张伟
- 作品数：37 被引量：56H指数：5
- 供职机构：三峡大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学兵器科学与技术更多>>
- Bcl-2在阿司匹林诱导宫颈癌Hela细胞凋亡中的作用
- 目的:阿司匹林(acetysalicylicacid,ASA),又名乙酰水杨酸,是非甾体类抗炎药(NSAIDs)的代表药物,主要通过抑制环氧化酶(COXs)的活性进而降低前列腺素(PGs)的产生发挥作用。文献报道阿司匹林...
- 杨建林韩钰周永芹张伟
- 关键词：阿司匹林HELA细胞BCL-2凋亡机制
- 文献传递
- 重组人ERP57蛋白克隆和原核表达
- 2010年
- 目的:克隆人ERP57蛋白进行原核表达和纯化。方法:采用巢式RT-PCR从人非小细胞肺腺癌A549细胞总RNA中克隆人ERP57 cDNA,构建ERP57原核表达质粒(pET-28a/ERP57)并转化E.coli的BL21菌株。IPTG诱导蛋白表达,并在变性条件下经Ni-NTA树脂亲和层析纯化。分别用SDS-PAGE和Western blotting鉴定。结果:成功获得大小为1518bp的人ERP57基因片段,转化菌诱导性表达61kDa的人ERP57蛋白,该蛋白可经Ni-NTA树脂亲和层析高度纯化。结论:成功获得纯化的重组人ERP57蛋白,为后续ERP57蛋白功能研究奠定了基础。
- 杨建林韩钰王艳林张伟
- 关键词：基因克隆原核表达蛋白纯化
- 小鼠肝纤维化中内质网应激分子的表达与作用被引量：1
- 2015年
- [目的]利用高脂饲料和异种血清诱导建立肝纤维化模型,检测内质网应激分子在该纤维化模型中的作用及机制。[方法]收集各组小鼠血清进行ALT检测,对小鼠肝组织进行HE和Masson染色观察肝组织的结构变化以及胶原纤维状况,并分别用Western和RT-PCR检测组织内CRT、GRP78、TLR2等基因的表达。[结果]与正常对照组(48.8±6.1 U/L)相比高脂饲料饮食组(139.7±13.4 U/L)、腹腔注射异种血清组(72.8±7.2U/L)以及高脂饲料联合腹腔异种血清注射组(193.0±14.1 U/L)血清ALT显著升高(p<0.05);镜下也观察到肝细胞脂肪变性,大量的胶原纤维产生;肝组织内GRP78和TLR2基因mRNA水平、CRT蛋白水平均升高(p<0.05)。[结论]高脂饲料和异种血清诱导建立的肝纤维化模型显示内质网应激与肝纤维化的发生发展密切相关。
- 田慧群吴薇邹晓华王雅琴张伟任东明刘朝奇
- 关键词：肝纤维化高脂饲料猪血清CRTGRP78
- 四湖流域螺山排区农田涝灾风险指标体系构建与评估
- 涝灾是一直是困扰人类社会发展的自然灾害，因涝造成的作物减产已威胁到粮食安全。基于涝灾指标、涝灾风险等级、涝灾评价的机理问题一直是学者研究的重要课题之一，具有重要的理论意义和实际意义。本文在前人的研究基础上，针对涝灾形成机...
- 张伟
- 关键词：风险分析
- 文献传递
- 九阳股份股权激励实施效果研究
- 在现代企业制度不断发展过程中，企业所有权与经营权的分离已成为上市公司的显著特征，股东与管理层的矛盾也愈加显现。伴随着股权分置改革的完成和股权激励相关法律政策的完善，我国越来越多的企业意识到股权激励可以作为解决委托代理问题...
- 张伟
- 关键词：上市公司股权激励财务指标
- HIV-1 gp160多表位嵌合基因的构建及表达蛋白的免疫原性分析被引量：1
- 2008年
- HIV感染引起的AIDS已经成为严重影响人类健康和社会发展的全球性疾病。酶联免疫吸附试验和免疫印迹检验组合则被认为是HIV检测的"金标准"。构建了gp160的抗原多表位融合基因及在原核系统的高表达,为HIV抗体测定提供特异、价廉的抗原。选定HIV-1gp160基因中3个片段包含较多抗原表位的区域,设计带有酶切位点的引物,用PCR的方法从HIV-1HXB2全基因扩增编码这3个片段的基因序列,通过质粒提取、酶切、测序方法鉴定基因片段的正确性,SDS-PAGE和Western blot测定融合蛋白的抗原特异性。构建的HIV-1gp160多表位嵌合基因的原核表达质粒,酶切和测序结果表明基因序列正确,基因全长969bp。在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达的重组蛋白分子量为37kDa,以包涵体的形式存在。应用Western blot测定10例正常人和12例HIV/AIDS病人血浆显示HIV-1gp160多表位融合蛋白具有良好的抗原特异性。成功构建了高表达HIV-1gp160多表位蛋白的原核表达系统,纯化的融合蛋白有较强的抗原特异性。
- 杨凡刘朝奇柳发勇余枫华杨春秀韩莉任东明张伟杨祖伟
- 关键词：HIV-1蛋白表达免疫原性免疫印迹
- 多胺类似物双乙基去甲精胺联合阿司匹林高效杀伤宫颈癌Caski细胞的研究被引量：2
- 2013年
- 目的:研究多胺类似物双乙基去甲精胺(BENS)与阿司匹林联用对宫颈癌Caski细胞的生长影响以及可能的细胞学机制。方法:多胺类似物BENS联用阿司匹林孵育体外培养的人宫颈癌Caski细胞,采用四甲基偶氮唑蓝法测定细胞存活率,DNA Ladder以及流式细胞术观察各组细胞周期和凋亡率变化,Western blot检测Bcl-2、Bax和cyt-C凋亡相关基因的表达情况,化学发光法测定精胺氧化酶(SMO)活性。结果:BENS与阿司匹林联用能显著降低单用BENS的细胞存活率(P<0.05),同时低剂量阿司匹林就能显著增强BENS诱导细胞凋亡作用(P<0.01)。联合用药组与单独用药组相比较,细胞G0/G1期比例明显升高,S期和G2/M期比例下降;诱导细胞凋亡发生;胞浆中Bcl-2表达量减少,Bax表达增加,cyt-C由线粒体释放。且SMO活性无明显改变。结论:联用低剂量阿司匹林能有效增强BENS诱导人宫颈癌Caski细胞凋亡的作用,但与多胺代谢过程无关。
- 杨建林韩钰王艳林张伟
- 关键词：阿司匹林CASKI细胞
- 维生素C诱导人宫颈癌Caski细胞凋亡及其分子机制的研究被引量：4
- 2013年
- 为了研究维生素C对人宫颈癌Caski细胞体外抑制、诱导凋亡的作用及其分子机制,使用不同剂量维生素C处理人宫颈癌Caski细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测药物对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测Cas-ki细胞周期变化;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNA Ladder现象;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和E6的表达以及Caspase 3的激活;荧光染色观察细胞线粒体膜电位的改变.分析发现,维生素C可显著抑制人宫颈癌Caski细胞增殖,呈现明显的时间和剂量依赖性;将细胞阻滞于S期;诱导细胞凋亡,下调Bcl-2和E6、上调Bax蛋白表达,促进Caspase3活化,降低线粒体膜电位.表明维生素C在体外可有效抑制人宫颈癌Caski细胞增殖,诱导细胞凋亡.
- 杨建林韩钰周永芹张伟
- 关键词：维生素CCASKI细胞凋亡机制
- 蜂胶-银离子复合纳米乳剂杀菌机理的研究被引量：4
- 2008年
- 目的研究蜂胶-银离子复合纳米乳剂杀菌机理。方法采用悬液定量杀菌试验和透射电镜分析的方法进行了实验室观察。结果制成的复合纳米乳剂含蜂胶浓度为20g/L,总黄酮为5.61g/L,银离子浓度为50μg/L。含体积分数6.7%复合纳米乳剂溶液与大肠杆菌接触作用10min后,菌体产生融合,胞内容物开始溶解;作用15min时完全融合,胞内容物完全溶解;作用30min时融合菌体出现裂解。用上述浓度的复合纳米乳液与金黄色葡萄球菌接触作用10min后,菌体内含物产生溶解,核质破裂;作用15min时胞壁出现部分裂解;作用30min时胞内容物完全溶解,胞壁损坏。结论蜂胶-银离子复合纳米乳剂通过菌体融合的方式杀灭革兰阴性菌,而对革兰阳性菌则主要使其胞内容物溶解,裂解胞壁的方式致使细菌死亡。
- 王嘉军张伟王全立
- 关键词：蜂胶黄酮银离子纳米乳剂杀菌机理
- HIV-1 gp160多表位嵌合基因的构建及表达蛋白的免疫原性分析被引量：1
- 2008年
- 目的：HIV感染引起的AIDS已经成为严重影响人类健康和社会发展的全球性疾病。酶联免疫吸附试验和免疫印迹检验组合则被认为是HIV检测的“金标准”。因此本实验构建gp160的抗原多表位融合基因及在原核系统的高表达,为HIV抗体测定提供特异、价廉的抗原。方法：选定HIV-1 gp160基因中三个片段包含较多抗原表位的区域,设计带有酶切位点的引物,用PCR的方法从HIV-1HXB2全基因扩增编码这三个片段的基因序列,通过质粒提取、酶切、测序方法鉴定基因片段的正确性,SDS-PAGE和Western Blot测定融合蛋白的抗原特异性。结果：构建的HIV-1 gp160多表位嵌合基因的原核表达质粒,酶切和测序结果表明基因序列正确,基因全长969bp。在大肠杆菌BL21（DE3）中高效表达的重组蛋白分子量为37kDa,以包涵体的形式存在。结论：应用western blot测定10例正常人和12例HIV/AIDS病人血浆显示HIV-1 gp160多表位融合蛋白具有良好的抗原特异性。成功构建了高表达HIV-1 gp160多表位蛋白的原核表达系统,纯化的融合蛋白有较强的抗原特异性。
- 杨凡刘朝奇柳发勇余枫华杨春秀韩莉任东明张伟杨祖伟
- 关键词：HIV-1蛋白表达免疫原性免疫印迹
