崔仑标 作品数:8 被引量:14 H指数:3 供职机构: 南京医科大学 更多>> 发文基金: 江苏省社会发展科技计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 环境科学与工程 理学 更多>>
重组酶介导的等温扩增技术结合CRISPR-Cas13a蛋白检测8种境外输入性病毒 被引量:1 2022年 目的基于重组酶介导的扩增技术(recombinase aided amplification,RAA)和CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)-Cas13a(CRISPR-associated protein 13a)检测,建立一种快速、灵敏且特异的重要境外输入性病毒检测方法。方法以流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)、黄热病毒(Yellow fever virus,YEV)、西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)、中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)、埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)、登革病毒(Dengue virus,DENV)、裂谷热病毒(Rift Valley fever virus,RVFV)、寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)为检测对象,设计特异性RAA扩增引物和CRISPR RNA(crRNA),建立RAA扩增结合CRISPR-Cas13a蛋白检测反应,评价方法的灵敏度和特异性,使用登革热疑似临床样本进行检测,并与荧光RT-PCR技术进行比较,同时检测其余7种病毒临床模拟样本。结果RAA扩增结合CRISPR-Cas13a蛋白检测方法能在39℃条件下,40~52 min内检测出8种输入性传染病病原体,灵敏度达到1~10拷贝/μl,并且这8种病原体之间无交叉反应,临床样本均可100%检测出。结论建立的RAA扩增结合CRISPR-Cas13a蛋白检测方法能够灵敏、特异且快速地检测出8种境外输入性传染病病原体。 郭悦 安柏霖 刘丹丹 罗君红 赵康辰 朱小娟 葛以跃 吴宏斌 崔仑标关键词:输入性传染病 病毒 细胞周期素与膀胱癌关系的研究进展 被引量:4 2005年 细胞周期素是细胞周期调节的重要因子,和膀胱肿瘤的发生发展密切相关。细胞周期素的表达对判断肿瘤的生物学特征、预后有重要的意义,针对细胞周期素的特异抑制剂有望为膀胱癌的防治提供新的策略。 崔仑标 戴贵东 王心如关键词:细胞周期 细胞周期素 膀胱肿瘤 逆转录重组酶介导的等温扩增技术快速检测甲型H1N1流感病毒 被引量:4 2023年 利用逆转录重组酶介导的等温扩增技术(Reverse transcription-recombinase aided amplification, RT-RAA)与RT-RAA单链荧光探针结合,建立甲型H1N1流感病毒(Influenza A virus H1N1, FLU A H1N1)的快速分子检测方法。设计RT-RAA引物和荧光探针,用于FLU A H1N1模板核酸的等温扩增和荧光检测,以评价优化方法的灵敏度与特异性;将实时荧光定量PCR(real-time PCR)作为对照方法,测试RT-RAA荧光方法对临床样本的检测效果。FLU A H1N1的RT-RAA荧光检测方法能在30 min内完成检测,灵敏度达到10^(1)拷贝/μL;特异性试验表明,其与十六种常见呼吸道传染性病毒均无交叉反应。49份临床样本检测结果和real-time PCR检测结果一致性高(Kappa=0.958),临床灵敏度为100%,临床特异性为95.2%。建立的RT-RAA荧光检测方法检测时间短,灵敏度高,特异性强,适用于FLU A H1N1的快速检测。 安柏霖 郭悦 刘丹丹 罗君红 葛以跃 朱凤才 崔仑标 崔仑标关键词:甲型流感病毒 H1N1 SOS/Umu试验及其应用 被引量:5 2003年 SOS Umu试验 (又称umu试验 )是 80年代中期发展起来的检测环境诱变物的短期筛选试验 ,它是基于DNA损伤物诱导SOS反应而表达umuC基因的基础上建立起来的。该方法具有快速、敏感、廉价等优点 ,因而被广泛应用于遗传毒理学研究、酶代动力学分析、环境监测与质量评估以及药效学评价和新药筛选等方面。本文对其实验原理。 崔仑标 戴贵东 王心如关键词:DNA损伤 遗传毒理学 环境监测 SARS-CoV-2棘突蛋白H146Y突变的逆转录重组酶介导的等温扩增方法建立 2022年 目的基于逆转录重组酶介导的恒温扩增(reverse transcriptional recombinase aided amplification,RT-RAA)技术,建立一种快速,灵敏,简便的SARS-CoV-2棘突蛋白(S)H146Y突变检测方法。方法针对SARS-CoV-2棘突蛋白H146Y突变区域设计RT-RAA特异性引物和荧光探针,使用优化的RT-RAA方法进行恒温扩增检测,评价方法的灵敏度和特异性,并与二代测序技术进行比较。结果基于荧光信号的RT-RAA方法能在39℃,30 min完成检测,SARS-CoV-2 S蛋白H146(S-H146)野生株和Y146(S-Y146)突变株检测限均为10 copies/μL,能够依据荧光值明显区分S-H146毒株与S-Y146毒株的重组质粒或临床样本,且和五种常见呼吸道感染病毒无交叉反应,与二代测序技术方法一致性高。结论建立的RT-RAA荧光检测方法具有灵敏度高,特异性强,适用于SARS-CoV-2 S蛋白H146Y突变株的快速检测,为基层医疗机构提供了新的鉴定方法。 郭悦 安柏霖 刘丹丹 罗君红 赵康辰 朱小娟 葛以跃 吴宏斌 崔仑标关键词:突变 分子检测 对苯二甲酸的毒理学、职业危害与卫生标准研究 王心如 王守林 夏彦恺 崔仑标 王顶贤 王豫安 陈俊 姚宏伟 李俊杰 施爱民 石远 张恒东 刘美霞 该项目属于预防医学与卫生学领域劳动卫生学和毒理学的应用研究。采用职业流行病学、现代毒理学、生物化学与分子生物学等方法与技术,对中国生产和使用面广量大的化纤产品对苯二甲酸(TPA)的毒性与机制、作业环境的暴露水平、职业人群...关键词:关键词:膀胱癌 对苯二甲酸 卫生标准 毒理学 对苯二甲酸致雄性大鼠膀胱癌前病变分子机制的探讨 [目的]探讨对苯二甲酸(terephthalic acid,TPA)诱导雄性大鼠膀胱癌前病变可能的分子机制。[方法]大鼠随机分为4组,分别饲喂0%,0.2%,1%和5%TPA,饲养90天后宰杀,收集膀胱标本进行组织病理分... 石远 崔仑标 戴贵东 宋玲 王心如关键词:对苯二甲酸 细胞周期蛋白 P16 文献传递 对苯二甲酸诱发大鼠膀胱癌机制的探讨 对苯二甲酸(TPA)是目前世界上生产和使用最为广泛的化学物质之一,主要用于合成树脂、薄膜、聚酯纤维等。一般认为TPA毒性低,属于非遗传毒性化学物。然而,人们对TPA诱发的膀胱癌及其作用机制还存在争议。为此,本研究通过大鼠... 崔仑标关键词:对苯二甲酸 膀胱结石 癌症发生 蛋白组学 膀胱癌