徐一鸣
- 作品数：26 被引量：37H指数：4
- 供职机构：吉林省兽药饲料监察所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学哲学宗教更多>>
- 抗HIV-1 gp41单链抗体导向SEAD227A融合蛋白原核温控表达及活性检测被引量：1
- 2004年
- 目的 获得抗HIV 1gp4 1单链抗体与葡萄球菌外毒素A融合表达的重组导向毒素蛋白。方法 人工合成能广泛识别HIV 1gp4 1的单链抗体 (ScFv4 1)基因和金黄色葡萄球菌外毒素A(SEA)基因 ,将SEA基因第 2 2 7位编码Asp(D)的密码子GAT转换成编码Ala(A)的密码子GCT ,并对两基因进行密码子优化。以大肠杆菌温控型表达质粒pBV2 2 0为载体 ,分别构建单表达ScFv4 1的质粒pBV 4 1和SEA与ScFv4 1融合表达的质粒pBV SL4 1,转化大肠杆菌感受态细胞 ,通过提高温度诱导表达 ,表达产物经分子筛层析折叠复性后 ,检测单链抗体结合活性及重组导向毒素介导的细胞毒淋巴细胞 (CTL)杀伤活性。结果 表达质粒pBV 4 1和pBV SL4 1分别在E .coliBL2 1(DE3)plys中 4 4℃诱导 6h、4 2℃诱导 7h得到较高表达 ,经SDS PAGE、薄层扫描分析表明 ,目的蛋白分别占菌体总蛋白的14 .35 9%和 2 3.4 82 % ,目的蛋白经复性后可与HIV 1抗原条发生良好的结合反应 ,并且SL4 1可激活外周血淋巴细胞 (PBMC)并介导其杀伤稳定表达HIV 1gp16 0蛋白的靶细胞。结论 成功得到ScFv4 1与SEA融合表达蛋白SL4 1,为研制抗HIV 1重组导向毒素奠定基础。
- 王宏金宁一徐一鸣金洪涛张立树江文正
- 关键词：活性检测淋巴细胞
- 反向遗传学技术及在其RNA病毒研究中的应用
- 反向遗传学(Reverse Genetics)是相对于经典遗传学而言的,因为经典遗传学是从生物的表型、性状到遗传物质来研究生命的发生与发展规律的,反向遗传学则是直接从生物的遗传物质入手来阐述生物生命发生的本质现象,与之相...
- 鲁会军韩松徐一鸣金宁一
- 关键词：RNA病毒基因克隆
- 文献传递
- 靶向喉癌的蜂毒肽重组抗体的构建及鉴定被引量：2
- 2014年
- 利用大肠杆菌表达系统制备了重组融合蛋白antiEGFR/MEL,并用Ni2+层析柱对其进行了纯化.该重组蛋白中抗表皮生长因子受体(antiEGFR)单链抗体(scFv)主要靶向喉癌细胞中的EGFR,而蜂毒肽(MEL)主要抑制肿瘤细胞增殖.采用SDS-PAGE和Westernblot检测证明了antiEGFR/MEL的有效表达.共聚焦显微镜和流式细胞术实验结果表明,antiEGFR/MEL可与Hep-2肿瘤细胞有效结合,而几乎不与EGFR阴性的Jurkat细胞结合.噻唑蓝(MTT)检测结果说明,antiEGFR/MEL可有效抑制人喉癌细胞Hep-2的增殖.以上结果表明,antiEGFR/MEL能够有效靶向EGFR阳性肿瘤细胞,并有效抑制肿瘤细胞增殖,有望应用于EGFR靶向肿瘤治疗.
- 孙丽丽王浩然徐一鸣费丹付婷婷管国芳
- 关键词：喉癌表皮生长因子受体单链抗体蜂毒肽原核表达
- 禽流感病毒H_7亚型血凝素单克隆抗体的制备
- 本实验用核酸疫苗免疫BALB/C小鼠。取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经三次克隆和间接ELISA筛选,获得ⅠA3、ⅠB3、ⅠC4和ⅠF7四株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过间接ELISA测定,单抗效...
- 王凯金宁一鲁会军韩松徐一鸣胡仲明
- 关键词：禽流感核酸疫苗单克隆抗体
- 新城疫病毒NP、P、L辅助质粒构建及鉴定
- 研究背景:新城疫是可以感染许多禽类的高接触性疫病,目前,该病被OIE列为必须通报的动物疫病,被我国列为一类动物疫病,曾经对我国养禽业造成巨大的经济损失.因为新城疫病毒作为疫苗载体时具有接种途径简单、高滴度、低成本的优势,...
- 陈兴阎富龙徐一鸣赵权肖朋朋郭海宁靖杰辛舒鲁会军金宁一
- 关键词：NDV
- 禽流感疫苗的研究进展
- 来禽流感的在全球范围内流行,不但带来了巨大的经济损失并开始威胁人类的健康。由于其重要的经济和公共卫生学意义,使得禽流感的防控显得突出重要.疫苗的使用是控制禽流感流行的主要手段。目前实际应用中以禽流感全毒灭活苗为主,但由于...
- 南文龙金宁一鲁会军徐一鸣田明尧陈义锋赵翠青田宇飞
- 关键词：禽流感疫苗研制基因工程技术
- 流感病毒多亚型检测方法的研制和应用
- 徐一鸣
- 关键词：流感病毒血凝素基因RT-PCR
- 文献传递
- 禽流感病毒基质蛋白及核蛋白的酵母融合表达、初步纯化及检测
- 利用毕赤酵母表达系统进行了禽流感病毒基质蛋白及核蛋白在毕赤酵母中的融合表达研究。首先构建中间质粒pMD18-T-M-Np,并将M-Np融合基因插入酵母分泌型表达载体pPIC9K中,获得重组质粒pPIC9K-M-Np;再将...
- 徐一鸣金宁一
- 关键词：禽流感病毒基质蛋白核蛋白毕赤酵母
- 抗HIV-1重组导向毒素SL120在毕赤酵母中的表达及其活性检测被引量：2
- 2005年
- 以pPIC9K为载体,构建抗HIV 1gp12 0单链抗体scFv12 0与葡萄球菌肠毒素A(StaphylococcalenterotoxinA ,SEA)融合基因表达质粒,线性化、电转化法整合入巴斯德毕赤酵母菌,经表型鉴定、PCR分析和G4 18筛选得到Muts型多拷贝整合菌,甲醇诱导培养可分泌表达5 7kD的预期大小蛋白—重组导向毒素SL12 0 ,表达量达5 0 1mg L。通过单链抗体亲和力测定,表明蛋白SEA和scFv12 0的构象有微弱的相互影响,但此重组导向毒素仍可高效介导CTLs杀伤HIV 1靶细胞。
- 王宏金宁一尹革芬徐一鸣金洪涛张立树李子建
- 禽流感病毒H7亚型血凝素单克隆抗体的制备
- 本实验用核酸疫苗免疫BALB/C小鼠。取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经三次克隆和间接ELISA筛选,获得ⅠA3、ⅠB3、ⅠC4和ⅠF7四株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过间接ELISA测定,单抗效...
- 王凯金宁一鲁会军韩松徐一鸣胡仲明
- 关键词：禽流感核酸疫苗单克隆抗体
- 文献传递
