您的位置: 专家智库 > >

姚芳玲

作品数:3 被引量:1H指数:1
供职机构:中南大学湘雅医学院基础医学院更多>>
发文基金:湖南省自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生

主题

  • 2篇基因
  • 2篇核表达
  • 2篇STAT4
  • 1篇单核
  • 1篇单核苷酸
  • 1篇单核苷酸多态
  • 1篇单核苷酸多态...
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白表达
  • 1篇多聚
  • 1篇多聚酶
  • 1篇多聚酶链式反...
  • 1篇多态
  • 1篇多态性
  • 1篇引物介导
  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇原核表达及纯...
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达

机构

  • 3篇中南大学
  • 1篇长沙血液中心
  • 1篇湖南航天医院

作者

  • 3篇姚芳玲
  • 3篇黎明
  • 2篇黄玉梅
  • 1篇范洁琳
  • 1篇雷光华
  • 1篇钟待鸣
  • 1篇李轩岸
  • 1篇袁媛
  • 1篇朱敏

传媒

  • 1篇中国现代医学...
  • 1篇中国免疫学杂...
  • 1篇现代生物医学...

年份

  • 1篇2018
  • 2篇2013
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
His标记STAT4(565-748氨基酸)肽段融合蛋白原核表达及纯化被引量:1
2018年
目的:构建His标记的人STAT4 C-端565-748氨基酸肽段原核表达载体,埃希氏菌中诱导表达,并纯化蛋白。方法:PCR扩增编码STAT4 C-端565-748氨基酸肽段的基因片段,克隆到pET-28a原核表达载体,转化感受态细菌BL21,IPTG诱导蛋白表达,经包涵体变性、复性、树脂纯化、透析。免疫印迹鉴定纯化的融合蛋白。结果:PCR扩增获得目的片段,克隆到pET-28a,转化感受态细胞,IPTG诱导发现融合蛋白存在于包涵体。经变性、复性、树脂纯化和透析,免疫印迹实验发现融合蛋白表达、被纯化。结论:成功构建人STAT4(565-748aa)肽段原核表达质粒并获纯化融合蛋白。
贺美徐艳姚芳玲邹纯于颍黎明
关键词:STAT4蛋白表达
检测STAT2基因多态性的PCR-PIRA方法的建立
2013年
目的:为了检测信号转导和转录活化蛋白2(signal transducer and activator of transcription factor 2,STAT2)基因的rs12422499和rs2066807两个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP),建立一种简单、可靠的多聚酶链式反应-引物介导的限制性分析法(polymerase chain reaction-primer introduced restriction analysis,PCR-PIRA)。方法:微量盐析法提取外周静脉全血DNA,设计引物扩增STAT2基因的rs2066807及rs12422499位点所在的基因片段,采用限制性内切酶PsyI及BseDI分别酶切相应PCR产物,凝胶电泳方法观察酶切结果。同时将PCR产物进行DNA测序。结果:PCR扩增rs2066807基因片段,长度为469bp,经PsyI酶切后电泳,根据酶切产物片段大小判断rs2066807的C/C(469 bp)、G/G(262 bp、207 bp)、C/G(469 bp、262 bp及207bp)三种基因型;PCR扩增rs12422499基因片段,长度为189 bp,经BseDI酶切后电泳,根据酶切产物片段大小判断rs12422499的C/C(189 bp)、G/G(134 bp、55 bp)、C/G(189 bp、134 bp及55 bp)三种基因型。将PCR产物直接进行DNA测序,SNP测序结果与PCR-PIRA方法获得的结果一致。结论:成功建立了一种检测STAT2基因SNPs的PCR-PIRA法,该方法只需简单的PCR扩增和酶切消化,因此操作简单、方便;通过与直接测序结果比较,显示该方法可信。PCR-RIPA方法不仅为检测STAT2基因多态性提供了实验手段,也为检测其他基因点突变提供了实验方法。
袁媛黄玉梅钟待鸣朱敏姚芳玲黎明
关键词:单核苷酸多态性
人STAT4基因真核表达载体构建和在HEK293细胞中表达
2013年
目的构建STAT4基因的真核表达载体,在人胚肾细胞系HEK293中表达。方法设计引物、采用RT-PCR方法从人外周血单个核细胞中获得STAT4的cDNA全长序列,在PCR产物两端加上SalI和BamHI限制性内切酶识别序列,将pEGFP-C1载体和PCR产物用SalI和BamHI进行双酶切,将STAT4 cD-NA定向克隆到pEGFP-C1中,从而构建了重组质粒pEGFP-STAT4;经酶切和测序鉴定正确后,将pEGFP-STAT4体外转染HEK293细胞,瞬时表达带有GFP标签的STAT4融合蛋白;采用荧光显微镜技术和免疫印迹技术检测融合蛋白的表达。结果 RT-PCR扩增了2 247 bp的STAT4 cDNA全长,经测序分析与GenBank中已知序列一致;重组质粒pEGFP-STAT4转染HEK293细胞中,可检测到瞬时表达的GFP-STAT4融合蛋白。结论成功构建重组质粒pEGFP-STAT4,在真核细胞HEK293中能被表达。
李轩岸黄玉梅姚芳玲范洁琳雷光华黎明
关键词:STAT4基因克隆真核表达
共1页<1>
聚类工具0