刘劲
- 作品数：9 被引量：21H指数：3
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- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学文化科学更多>>
- 家蚕尿酸氧化酶基因的克隆及其原核表达研究
- 尿酸氧化酶(UrateOxidase,UO，EC1.7.3.3)是生物体内嘌呤代谢的一个关键酶，可催化尿酸形成尿囊酸。大多数的原核和真核生物都有完整的尿酸氧化酶基因，产生具生物活性的尿酸氧化酶，以尿囊酸作为代谢最终产物。...
- 刘劲
- 关键词：家蚕尿酸氧化酶基因克隆原核表达
- 文献传递
- 家蚕谷胱甘肽-S-转移酶研究进展被引量：1
- 2010年
- 谷胱甘肽-S-转移酶在内外源有毒物质的代谢中起着重要作用。家蚕既是重要的经济昆虫,也是重要的模式生物。家蚕作为鳞翅目昆虫的模式生物,研究家蚕谷胱甘肽-S-转移酶,对于阐明谷胱甘肽-S-转移酶与杀虫剂抗性的关系,防治农林害虫有着重要的理论意义。本文就谷胱甘肽-S-转移酶在家蚕中的研究现状作了归纳,希望对今后谷胱甘肽-S-转移酶的研究能有所帮助。
- 刘劲房守敏赵敏余泉友
- 关键词：谷胱甘肽-S-转移酶抗药性害虫防治家蚕
- 烟草组织蛋白酶B基因的结构特征分析及mRNA表达被引量：1
- 2012年
- 为了明确烟草中组织蛋白酶B基因的功能,对烟草组织蛋白酶B基因(NbCathB)进行了序列分析。该基因ORF长951 bp,编码316个氨基酸。该基因蛋白质的预测分子量为35.2 kD,等电点为6.14。对NbCathB的基因结构分析显示,该基因具有8个外显子,外显子/内含子边界处均符合GT-AG规则。比较NbCathB和AtCathB基因,显示两者编码氨基酸序列一致性为61%。通过SMART软件分析,NbCathB和AtCathB基因的结构域很相似。在上清液、菌体、菌液以及水4种处理烟叶中的表达谱鉴定显示,在喷施MP制剂(巨大芽孢杆菌)菌体和菌液的烟叶中NbCathB的表达量明显高于在喷施MP制剂上清液的烟叶中的表达量,而在喷施水的烟叶中的表达量最低。说明NbCathB很可能发挥了AtCathB相同的作用。
- 赵敏汪长国刘劲寇明钰李宁吴艳戴亚夏庆友
- 关键词：烟草
- 家蚕尿酸氧化酶基因BmUo的克隆及其序列分析与原核表达被引量：2
- 2008年
- 尿酸氧化酶(urate oxidase;EC1.7.3.3)能够降解尿酸形成尿囊素,在嘌呤代谢途径中起到至关重要的作用。用生物信息学方法在家蚕基因组数据库中进行同源性检索,获得一条可能的家蚕尿酸氧化酶序列,根据预测序列设计引物及克隆、测序验证,已成功地克隆到家蚕尿酸氧化酶基因BmUo的完整ORF。克隆的cDNA(GenBank登录号:DQ189992)全长1088bp,ORF长1014bp,编码337个氨基酸残基,预测分子质量为38.18kD,等电点为6.90。通过半定量RT-PCR检测了该基因在各组织的表达情况,发现该基因的mRNA在5龄第3天的家蚕的脂肪体和马氏管中有表达。该基因在氨基酸水平上与果蝇、按蚊尿酸氧化酶的相似性分别为45.6%和51%,在第91个氨基酸残基处具有Asn-Ser-X-Val/Ile-Val/Ile-Ala/Pro-Thr-Asp-Ser/Thr-X-Lys-Asn的高度保守序列,这一序列在真核生物和原核生物中均广泛存在,可能与尿酸氧化酶的酶活性有关。家蚕尿酸氧化酶与其他38个物种尿酸氧化酶的聚类分析发现,尿酸氧化酶基因在昆虫、真菌、双子叶植物和哺乳动物这一层面上是相对保守的。将BmUo基因片段与pET-28a连接,构建原核表达载体pET-28a/uo,重组载体转化大肠杆菌BL21后,在37℃的培养条件下可检测到与理论分子质量相符的蛋白条带。
- 刘劲赵敏程廷才朱勇鲁成
- 关键词：家蚕尿酸氧化酶基因克隆原核表达
- 生命科学实验教学体系改革研究与实践被引量：2
- 2008年
- 以提高学生的科研创新能力为目标,以生命现象从微观到宏观为线索,构建全新的生命科学实验教学体系。文章对生命科学实验教学体系构建的指导思想、建设内容、建设成果等方面进行了详细的阐述,以期能为高校实验教学改革提供一定参考和借鉴。
- 谢洁刘劲常怀普左伟东徐水
- 关键词：生命科学实验教学体系
- 家蚕突变体的嘌呤代谢被引量：7
- 2005年
- 在昆虫中,尿酸不仅有排泄氮代谢废物的功能,还具有抗氧化的作用。普通的家蚕体壁由于尿酸的蓄积而不透明,而在没有尿酸蓄积的突变体中体壁却透明或半透明。有大约25个油蚕突变的形成与尿酸的生成、运输和蓄积相关。将油蚕作为研究尿酸代谢的模型,有助于阐明其他动物体内尿酸代谢的机制,对人的高尿酸血症和痛风的治疗及药物的开发有所帮助。
- 刘劲代方银朱勇鲁成
- 关键词：嘌呤代谢油蚕家蚕突变体氮代谢家蚕尿酸血症嘌呤
- 微生物制剂MP喷施烟叶后的差异蛋白分析被引量：3
- 2012年
- 为明确微生物制剂MP(芽孢杆菌)喷施烟叶后对其品质的影响,以喷施微生物制剂MP和清水的烟叶作为研究材料,采用蛋白质双向凝胶电泳法分析了烟叶中蛋白质的表达差异。结果显示,在MP制剂诱导烟叶后,有6个蛋白质的表达量发生了显著变化,其中5个蛋白点上调表达,1个蛋白点下调表达。利用基质辅助激光解析串联飞行时间质谱法(MALDI TOF/TOF MS)对这6个差异蛋白进行了分析,结果共鉴定出4个差异蛋白,分别为烟草酸性几丁质酶PR-P、烟草几丁质酶前体、内切几丁质酶A前体和逆渗透蛋白。几丁质酶和逆渗透蛋白与植物的抗病性密切相关,说明在喷施MP制剂后烟叶可能产生抵御外源病菌的应急机制并进而提高其抗病性。
- 赵敏汪长国刘劲寇明钰李宁吴艳戴亚夏庆友
- 关键词：烟叶双向凝胶电泳差异蛋白
- 家蚕sans fille基因的分子克隆及序列分析被引量：4
- 2006年
- 生物性别决定是由一组基因通过级联网络来调控。果蝇sans fille(snf)基因在其性别决定过程中具有重要作用。结合生物信息学与分子生物学实验,成功克隆了家蚕的snf基因(Bm snf基因)。克隆的Bm snfcDNA全长915 bp,ORF长630 bp,编码209个氨基酸。该基因推定蛋白质的预测分子量为24 kD,等电点为9.75。将Bm snf的cDNA与家蚕基因序列进行比对,结果表明该基因具有5个外显子,外显子/内含子边界处均符合GT-AG规则。比较家蚕snf和果蝇snf基因,显示两者编码氨基酸序列相似性为69.9%。通过SMART软件分析,家蚕snf和果蝇snf的RRM很相似。以上结果表明,家蚕snf很可能发挥了类似果蝇snf的作用。
- 赵敏刘劲朱虹查幸福夏庆友向仲怀
- 关键词：家蚕性别决定剪接因子
- 细胞生物学实验教学改革探索被引量：1
- 2008年
- 本文探讨了细胞生物学实验教学调整实验教学内容,优化实验组合;培养学生完成和设计实验的能力;启发引导,改变教学方式;规范实验要求,完善实验考核制度等几个方面的改革,充分将实验室资源利用起来,调动了学生学习的积极性,从而达到了提高学生综合素质的目的。
- 刘劲沈以红谢洁徐水
- 关键词：细胞生物学实验教学改革
