强,细胞周期显示有20%的细胞处于G0/G1期。诱导条件下的细胞碱性磷酸酶活性明显增高,10~12d达到高峰,并出现钙化结节。结论 体外培养狗的MSCs具有分化成骨的潜能,增殖能力强,可作为骨组织工程的种子细胞。
- 李晖刘丹平袁红霞张男赵卫华
- 关键词:骨髓细胞骨生成细胞培养成骨潜能种子细胞