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屠煦童: 作品数：13 被引量：25H指数：4; 供职机构：南京农业大学更多>>; 发文基金：公益性行业(农业)科研专项江苏省科技支撑计划项目更多>>; 相关领域：农业科学更多>>

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‘南通小方柿’DkGA2ox1 基因及其表达载体和应用: 本发明属于基因工程领域，涉及‘南通小方柿’DkGA2ox1基因及其表达载体和应用。本发明首次从‘南通小方柿’克隆得到了一个新的DkGA2ox1基因，将其导入烟草，DkGA2ox1在烟草中过量表达；DkGA2ox1转基因烟...; 渠慎春屠煦童蒋振莹蔡斌华张仕杰陈小云李宁宁章镇; 文献传递

MhRAR1和MhSGT1基因转化苹果提高轮纹病菌诱导的抗氧化酶活性被引量：4: 2013年; RAR1和SGT1是植物R基因(抗病基因,resistance genes)介导的抗病防卫途径中的两个重要信号元件,在R蛋白下游和活性氧产生之间发挥作用。为了研究湖北海棠MhRAR1和MhSGT1基因在感病苹果品种植株内的表达特性及其抗病功能,利用农杆菌介导法将两种基因分别转入富士苹果。对Hyg阳性植株进行PCR和RT-PCR检测,6个转MhRAR1株系和3个转MhSGT1株系呈阳性;两种转基因苹果株系被苹果轮纹病病原菌侵染后,与对照相比都表现出抗氧化酶(SOD/POD/CAT)活性迅速升高、MDA含量变化较平缓的趋势,进一步说明RAR1和SGT1基因能够作用于苹果体内的活性氧反应和细胞膜活动进程,对植株受到外部侵害后的抗性反应有促进作用。; 屠煦童张仕杰吕东陈小云章镇渠慎春; 关键词：苹果湖北海棠轮纹病抗氧化酶活性

江苏丰县苹果产业现状及发展对策被引量：4: 2012年; 为全面了解丰县苹果生产现状,推动苹果产业快速发展,2009—2011年对丰县果树生产情况进行了调研。调查发现:农户整体文化水平偏低,缺乏年轻人力;普遍年收入不足30000元;总投入每年递增,但投入产出比却持续降低;晚熟品种所占比例过大;对新技术的采纳较为保守;多采用传统销售模式,并期盼新型销售渠道的建立等。针对丰县苹果产业化生产中存在的以上问题,通过对国内外农业产业化发展和国内苹果生产发展现状进行分析,结合丰县苹果产业化发展的现状和趋势,提出丰县苹果产业化发展的思路和对策:(1)加强果品基地建设,严格安全卫生标准;(2)积极引导,壮大龙头企业,提升产业化水平;(3)解决生产布局和机构不合理的问题;(4)积极开拓国内外市场,完善市场服务功能;(5)建立营销市场的网络体系;(6)整合资源,发展观光果业,打造果业发展新亮点。; 屠煦童黄善峤戴强师忠轩渠慎春; 关键词：苹果

一种南通小方柿组培快繁方法: 本发明涉及一种南通小方柿组培快繁方法，属于农作物快繁技术领域。研究了休眠芽消毒方法，确定了适于小方柿早期和中期继代增殖的培养基成分，分析了不同细胞分裂素、生长素对组培苗生长的影响。将取自南通小方柿一年生枝条上的休眠芽剥掉...; 渠慎春李宁宁屠煦童蒋振莹章镇; 文献传递

一种南通小方柿组培快繁方法: 本发明涉及一种南通小方柿组培快繁方法，属于农作物快繁技术领域。研究了休眠芽消毒方法，确定了适于小方柿早期和中期继代增殖的培养基成分，分析了不同细胞分裂素、生长素对组培苗生长的影响。将取自南通小方柿一年生枝条上的休眠芽剥掉...; 渠慎春李宁宁屠煦童蒋振莹章镇; 文献传递

‘南通小方柿’DkGA2ox2 基因及其表达载体和应用: 本发明属于基因工程领域，涉及‘南通小方柿’DkGA2ox2基因及其表达载体和应用。本发明首次从‘南通小方柿’克隆得到了一个新的DkGA2ox2基因，将其导入烟草，DkGA2ox2在烟草中过量表达；DkGA2ox2转基因烟...; 渠慎春屠煦童辛璐宋少华蔡斌华余心怡候应军章镇; 文献传递

‘南通小方柿’DkGA2ox1基因及其表达载体和应用: 本发明属于基因工程领域，涉及‘南通小方柿’DkGA2ox1基因及其表达载体和应用。本发明首次从‘南通小方柿’克隆得到了一个新的DkGA2ox1基因，将其导入烟草，DkGA2ox1在烟草中过量表达；DkGA2ox1转基因烟...; 渠慎春屠煦童蒋振莹蔡斌华张仕杰陈小云李宁宁章镇; 文献传递

‘南通小方柿’DkADH1基因遗传转化及功能分析被引量：1: 2015年; [目的]研究‘南通小方柿’(Diospyros kaki Linn.‘Nantongxiaofangshi’)乙醇脱氢酶基因DkADH1的功能,阐明其在柿果脱涩过程中的作用。[方法]构建了DkADH1基因植物双元表达载体,通过农杆菌介导法将该基因转入番茄中。以转基因和非转基因番茄株系的不同组织为材料,钨酸钠-钼酸钠比色法测定可溶性单宁含量,并用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测原花青素(PA)合成途径相关基因的表达情况。[结果]经PCR和RT-PCR检测,获得了3个转DkADH1基因番茄株系。过量表达DkADH1基因的转基因番茄植株的叶片、花、果实中可溶性单宁含量均显著低于非转基因番茄植株。qRTPCR显示:转基因植株不同组织中PA合成途径相关基因F3'5'H、LAR、MYB4和PAL的表达量与非转基因植株相比均显著下调。[结论]DkADH1能降低植物可溶性单宁的含量并抑制其生物合成途径相关基因的表达,与柿果脱涩密切相关。; 陈小云余心怡张仕杰屠煦童章镇渠慎春; 关键词：功能分析

‘南通小方柿’GA2ox基因的克隆与功能分析: ‘南通小方柿’（Diospyros kaki Linn.cv.Nantongxiaofangshi）是1982年在江苏省进行果树资源普查时于南通市发现的珍稀矮生型柿树品种。该品种干性弱，无明显中心干，树姿开张，表现出明显...; 屠煦童; 关键词：柿子基因克隆生物信息学

‘南通小方柿’GA2ox基因的克隆、亚细胞定位及表达分析被引量：6: 2015年; 【目的】从地方矮化品种‘南通小方柿’(Diospyros kaki Linn.cv.Nantongxiaofangshi)中分离赤霉素合成关键酶基因GA2ox,并进行亚细胞定位及表达分析,为进一步探索其矮生性状形成机理及选育新型矮生品种奠定基础。【方法】以‘南通小方柿’幼嫩叶片为材料,通过改良的CTAB法提取总RNA,利用简并引物克隆GA2ox家族中2个基因的片段,采用3′和5′RACE方法得到基因的全长c DNA序列,分别命名为Dk GA2ox1和Dk GA2ox2。通过生物信息学方法分析结构特征,利用GFP进行亚细胞定位,实时荧光定量RT-PCR技术研究其在发芽期、展叶期、枯顶期、开花期、生理落果期、果实着色期、果实成熟期中的表达特性。【结果】生物信息学分析Dk GA2ox1和Dk GA2ox2全长c DNA序列分别为1 318 bp和1 267 bp,分别含有198 bp和61 bp的5′非翻译区及97 bp和172 bp的3′非翻译区。编码332个和334个氨基酸,与毛白杨(JX102472.1)、夹竹桃(AY594292.1)、烟草(AB125232.1)、矮牵牛(GU059939.1)、苹果(FJ571521.1)、梨(JF441168.1)、葡萄(JQ608472.1)的相似度达73%—77%。含有保守20G-Fe(Ⅱ)-Oxy蛋白结构域,高度保守的2-酮戊二酸结合位点(Dk GA2ox1:Arg-272、Ser-274;Dk GA2ox2:Arg-271、Ser-273)和Fe2+结合位点(Dk GA2ox1:His-205、Asp-207、His-262;Dk GA2ox2:His-204、Asp-206、His-261),有赤霉素2-氧化酶蛋白家族共同的结构特点。Dk GA2ox1和Dk GA2ox2编码蛋白分子量分别为36 596.1 Da和37 544.2 Da,均为稳定蛋白,无信号肽,无跨膜结构域,无明显疏水区,属于C19-GAoxs。瞬时表达载体的构建及洋葱表皮细胞转化后,洋葱表皮细胞的瞬时表达结果显示,Dk GA2ox1编码蛋白定位于细胞核和细胞质中。Dk GA2ox1和Dk GA2ox2在开花期表达最丰富,并在7个典型物候期中均高于乔化品种‘大方柿’。【结论】南通小方柿中赤霉素2-氧化酶基因的表达与其矮生性状有关。; 屠煦童张仕杰陈小云李宁宁辛璐薛晓晖章镇渠慎春; 关键词：基因克隆亚细胞定位

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