严钦
- 作品数:6 被引量:3H指数:1
- 供职机构:复旦大学药学院更多>>
- 发文基金:上海市科学技术委员会科研基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生理学化学工程更多>>
- 磺基异硫氰酸苯酯化学辅助方法对新蛋白质进行从头测序被引量:1
- 2009年
- 利用基质辅助激光解吸电离-串联飞行时间(MALDI-TOF-TOF)质谱结合磺基异硫氰酸苯酯化学辅助的方法对一种从拟青霉(Paecilomyces bainier)分离纯化到的新人参皂苷Rb1水解酶的部分肽段进行了从头测序.共获得了这个新蛋白质8条肽段的序列,一些磺化后信噪比非常低的肽段也获得了比较完整的序列.同时通过从头测序分析确定了一对甲硫氨酸非氧化和氧化肽段的序列.结果表明,磺化后的肽段离子化效率大大增强,在PSD(源后裂解)过程中只有肽键断裂产生的C端的碎片离子系列(y离子系列)出现在质谱图中,图谱背景清晰,信噪比高,单纯的y离子系列使得图谱解析变得非常容易.将这8条序列在NCBI(美国国立生物技术信息中心)数据库中进行BLAST(蛋白质序列比对工具)检索印证这种β-葡萄糖甘酶是一个新蛋白质,发现的两条相对保守的序列为进一步研究奠定了基础.
- 周新文严钦周珮杨芃原
- 关键词:从头测序
- 拟青霉菌sp.229中人参皂苷β-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶学性质研究
- 拟青霉菌sp.229是本实验室从人参种植区土壤里分离筛选得到的菌株,经菌种诱变、筛选,它具有很强的人参皂苷β-葡萄糖苷酶活性,能将人参皂苷Rb1高效转化为CK。人参皂苷CK由于其良好的抗肿瘤活性而受到关注,但是目前还未见...
- 严钦
- 关键词:人参皂苷分离纯化生物转化代谢调控
- 文献传递
- 拟青霉菌一种人参皂苷β-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶学特性
- 从拟青霉菌sp.229中分离纯化得到一种能将人参皂苷Rb1专一性转化为人参皂苷Rg3的β-葡萄糖苷酶。该酶的分子量约为305KDa,由三个分子量约为102KDa的相同亚基组成。在pH3.5和55℃酶具有最佳的反应活性,在...
- 严钦周伟李幸慰冯美卿周珮
- 关键词:人参皂苷RB1人参皂苷RG3Β-葡萄糖苷酶纯化
- 文献传递
- 拟青霉菌一种人参皂苷β-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶学特性
- 从拟青霉菌 sp.229中分离纯化得到一种能将人参皂苷 Rb1专一性转化为人参皂苷 Rg3的β-葡萄糖苷酶.该酶的分子量约为305KDa,由三个分子量约为102KDa 的相同亚基组成.在 pH3.5和55 ℃酶具有最佳的...
- 严钦周伟李幸慰冯美卿周珮
- 关键词:Β-葡萄糖苷酶纯化
- 文献传递
- 一种分离纯化β-葡萄糖苷酶的方法
- 本发明涉及分离纯化β-葡萄糖苷酶的新方法,提供一种利用微晶纤维素分离纯化β-葡萄糖苷酶的方法。本方法以微晶纤维素作为β-葡萄糖苷酶的亲和柱层析介质,在低温和微酸性条件下,将β-葡萄糖苷酶上样并特异性吸附于微晶纤维素柱,然...
- 周珮严钦冯美卿李幸慰周伟
- 文献传递
- 一种利用微晶纤维素分离纯化β葡糖苷酶的方法被引量:1
- 2008年
- β葡糖苷酶(EC3.2.1.21)存在于许多植物、昆虫、酵母、霉菌及细菌体内,它参与生物体的糖代谢,能够水解结合于底物末端的非还原性β-D-葡糖苷键,释放出β-D-葡萄糖和相应的配基。在医药工业中,利用β葡糖苷酶的这种生物转化功能,可将某些广泛存在的天然产物转化为在自然界稀有甚至不存在的药物。
- 严钦周伟李幸慰冯美卿周珮
- 关键词:葡糖苷酶微晶纤维素分离纯化生物转化D-葡萄糖医药工业