刘伟
- 作品数:16 被引量:60H指数:5
- 供职机构:浙江中医药大学更多>>
- 发文基金:浙江省医药卫生科学研究基金国家自然科学基金浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- G—CSF、AMD3100对大鼠间充质干细胞增殖、迁移和黏附能力影响的研究被引量:1
- 2012年
- 目的探讨粒细胞集落刺激因子(G—CSF)、AMD3100对大鼠间充质干细胞(MSCs)增殖、迁移和黏附的影响。方法采用MTT比色法、Transwell迁移法和黏附试验分别检测体外G—CSF、AMD3100对间充质干细胞的增殖、迁移和黏附能力的影响。结果在G—CSF质量浓度为200μg/L、AMD3100质量浓度为0.5mg/L时MSCs增殖能力最强;在G-CSF质量浓度为200μg/L、AMD3100质量浓度为0mg/L时MSCs迁移能力最强;在G-CSF质量浓度为200μg/L、AMD3100质量浓度为0.5mg/L时MSCs黏附能力最强。结论体外G—CSF对间充质干细胞的增殖、迁移和黏附能力呈促进作用,而AMD3100呈抑制作用。
- 董晖余勤刘丽珍王艳宣晓波王标单威周丽萍刘伟
- 关键词:粒细胞集落刺激因子AMD3100间充质干细胞增殖
- SDF-1/CXCR4轴通过调控间充质干细胞定向分化修复缺氧缺血性脑损伤被引量:11
- 2012年
- 目的:探讨基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)/CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)轴调控间充质干细胞定向分化、修复缺氧缺血性脑损伤的作用。方法:大鼠间充质干细胞(rat mesenchymal stem cells,rMSCs)经缺氧培养不同时点(0h、6h、12h、24h、48h、72h)或SDF-1α(10μg/L)孵育后,采用RT-PCR、Western blotting和流式细胞术检测其表面CXCR4表达的变化;建立大鼠缺氧缺血性脑损伤模型,运用RT-PCR和Western blotting检测造模后不同时点(1d、3d、5d、7d、14d、21d)大鼠脑部海马组织中SDF-1αmRNA转录和蛋白表达的改变情况;用AMD3100(CXCR4拮抗剂)拮抗rMSCs表面CXCR4后,免疫细胞化学和Western blotting检测rMSCs诱导向神经细胞分化中神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific eno-lase,NSE)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)等神经细胞特异性标志物的阳性率及表达变化情况。结果:低氧培养6 h及12 h的rMSCs CXCR4 mRNA及蛋白表达水平均较常氧培养组明显增加(P<0.01),10μg/L SDF-1α孵育后rMSCs的CXCR4表达水平明显增加(P<0.01);缺氧缺血性脑损伤模型的大鼠脑内SDF-1α蛋白表达显著增加(P<0.01);5 mg/L AMD3100处理后的rMSCs在向神经细胞诱导分化中NSE和GFAP蛋白的表达明显减少。结论:微小剂量的SDF-1α可诱导低氧培养的rMSCs表面CXCR4的表达,而在缺氧缺血性脑损伤模型的大鼠脑内SDF-1α表达增加,从而使SDF-1/CXCR4轴的生物学效应得以增强;CXCR4拮抗的rMSCs在分化中神经细胞特异性标志物NSE和GFAP的表达降低,表明SDF-1/CXCR4轴在rMSCs定向神经分化修复缺血缺氧脑损伤中具有重要的调控作用。
- 余勤林洁刘丽珍王艳宣晓波王标单威周丽萍刘伟
- 关键词:间充质干细胞基质细胞衍生因子-1ΑCXC趋化因子受体4
- 二甲基乙二酰基甘氨酸的新用途及间充质干细胞的分离方法
- 本发明属于生物技术领域,主要涉及二甲基乙二酰基甘氨酸的新用途及间充质干细胞的分离方法。本发明的目的在于提供二甲基乙二酰基甘氨酸用于制备上调骨髓组织缺氧诱导因子-1表达的药物、制备增加骨髓间充质干细胞数量的药物、制备动员间...
- 余勤刘丽珍刘伟
- 脯氨酸羟化酶抑制剂对小鼠间充质干细胞的动员作用被引量:3
- 2013年
- [目的]探讨脯氨酸羟化酶抑制剂——二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxaloylglycine,DMOG)对小鼠间充质干细胞(mouse mesenchymal stem cells,mMSCs)的动员作用。[方法]ICR小鼠随机分为对照组及3个DMOG动员剂量组(20、40、80mg·kg-1)。不同剂量的DMOG每天一次在固定的时间段腹腔内注射入ICR小鼠,对照组给予相同体积的生理盐水。采用流式细胞术与成纤维细胞集落形成单位法检测不同浓度DMOG处理后小鼠外周血与骨髓中MSCs数量,Western blotting法检测骨髓细胞中HIF-1α、SDF-1α及VEGF蛋白的表达,ELISA法检测骨髓上清及外周血清中SDF-1α及VEGF蛋白的浓度。[结果]流式细胞术与成纤维细胞集落形成单位法检测发现不同剂量的DMOG处理7d后小鼠外周血与骨髓中MSCs数量较对照组显著增加(P<0.05),且CD45-CD90+细胞群比例升高(P<0.05)。同时Western blotting法及ELISA法检测发现小鼠骨髓HIF-1α、SDF-1α表达上调,VEGF浓度升高(P<0.05)。[结论]DMOG对小鼠间充质干细胞具有动员作用,可能与通过上调HIF-1α,从而调控其下游相关通路有关。
- 刘伟余勤刘丽珍周丽萍胡韶君
- 关键词:缺氧诱导因子-1ΑHYPOXIAINDUCIBLE
- 二甲基乙二酰基甘氨酸的新用途及间充质干细胞的分离方法
- 本发明属于生物技术领域,主要涉及二甲基乙二酰基甘氨酸的新用途及间充质干细胞的分离方法。本发明的目的在于提供二甲基乙二酰基甘氨酸用于制备上调骨髓组织缺氧诱导因子-1表达的药物、制备增加骨髓间充质干细胞数量的药物、制备动员间...
- 余勤刘丽珍刘伟
- 中医养生康复医学与现代康复医学的关系
- 在我国古代,康复医学、养生学之间并无严格的界限,中医临床学的许多内容也涉及康复。从广义来看,中医养生学包含了预防养生与疾病养生两方面内容,后者又具有现代康复医学的康复宗旨,即使残疾者、老年病者、慢性病者更好地回归社会。只...
- 刘伟欧阳钦
- 豁痰健脾法治疗后半规管良性阵发性位置性眩晕临床研究被引量:6
- 2013年
- 目的:观察中医豁痰健脾法联合改良Epley复位法治疗后半规管良性阵发性位置性眩晕的临床疗效及安全性。方法:将128例单侧后半规管良性阵发性位置性眩晕痰湿脾虚证患者随机分为治疗组和对照组各64例,治疗组予以改良Epley复位法联合豁痰健脾法方药治疗,对照组予以改良Epley复位法联合倍他司汀治疗。观察2组患者的临床疗效、复发率,中医痰湿脾虚症状的改善情况和安全性。结果:治疗后3天、7天的有效率高于对照组(P<0.05);2组治疗后1月有效率比较,差异无显著性意义(P>0.05)。平均起效时间治疗组(1.11±0.35)天,对照组(1.30±0.38)天,2组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。2组治疗后3月治疗组复发3例,复发率为4.8%;对照组复发10例,复发率为16.1%;2组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。2组治疗前中医症状积分比较,差异无显著性意义(P>0.05);治疗组治疗后1月中医症状积分得到改善,与治疗前比较,差异有显著性意义(P<0.05);治疗后1月2组中医症状积分比较,治疗组低于对照组,差异有显著性意义(P<0.05)。治疗后1月,2组患者均未见明显的不良反应,血常规、肝肾功能均未见明显改变。结论:改良Epley复位法联合豁痰健脾法方药是治疗后半规管良性阵发性位置性眩晕安全有效的方法。
- 朱文宗郑国庆黄建平金永喜刘伟沈剑刚
- 关键词:管石复位法倍他司汀
- 豁痰健脾法治疗梅尼埃病的临床研究被引量:5
- 2012年
- [目的]探讨中医豁痰健脾法治疗痰湿型梅尼埃病的疗效。[方法]选择2009年3月至2012年3月就诊的128例痰湿型梅尼埃病患者;随机分为治疗组66例和对照组62例,治疗组以豁痰健脾法方药1贴/d,共7d;对照组62例以山茛菪碱10mg静脉滴注1/d次共7d;治疗时间观察患者的临床疗效、整体评分、复发率,对痰湿症状的改善情况等。[结果]治疗组的总有效率为95.5%,对照组为83.9%;两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。3个月复发率治疗组为4.7%,对照组为19.2%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05),治疗组可明显改善痰湿症状(P<0.01)。[结论]豁痰健脾法方药是治疗痰湿型梅尼埃病的安全有效的方法,值得推广应用。
- 朱文宗金永喜黄建平刘伟郑国庆
- 关键词:梅尼埃病中医疗法
- HIF-1α基因慢病毒载体的构建和鉴定
- 2012年
- [目的]构建带有大鼠HIF-1α基因的慢病毒表达载体,并进行病毒颗粒的包装与对293T的转染。[方法]从pEGFP-N1-HIF-1α载体中扩增出HIF-1α基因片段,将目的基因与pLenti6.3-MCS-RES2-EGFP载体连接,获得慢病毒表达载体pLenti6.3-HIF-1α-IRES2-EGFP,并用磷酸钙转染法将其与慢病毒包装系统共同转染到293T细胞内进行病毒包装,48h后收集上清液并过滤,按不同感染复数感染293T细胞,通过观察报告基因绿色荧光蛋白的表达来测定病毒滴度和感染效率。[结果]构建了共表达HIF-1α基因和EGFP基因的重组慢病毒载体pLenti6.3-HIF-1α-IRES2-EGFP,经PCR及测序结果证实,并对其成功包装出慢病毒,病毒滴度为4×106TU/ml。[结论]成功构建出HIF-1α基因重组慢病毒载体pLenti6.3-HIF-1α-IRES2-EGFP并能有效的包装出慢病毒。
- 王标余勤周丽萍付珊朱振洪单威刘伟胡韶君
- 关键词:HIF-1Α慢病毒载体293T细胞
- 转基因间充质干细胞与脑损伤
- 2012年
- 缺血缺氧性脑损伤是严重危害人类健康和生活质量的一大类疾病。随着细胞工程和基因工程技术的发展,利用转基因间充质干细胞重建损伤的脑组织、改善脑功能,从而达到治疗中枢神经系统疾病的目的,这具有广泛的科研和临床应用价值。
- 王标余勤单威周丽萍刘伟
- 关键词:转基因间充质干细胞脑损伤