孙学强 作品数:26 被引量:79 H指数:5 供职机构: 中国动物卫生与流行病学中心 更多>> 发文基金: 国家科技基础性工作专项 江苏省应用基础研究计划 公益性行业(农业)科研专项 更多>> 相关领域: 农业科学 交通运输工程 自动化与计算机技术 化学工程 更多>>
信号肽对溶血素在大肠杆菌中跨膜转运的影响 被引量:1 2018年 信号肽在引导外源蛋白的跨膜转运过程中具有重要作用。本试验通过PCR方法获得带有信号肽序列和不带有信号肽序列的溶血素基因,构建表达载体在大肠杆菌中进行诱导表达。经过溶血试验和免疫印迹试验证明缺失了信号肽的重组溶血素不能被跨膜转运至细胞外;带有信号肽的重组溶血素能够跨膜转运大肠杆菌细胞外。本试验为猪链球菌2型基因缺失弱毒疫苗的研究、细菌信号肽以及基因工程重组蛋白的可溶性表达进行了有益探索。 齐安生 张秀娟 宫枫举 张兴进 马喆 潘子豪 孙学强关键词:溶血素 信号肽 大肠杆菌 跨膜转运 三种感染动物阳性血清与口蹄疫病毒重组非结构蛋白的反应原性 被引量:2 2017年 本试验通过生物信息学技术比对分析GenBank中口蹄疫病毒(A型、O型和亚洲1型)非结构蛋白的保守序列,根据大肠杆菌密码子偏好性,优化合成了非结构蛋白基因,经过测序和转化,筛选到能够表达重组非结构蛋白的阳性重组菌株。经过Western-blot试验,证明表达的重组非结构蛋白能分别与口蹄疫病毒感染的牛、羊和猪阳性血清发生特异性反应。该重组蛋白待进一步验证后,可用于口蹄疫病毒感染动物的鉴别检测试剂盒研究。 孙学强 邵卫星 张如民 南文龙 张兴进 宫枫举 张秀娟 刘爽关键词:感染血清 反应原性 浅谈兽用生物制品生产过程中质量管理 被引量:2 2007年 在日趋激烈兽用疫苗市场.国内兽用生物制品企业如何分得一羹.逐步树立自己的品牌。加大力度进行兽用新生物制品研发、提高产品质量的稳定性能.仍然是摆在我们目前的重要问题。就兽用生物制品生产过程中质量控制.谈谈我在生产过程中质量管理的体会. 肖长赏 王宝华 闫培安 陆贾贤 孙学强关键词:兽用生物制品 生产过程 质量管理 兽用疫苗 稳定性能 产品质量 对上海市区县兽医实验室设置问题的思考 被引量:3 2013年 阐述了目前上海市区(县)兽医系统实验室设置情况比较混乱,部分区兽医系统实验室已转/并至农产品检测中心,名称五花八门,由此出现的问题也层出不断的情况。根据《动物防疫法》《应急条例》等法律法规,对动物疫病预防控制机构及兽医系统实验室承担的职责进行梳理,汇总和分析后,得出结论:区(县)兽医系统实验室应依法设置于动物疫病预防控制机构,疫病监测与诊断是兽医系统实验室法律所赋予的主要职能,与以检测为主的农产品安全检测中心有着本质的区别,剥离了兽医实验室的区(县)动物疫病预防控制机构,无法真正履行好其法定职责。并提出了相应的解决方案与建议。 王建 孙学强 刘佩红关键词:兽医实验室 中华绒螯蟹'颤抖病'病原的鉴定及免疫学检测方法的建立 该研究从江苏省宝应市采集的患'颤抖病'濒死的河蟹,用健康的中华绒螯蟹进行人工复制试验,经过连传两代的人工复制试验并结合电镜观察,确定其病原为一种55~65nm的有囊膜的病毒.采用Sepharose4B柱层析方法人工人复制... 孙学强关键词:免疫学方法 颤抖病 中华绒螯蟹 文献传递 猪伪狂犬病毒浙江株感染性细菌人工染色体克隆的构建 被引量:10 2010年 通过同源重组将携带细菌人工染色体(Bacterial Artificial Chromosome,BAC)载体和GFP表达框的pHA2质粒序列插入到PRV病毒的UL23(TK)基因内,获得了重组病毒rPRV-HA2;将该重组病毒的环状基因组电转化到感受态细胞EscherichiacoliDH10B,筛选到病毒的感染性克隆PRV BAC(pPRV)。pPRV转染VeroE6细胞可以重新启动病毒的生产性感染,该拯救病毒的细胞病变和体外增殖特性与rPRV-HA2一致。病毒生长曲线表明TK基因的部分删除和BAC载体的插入不会影响病毒在体外的复制。PRV感染性BAC克隆的成功构建,将方便在大肠杆菌内对病毒基因组进行快速、准确的操作,为进一步开展PRV基因功能和病毒载体研究奠定基础。 尹文玲 尹龙勃 叶伟成 孙学强 姚火春 张淼涛 王一成 张存关键词:伪狂犬病毒 细菌人工染色体 感染性克隆 重组病毒 非洲猪瘟病毒结构蛋白p54的原核表达与反应原性鉴定 被引量:6 2019年 p54蛋白为非洲猪瘟病毒(ASFV)的主要结构蛋白之一,参与病毒对靶细胞的吸附与进入。为深入研究p54结构蛋白的抗原性,根据GenBank序列号(MK128995)对应的E183L基因序列,设计1对特异性引物扩增其整个CDS区,并克隆至pET-30a(+)载体,构建了表达p54蛋白的重组质粒pET-30a(+)-p54。用BL21(DE3)转化该质粒,经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE电泳,可见重组质粒表达出1条分子量约为20 kDa的特异性条带,且重组表达蛋白以融合表达蛋白形式存在于上清。进一步通过His亲和层析法纯化目的蛋白,用ASFV阳性血清进行蛋白质免疫印迹反应,发现表达的重组p54蛋白能与ASFV阳性血清产生特异性反应,表明p54蛋白表达成功。本研究为ASFV抗体ELISA检测方法的建立奠定了基础。 官丽娟 邵钰 任伟杰 宫枫举 韩同福 邹艳丽 孙学强 孙学强 吴晓东 黄保续关键词:非洲猪瘟病毒 结构蛋白 ELISA双抗体夹心法检测河蟹“颤抖病”病毒 被引量:4 2001年 用纯化的河蟹“颤抖病” (暂定名 )病毒分别免疫家兔和山羊 ,制备高效价的抗血清。羊抗血清经硫酸铵盐析纯化。经方阵滴定 ,选择P/N =2 95时作 1∶10 0稀释的抗血清为工作浓度 ,建立ELISA双抗体夹心法检测样本 14 4份 ,包括来自长江水域的野生河蟹、人工感染发病的河蟹、 1999年和 2 0 0 0年从江苏采集的自然发病的病蟹及市场购买河蟹。结果显示 ,病蟹和市场购买河蟹的阳性率为 6 6 7%~ 10 0 % ,人工感染的病蟹和人工感染石蟹致病组阳性率均为 10 0 % ,来自长江水域的健康河蟹及未接种病毒的对照石蟹阳性率均为 0 ,表明建立的方法可以用于检测河蟹“颤抖病” 孙学强 金业 陆承平关键词:河蟹 ELISA双抗体夹心法 猪链球菌2型诊断与防制措施 2010年 猪链球菌(Streptococcus suis type 2,SS2)已经成为危害养猪生产及人类健康的重要人畜共患病。可引起猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎及猝死等;致人败血症、心内膜炎、脑膜炎,严重的致人链球菌毒素休克综合征而死亡。1998年7月江苏南通某地猪群暴发猪链球菌2型,同时导致21人感染发病和14人死亡。 刘爽 赵丽丽 孙学强 姚火春关键词:猪链球菌2型 防制措施 心内膜炎 人畜共患病 养猪生产 脑膜炎 河蟹颤抖病病毒的分离纯化及其动物致病性试验 被引量:12 2002年 将人工复制发病的河蟹 (中华绒螯蟹 )组织匀浆 ,离心上清经聚乙二醇 (PEG 6 0 0 0 )沉淀 ,再经分子筛层析 ,分部收集分别测定 2 5 6~ 30 0nm的吸光值。各收集峰用PEG2 0 0 0 0 ,于 4℃浓缩 ,制作负染标本经透射电镜观察 ,发现在第一峰浓缩液中存在大量球状病毒颗粒 ,大小 5 0~ 10 0nm。用纯化的病毒进行动物致病性试验 ,接种石蟹 (锯齿华溪蟹 )发生“颤抖病” ,并用ELISA双抗体夹心法进行检测 。 孙学强 陆承平关键词:河蟹颤抖病 病毒 分离纯化