刘燕
- 作品数：31 被引量：79H指数：7
- 供职机构：内蒙古民族大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区高等学校科学研究项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学文化科学生物学更多>>
- 浅谈食品科学与工程专业的教学改革被引量：7
- 2013年
- 培养食品专业大学生创新能力、技术能力和解决生产中遇到实际问题的能力是食品科学与工程专业教学改革的主要目标,因此提高大学食品专业学生这些能力,大学食品教学必须进行改革。本文基于就业能力为导向,提出从强化食品教学师资队伍、从食品专业课程内容的优化、实验教学内容的调整、实践性教学的探索等方面进行相应的改革与实践,以期达到增强学生就业竞争力的目的。
- 齐景凯锡林高娃刘燕
- 关键词：食品专业教学改革就业能力
- 构建生物技术专业实践教学体系 培养创新型人才被引量：4
- 2012年
- 本研究从生物技术专业建设的三个层次(完善教学大纲、加强教学平台建设、强化教学环节)和实践教学的三大环节(即实验、实习、科研活动)为立足点,构建生物技术专业的实践教学体系(即基本技能训练—专业能力训练—综合能力训练—创新能力训练),培养本专业创新型人才。
- 黄凤兰陈永胜张继星李国瑞范伟全耿学军刘海臣刘燕锡林高娃乌日汗
- 关键词：生物技术实践教学体系
- 牛乳腺炎无乳链球菌Pgk基因抗原优势区原核表达产物的抗原性分析被引量：1
- 2011年
- 为了探索牛乳腺炎无乳链球菌磷酸甘油酸激酶(Phosphoglycerate kinase,Pgk)基因编码蛋白的抗原性,根据GenBank公布的牛源无乳链球菌Pgk基因序列,设计并合成一对引物,通过PCR扩增出Pgk蛋白抗原优势区的编码序列,并对其进行克隆、测序、转化、诱导表达及抗原性鉴定。结果显示克隆的Pgk基因序列含有984 bp,编码328个氨基酸残基。临床分离株与GenBank上公布的B群无乳链球菌菌株Pgk基因(AE009948)核苷酸序列同源性为99.09%,氨基酸序列同源性为99.69%。将扩增的Pgk基因片段克隆至原核表达载体pET30a(+)中,构建重组表达载体Pgk-pET30a(+),再将筛选的阳性重组质粒转化至BL21工程菌,经IPTG诱导获得部分可溶性表达Pgk重组蛋白。经Ni2+亲和层析柱纯化得到纯度在90%以上的蛋白,经Western blot分析结果表明,重组蛋白具有良好的抗原性,为进一步探索其对奶牛的免疫原性研究奠定了良好的实验基础。
- 张海宝布日额吴金花王学理孙立杰唐吉思锡林高娃刘燕张忠祥
- 关键词：无乳链球菌原核表达抗原性
- 牛乳腺炎无乳链球菌菌毛岛屿辅助蛋白AP1基因的克隆及其表达产物的抗原性鉴定被引量：11
- 2013年
- 目的克隆与高效表达无乳链球菌细胞表面菌毛岛屿辅助蛋白AP1基因编码蛋白抗原优势区,并进行抗原性分析及鉴定。方法根据GenBank上公布的牛乳腺炎无乳链球菌辅助蛋白AP1(EU929387.1)基因序列,利用生物信息学学软件Primer5.0和DNA MAN,根据其辅助蛋白保守序列设计、合成1对克隆引物,以分离于内蒙古东部地区乳源性无乳链球菌临床菌株总DNA为模板,PCR扩增辅助蛋白AP1基因序列,经克隆与测序后构建重组表达载体AP1-pET30,转化大肠埃希菌BL21,并进行高效表达,目的蛋白经亲和层析纯化后进行Western blot鉴定。结果克隆的抗原表位序列片段大小为714bp,编码238氨基酸残基,与GenBank公布的AP1(EU929387.1)基因序列相似性为99.72%,氨基酸残基相似性为99.58%。构建的重组表达载体经诱导表达可溶性蛋白,纯化后重组蛋白的纯度>95%,Western blot分析重组蛋白能被牛源无乳链球菌阳性血清识别。结论成功构建了pET-30a-AP1重组表达载体,该载体能可溶性表达重组蛋白,表达产物具有良好抗原反应性,为进一步研究辅助蛋白AP1的结构、功能以及抗原表位的鉴定奠定了实验基础。
- 锡林高娃吴金花布日额刘洋刘洋刘燕王学理
- 关键词：抗原性
- 牛Ⅱ型链球菌vanB2基因真核表达质粒的构建及其在宫颈癌HeLa细胞中的表达被引量：1
- 2014年
- 目的构建牛Ⅱ型链球菌(Streptococcus bovis biotypeⅡ)van B2基因真核表达质粒,并在宫颈癌HeLa细胞中进行表达。方法以牛Ⅱ型链球菌基因组为模板,采用PCR法扩增van B2基因,克隆至真核表达载体pVAX-1中,构建重组表达质粒pVAX-1-van B2。采用FuGENE HD Transfection Reagent试剂盒将重组表达质粒转染HeLa细胞,转染48 h后,RT-PCR法检测转染细胞中van B2基因mRNA的转录;间接免疫荧光法和Western blot法检测转染细胞中van B2蛋白的表达。结果重组表达质粒pVAX-1-van B2经双酶切及测序鉴定构建正确;重组表达质粒转染HeLa细胞48 h后,荧光显微镜下可见绿色荧光表达,RT-PCR及Western blot分析分别可见570 bp及相对分子质量20 900的目的条带。结论成功构建了牛Ⅱ型链球菌van B2基因的真核重组表达质粒,并在HeLa细胞中成功表达。本实验为进一步研究牛Ⅱ型链球菌对抗生素的耐药性机制及其与van B2基因的相关性奠定了基础。
- 刘燕布日额锡林高娃白靓
- 关键词：VAN真核细胞
- 牛乳腺炎无乳链球菌表面蛋白pgk抗原优势区的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立被引量：12
- 2013年
- 为评价牛乳腺炎无乳链球菌重组表面蛋白(pgk)免疫原性,并通过建立检测抗体的间接ELISA方法对免疫抗体效价进行评价,本研究根据GenBank登录的无乳链球菌pgk基因序列,设计一对引物,以临床分离菌株基因组DNA为模板PCR扩增出pgk蛋白抗原优势区的编码基因序列。将其插入pET-30a(+)中,并在大肠杆菌中表达。Western blot鉴定表明,表达的重组蛋白与阳性血清具有良好的反应原性。采用纯化的表达产物作为包被抗原建立了检测无乳链球菌抗体的间接ELISA方法,确定抗原最佳包被浓度为3.115μg/mL,血清最佳稀释度为1∶160,酶标二抗最适稀释度为1∶4 000。初步应用于检测无乳链球菌、化脓性链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌小鼠阳性血清的检测。结果表明牛乳腺炎无乳链球菌pgk亚单位抗原具有良好的抗原性,抗体检测灵敏度达到1∶4 000,同时表现良好的特异性。
- 布日额任晓峰吴金花王学理刘燕锡林高娃孙立杰刘洋
- 关键词：无乳链球菌
- 免疫学教学改革的探讨被引量：4
- 2013年
- 免疫学是当今生命科学中一门重要的基础学科.该学科具有多交叉、知识量大、内容抽象和理论性强等特点,传统教学容易将有血有肉的立体化知识线性化罗列.通过改革教学方式,充分调动学生的兴趣,培养学生学习、思维、质疑的能力,从而提高教学质量.
- 刘燕张继星布日额
- 关键词：免疫学教学改革教学质量
- 牛源无乳链球菌sip蛋白抗原优势区的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立被引量：6
- 2011年
- 为测定牛源无乳链球菌表面免疫相关蛋白(sip)的抗原性,本实验通过建立间接ELISA方法,对该蛋白的抗原性进行分析及鉴定。根据无乳链球菌sip基因序列,设计一对引物,以临床分离菌株基因组DNA为模板,PCR扩增sip抗原表位优势区编码的基因序列,并将其与原核表达载体pET-30a(+)连接,构建重组质粒pET-sip,转化宿主菌BL21中,经IPTG诱导,获得重组蛋白,western blot分析表明,重组蛋白具有良好的抗原性。以纯化的表达产物作为包被抗原,建立检测无乳链球菌抗体的间接ELISA方法,确定抗原最佳包被浓度为3.125μg/mL,血清最佳稀释度为1∶160,酶标二抗最适稀释度为1∶4 000。应用该方法对无乳链球菌、化脓性链球菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌兔阳性血清进行检测,结果表明,该方法具有良好的特异性和灵敏度。
- 郎景民布日额孙立杰刘娣吴金花锡林高娃刘燕史芬芳
- 关键词：无乳链球菌原核表达间接ELISA
- DNAzyme在疾病治疗中的应用研究进展
- 2014年
- 脱氧核酶(DNAzyme)是一类具有多种催化功能的单链DNA分子,在多种疾病的基因治疗中显示出巨大潜力,尤其对肿瘤、病原微生物的作用有着广阔的应用前景和一定的临床实用价值。文章就DNAzyme的作用机理及其在抗疾病方面的研究现状等方面做一综述。
- 刘燕
- 关键词：DNAZYME疾病治疗肿瘤病毒
- 新型“超级细菌”的研究进展及防治被引量：4
- 2014年
- "超级细菌"是具有多重耐药性细菌的总称。新型"超级细菌"是指获得new delhi metallo-β-lactamase-1耐药基因的细菌。近来研究发现,携带编码NDM-1基因的耐药质粒不仅可以在细菌间转移,而且能使所在宿主菌成为可以抵御目前几乎所有抗生素的超级细菌,严重威胁着人类健康。文章就新型"超级细菌"的基本情况、耐药机制研究现状及防治措施,综述如下,并提出相关建议。
- 刘燕黄凤兰
- 关键词：耐药机制
