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液态芯片技术检测Y染色体微缺失方法的优化: 2008年; 目的优化基于液态芯片检测高通量、快检测Y染色体微缺失的方法。方法以sY84、sY86(AZFa),sY127、sY134(AZFb),sY152、sY153(AZFd),sY242、sY254、sY255(AZFc)等9个Y染色体微缺失的STS位点作为检测区域,以sY14(SRY,男性性别决定基因)位点作内部对照。优化探针引物组合,建立基于液态芯片的多重PCR-技术检测Y染色体微缺失的方法。结果优化的引物对在多重PCR体系中显示特异的扩增效率;多重PCR产物与STS特异的探针微球杂交后,在Luminex上显示非常强的特异性的荧光信号。结论多重PCR-液态芯片技术检测Y染色体微缺失的方法具有高灵敏性、高特异性,高准确性,操作简单,结果可靠,使快速、高通量筛选男性不育症的分子缺陷成为可能。; 张介平施晓波曾莹吕立夏朱文斯; 关键词：Y染色体微缺失分子检测

液态芯片的高敏感性检测HIV-1 RNA: 2008年; 目的建立高敏感的液态芯片检测血液HIV-1 RNA的方法。方法抽提NASBA（nucleic acid sequence-based amplification）确定HIV-1 RNA载量的患者血浆RNA，对HIV-1引物进行生物素标记，行一步法RT-PCR扩增靶HIV-1 gag区片段。PCR产物与两个交联HIV-1特异探针的微球杂交，同时对于HIV-1病毒载量在100-790拷贝/ml样本进行荧光定量PCR检测。结果对NASBA确定阳性的上海108例（载量170-3 300 000）、COBAS定量的北京86例阳性（载量477-2 040 000）以及5例NIH的HIV标准品（〈100；273；1 610；11 300；33 800）的结果进行液态芯片多区段检测HIV-1 RNA，总阳性率为96.98%（193/199），液态芯片检测的敏感性与NASBA、COBAS方法相当（P〉0.05），对于HIV-1 RNA载量在180-790拷贝/ml的13个样本的荧光定量PCR未检测到信号，液态芯片检测结果为阳性。结论多区段液态芯片法检测HIV-1 RNA灵敏度高、特异性强、重复性好，降低漏检率，而且具有操作简便、快速、低成本的特点，将液态芯片技术应用于血液筛查将有助于提高HIV-1阳性血液的检出率和输血的安全性。; 王博吕立夏陈鸿萍邵一鸣钟平朱文斯; 关键词：HIV-1 液态芯片 NASBA 荧光定量PCR

几种中药提取物和药物对乙醇脱氢酶活性影响的研究被引量：25: 2006年; 目的:探讨了六种中药水提取物和醇提取物及几种药物对乙醇脱氢酶活性的影响,为中药解酒保肝药物的开发提供酶学依据。方法:选择古方中常用的几味解酒保肝中药及临床常用的药物,应用瓦勒-霍赫(Valle&Hoch)法体外测定这些药物对乙醇脱氢酶活性的影响。结果:白豆蔻和葛花的水提物、葛花醇提物、市售解酒保肝茶、九宝、葛花王、L-半胱氨酸,三七皂甙等对乙醇脱氢酶有激活作用,激活率分别为2.8%、16.0%、3.3%、40.1%、16.0%、14.3%、30.5%、10.1%。而葛根、三七、甘草、枳椇子、芦荟的水提物和醇提物、白豆蔻醇提物、盐酸雷尼替丁对乙醇脱氢酶的活性有抑制作用。结论:其中,有些药物可以通过提高乙醇脱氢酶活性来降低乙醇浓度,这可能是解酒药的作用机制之一。而其它药物的解酒机制不能单纯从酶学方面解释。; 李文哲芦洁孙晓宇汪世龙倪亚明朱文斯; 关键词：乙醇脱氢酶中药解酒

变性高效液相色谱在微生物基因检测中的应用研究进展被引量：9: 2006年; 变性高效液相色谱(D enaturing H ighP-erform ance Liquid Chrom atography,D H PLC)是一种可以对核酸片段进行灵敏、快速的分析,并检测出单碱基错配及插入缺失的新技术,在生命科学许多领域有广泛的应用.对D H PLC在致病微生物基因抗药性突变检测、基因型分析等领域的应用研究进展进行了综述.; 周明奎李文哲朱文斯; 关键词：变性高效液相色谱 DHPLC 突变检测基因型分析

膜反向点杂交技术在HIV-1耐药性点突变检测中的应用被引量：3: 2007年; 目的以 HIV 基因组 pol 区序列为靶基因设计可鉴别 HIV 耐药性突变的寡核甘酸探针对,应用膜反向点杂交技术检测 HIV-1耐药性点突变。方法以临床提取 HIV-1患者血清为模板,扩增产物与点在尼龙膜上的5对特异的寡核苷酸探针杂交。通过标记在 PCR 上游引物5′端的荧光素显色得到结果,并将其与测序结果进行对比。结果采用反向点杂交共检测了9例野生型和21例突变耐药型样本,检测结果与测序结果符合率为74%。5对探针对于野生型和突变型的扩增产物均有较好的区分性,敏感性高且信号强弱与相应产物在样本所占比例相关。结论应用膜反向点杂交技术检测 HIV 耐药性点突变敏感、简便、快速,具有较高应用价值。; 朱文斯袁真邢辉李新平曾盈邵一鸣吕立夏; 关键词：HIV-1 耐药性点突变寡核苷酸探针核酸杂交

CD4^+CD25^(nt/hi)CD127^(lo)调节性T细胞对HIV感染者免疫状态及病程进展的影响被引量：4: 2007年; 目的:探讨具有CD4^+CD25^(nt/hi)CD127^(lo)特征的调节性T细胞频率对中国HIV-1感染者免疫状态及病程进展的影响。方法:选取100名未经治疗的HIV-1感染者和4个年龄组的312名健康人对照,采集静脉血,经三重免疫荧光染色,用流式细胞术分析CD4+CD25+Treg表型和CD4^+CD25^(nt/hi)CD127^(lo)Treg频率并进行CD4+T细胞绝对计数;应用酶联免疫斑点技术(ELISpot)在单细胞水平观察受试者的HIV-1特异性细胞免疫功能;平行检测HIV感染者的病毒载量(NASBA方法)。结果:不同病程的HIV-1感染者外周血中CD4^+CD25^(nt/hi)CD127^(lo)Treg频率存在差异,进展期高于新近感染者(P<0.001),其平均水平显著高于健康人(P<0.001);CD4^+CD25^(nt/hi)CD127^(lo)Treg频率与HIV感染者CD4+T细胞数量呈显著负相关(r=0.354,P<0.01),与病毒载量呈明显正相关(r=0.287,P<0.01);高频率CD4^+CD25^(nt/hi)CD127^(lo)Treg HIV-1感染者(进展期)的外周血PBMCs经HIV-1多肽刺激后分泌IFN-γ的CD8+T细胞频率明显低于无症状的新近感染者。结论:初步证实HIV-1感染者外周血中CD4^+CD25^(nt/hi)CD127^(lo)Treg细胞频率增加与CD4+T细胞数量降低及病程进展相关;高频率CD4^+CD25^(nt/hi)CD127^(lo)Treg细胞对HIV-1感染者的细胞免疫功能具有抑制作用。本结果为进一步阐明HIV持续感染的免疫机制提供了新依据。; 周明奎薛以乐宫菊丽周磊明郑晓虹盖晶沈方伟张玮宁镇岳清卢伟潘启超康来仪钟平朱文斯王盈; 关键词：CD4+CD25+调节性T细胞 CD127

一种用于PCR的荧光定量检测装置: 本发明公开一种用于PCR的荧光定量检测装置，所述装置包括壳体、设置在壳体内可放置多个被测样品试管的载物盘、用于激发被测样品荧光信号的发射光源以及用于检测所激发出荧光信号的光线采集柱，发射光源及光线采集柱均固定设置在壳体上...; 朱文斯罗光弼吕立夏; 文献传递

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