区裕升
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：广东药学院生命科学与生物制药学院更多>>
- 发文基金：“重大新药创制”科技重大专项国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 核转染技术转染人外周血淋巴细胞效率的初步研究被引量：1
- 2012年
- 目的探索核转染技术转染人外周血淋巴细胞的转染效率。方法利用核转染方法将携带增强型绿色荧光蛋白基因的质粒转染人外周血淋巴细胞,24小时后经流式细胞仪检测绿色荧光蛋白EGFP表达水平,确定转染效率。结果未经任何刺激的外周血淋巴细胞转染效率为8.7%,经抗CD3抗体OKT3和抗CD28抗体共同刺激后的外周血淋巴细胞转染效率为10.5%,经抗CD3抗体OKT3和IL-2共同刺激后的外周血淋巴细胞转染效率为9.9%。结论核转染方法是一种转染人外周血淋巴细胞的有效方法,转染前细胞是否受到刺激激活,对转染的效率影响不大。
- 张文峰邵红伟区裕升黄树林
- 关键词：外周血淋巴细胞转染效率
- TCR BV12-3重组载体构建及其抗肿瘤作用的初步研究
- 2014年
- 目的:构建pEGFP-C3-TCR BV12-3表达载体并初步研究其抗肿瘤作用。方法:TCR BV12-3基因片段从pGEM-T-TCR BV12-3载体上酶切并克隆至pEGFP-C3载体中,通过脂质体将pEGFP-C3-TCR BV12-3表达载体转染外周血单个核细胞(PBMCs),48小时后荧光显微镜观察转染效率。PBMCs细胞、pEGFP-C3载体转染的PBMCs细胞、pEGFP-C3-TCR BV12-3表达载体转染的PBMCs细胞分别与肝癌细胞BEL-7402和宫颈癌细胞HeLa共培养24 h,显微镜观察肿瘤细胞的生长情况。结果:测序证实TCR BV12-3基因片段成功亚克隆至pEGFP-C3载体中,荧光显微镜证实重组体转染PBMCs细胞48 h后可有效表达绿色荧光。显微镜观察发现pEGFP-C3-TCR BV12-3载体转染的PBMCs对肝癌细胞有杀伤作用,但对宫颈癌杀伤作用不明显。结论:成功构建pEGFP-C3-TCR BV12-3表达载体,初步证实TCRBV12-3对肝癌细胞有杀伤作用。
- 王辉区裕升沈晗黄树林
- 关键词：T细胞受体克隆肿瘤
- PBMC对B7-2基因修饰的肝癌细胞Bel-7402体外杀伤作用的研究
- 2010年
- 目的研究B7-2基因修饰肿瘤后对T细胞活化的影响,探索B7-2在肿瘤免疫治疗中的作用。方法构建B7-2基因的表达载体,转染Bel-7402细胞,与外周血单核细胞(PBMC)共孵育,利用流式细胞术(FCM)检测Bel-7402细胞的凋亡。结果 B7-2基因修饰的Bel-7402细胞和PBMC细胞共培养4 h后,凋亡率为12.7%,与对照组(7.5%)比较,细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。结论 B7-2基因修饰能够增强肿瘤细胞对淋巴细胞的活化作用,为基于B7-2的抗肿瘤治疗奠定了基础。
- 刘洪洲区裕升冯成千郭亨鹏胡伟锋邵红伟黄树林
- 关键词：BEL-7402细胞PBMC流式细胞术脂质体
- 肿瘤患者胸/腹水和外周血中TCR Vβ亚家族表达及调节性T细胞亚群的研究被引量：4
- 2012年
- 目的:探讨肿瘤患者胸/腹水中肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)和外周血T细胞中T细胞受体(TCR)Vβ亚家族的表达变化情况、CD4/CD8细胞比例变化和Treg细胞的分布情况,分析肿瘤患者的免疫状态。方法:分离11例肿瘤患者胸/腹水和外周血以及4例健康人外周血的T细胞,采用流式方法检测Vβ24个亚家族及CD3、CD4、CD8、CD25、CD127的表达情况,统计分析T细胞中Vβ24个亚家族、Treg细胞的特点。结果:TCR Vβ亚家族的表达在肿瘤患者胸/腹水TIL中与血液淋巴细胞中存在着显著差异,其中肺癌患者(4/5)TIL中TCR Vβ8,结肠癌患者(3/4)TIL中TCR Vβ2等亚家族显著高表达;11例肿瘤患者胸/腹水样本中Treg的比例均比外周血高(P<0.05),其中5例肺癌患者胸腹水中CD8+T细胞比例降低。结论:肿瘤患者胸/腹水中的淋巴细胞TCR Vβ亚家族表达与外周血存在差异,表明肿瘤患者体内淋巴细胞发生了明显的优势取用和定向趋化。此外肿瘤微环境可能影响了TIL中CD4+细胞的分化导致胸腹水中Treg细胞的比例升高,同时伴随着CD8+T比例的下降,并可能因此影响到TIL中TCR Vβ亚家族的优势取用情况,且导致免疫耐受。
- 区裕升邵红伟吴凤麟黄树林肖兰凤
- 关键词：肿瘤调节性T细胞
- 晚期肺癌患者胸水及外周血中T细胞受体(TCR)Vβ亚家族表达的对比研究
- 2012年
- 目的探讨晚期肺癌患者(Ⅲ～Ⅳ期)胸水及外周血中T细胞受体Vβ亚家族的表达,比较二者的异同。方法收集2010年7月至2012年5月共89例临床诊断为肺癌晚期的患者胸水及外周血标本,采用流式细胞仪方法测定其T细胞受体Vβ亚家族的表达情况,统计分析胸水及外周血中Vβ亚家族表达的异同。结果 89例晚期肺癌外周血和胸水均主要高表达Vβ3和Vβ9,分别为Vβ3(16/89)、Vβ9(18/89)和Vβ3(20/89)、Vβ9(15/89);患者胸水与外周血Vβ亚家族存在差异,部分差异有统计学意义(P<0.05),部分差异无统计学意义(P>0.05),其中胸水中Vβ3的高表达相对于患者外周血和健康人差异均有统计学意义(P<0.05)。结论晚期肺癌患者胸水及外周血中Vβ亚家族的表达不全相同;晚期肺癌胸水中的高表达Vβ亚家族少于外周血,其中Vβ3在胸水中可能有特异性。此研究为晚期肺癌的生物治疗及T细胞过继免疫疗法在临床中的应用奠定理论基础。
- 郭宁宁陈敬生区裕升肖兰凤
- 关键词：晚期肺癌TCRVΒ基因外周血胸水
