郭彦昌 作品数:10 被引量:45 H指数:4 供职机构: 长沙市疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 长沙市科技局科技项目 长沙市科技计划项目 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
痰中结核分枝杆菌DNA提取方法的比较及在LAMP检测中的应用 被引量:1 2013年 目的:对5种DNA提取方法进行比对,为选择适用于痰中结核分枝杆菌DNA的提取方法提供依据。方法:采用PureLink genomic DNA kits(PLKm)、苯酚与氯仿法(PCm)、Chelex-100法(Cm)、磷酸盐缓冲液法(PBm)及硅珠法(SBm)5种方法提取痰标本中的DNA,对提取产物的浓度、纯度等技术指标进行分析,并对核酸扩增结果进行统计。结果:DNA浓度均值由高到低依次是PBm、Cm、PCm、SBm、PLKm,组间比较差异有统计学意义,两两比较发现PLKm与PCm、Cm、PBm之间差异有统计学意义,但Cm与SBm间的比较有统计学意义;5种提取方法的OD260:OD280比值均值与1.8的接近程度依次是PLKm、PCm、Cm、PBm、SBm,组间比较差异有统计学意义,两两比较发现除SBm与另外4种方法间存的差异具有统计学意义外,其余各组间的比较均无统计学意义;采用PLKm、PCm及Cm提取的产物均扩增出阳性结果,而PBm、SBm提取产物分别有18例和11例未获得阳性结果,经Mc-Nemar x2检验方法间的差异有统计学意义。结论:Chelex-100提取痰标本中结核分枝杆菌DNA是一种简便、省时、廉价适用于基层结核病实验室进行核酸检测的方法。 文岚 王孝君 郭彦昌 欧新华 张兵 田斌关键词:结核分支杆菌 DNA提取 ELISA在华支睾吸虫病高发区的应用评价 被引量:2 2016年 目的评价ELISA在华支睾吸虫病高发区的应用价值。方法分析ELISA和改良加藤厚涂片法检查华支睾吸虫病高发区人群感染情况。结果 ELISA与Kato-Katz结果比较差异有统计学意义,P=0.000;ELISA的灵敏度为99.68%,特异性为98.63%,约登指数为98.32%,粗一致性为99.10%,调整一致性为99.09%。结论ELISA作为筛检实验其灵敏度、特异性、约登指数、一致性等指标均可达到理想水平,与流行病学史和治疗史结合可更好的发挥快速和敏感特点,若与Kato-Katz联合应用可提高华支睾吸虫实验室诊断水平。 郭彦昌 何靖 曾苗关键词:华支睾吸虫 酶联免疫吸附试验 ELISA 改良加藤厚涂片法 5种前处理方法对痰中结核分枝杆菌DNA提取的影响 被引量:7 2013年 目的比较5种痰标本前处理方法,选择适用于基层结核病实验室痰中结核分枝杆菌DNA提取的痰标本前处理方法。方法分别采用DDT、NaOH、NALC-NaOH、Trypsin、Chymotrypsin等5种方法对所收集标本进行前处理,比较提取DNA模板的浓度、纯度和核酸扩增结果。结果经过5种前处理方法处理后,所提取DNA浓度(ng/μl)的最小值依次是27.30、4.10、9.30、18.60和14.80,最大值依次是84.10、40.20、26.10、111.00和159.00,均值依次是(52.84±19.17)、(16.69±12.72)、(14.38±4.57)、(48.65±25.75)和(53.79±46.27);以OD260/OD280的比值衡量DNA纯度,其最小值依次是1.75、1.60、1.64、1.60和1.62,最大值依次是1.86、1.85、1.79、1.88和1.84,均值依次是(1.80±0.29)、(1.66±0.88)、(1.74±0.40)、(1.76±0.86)、(1.73±0.74);16份已知阳性标本采用DDT、NALC-NaOH两种方法处理后扩增结果全部阳性,而采用NaOH、Trypsin、Chymotrypsin处理后分别出现了3、8和5份标本阴性。结论在基层结核病实验室,对拟进行结核分枝杆菌DNA提取的痰标本应首选二硫代苏糖醇进行前处理,其次选择N-乙酰-L-半胱氨酸-氢氧化钠。 文岚 张兵 郭彦昌 张如胜 欧新华 王孝君 田斌关键词:结核分枝杆菌 DNA提取 前处理方法 湘江长沙城区段血吸虫病疫情变化及水体安全性测定 被引量:1 2013年 目的观察湘江长沙城区段血吸虫病疫情变化与桔洲景区水域水体安全性。方法了解2003-2012年间实施的防治措施,调查洲滩钉螺分布和两岸居民、水上渔船民血吸虫感染率,采用哨鼠实验测定水体感染性。结果湘江长沙城区段2003年钉螺面积为471 hm2,2012年为28.81 hm2,下降了93.88%;11个有螺洲滩通过环境改造已有9个未查到活螺,其余2个活螺密度已降至0.006只/0.1 m2以下,并连续7年未查到感染性钉螺。桔洲景区原有钉螺孳生地已彻底改造,自2008年起连续5年未查到活螺,景区水域及其上游已无敞放家畜,哨鼠实验测定水体感染性已连续10年为阴性,2003年居民感染率为3.63%,2010年后未发现本地新感染病例。结论湘江长沙城区段血吸虫病疫情已达到传播控制标准,桔洲景区水体安全;但仍需加强血吸虫病疫情监测。 陈发明 申晓君 廖瑜 徐明忠 郭彦昌 吴敏泉 饶敏 王展新 郭雪飞 任光辉关键词:血吸虫病 风景区 发光二极管荧光显微镜在基层实验室诊断结核分枝杆菌的应用评价 被引量:7 2012年 目的评价发光二极管荧光显微镜(LED)在基层实验室诊断结核分枝杆菌的应用情况。方法收集中国卫生部-盖茨基金会结核病防治项目结核病新诊断工具可行性子项目(即发光二极管荧光显微镜应用评估项目)湖南省宁乡县项目点的相关数据,运用回顾性的研究对萋尔-尼尔逊(Z-N)和LED在痰涂片直接镜检结核分枝杆菌阳性检出能力、报告结果的差异及两种方法受痰标本性状的影响等方面进行分析。结果初诊病例通过不同的染色和镜检方法阅片,Z-N阳性检出率为21.38%(388/1 815),LED阳性检出率为22.42%(407/1 815),LED比Z-N提高1.05%(19/1 815);随访患者Z-N、LED及LED比Z-N提高的阳性检出率分别为2.62%(48/1 831)、3.66%(67/1 831)和1.04%(19/1 831);Z-N和LED在初诊病例和随访患者两部分人群检查结果差异有统计学意义(χ2=1 678.990、1 214.956,P<0.001);两种方法在阳性结果分级报告上差异有统计学意义,尤其表现在涂片结果以实际观察到细菌条数进行描述的和阳性等级为4+以上的痰涂片上,但两种镜检方法所评定的阳性分级报告结果一致性尚可(McNemar-Bowker检验,χ2=103.145,P<0.001,kappa=0.777);痰标本性状在一定程度上影响着Z-N和LED两种检查方法在初诊病例涂阳患者的发现,Pearsonχ2=56.707、57.549,P<0.001,但在随访患者中表现出的差异无统计学意义;初诊病例和随访患者留取痰标本的性状差异有统计学意义(Pearsonχ2=59.614,P<0.001)。结论 Z-N和LED两种检查方法一致性较好,且LED在一定程度上优于Z-N,在基层肺结核患者的发现和治疗检测上有一定的应用价值。 田斌 刘庆华 张才 郭彦昌 张兵 何靖 刘叶英 文岚关键词:结核分枝杆菌 长沙市湘江洲滩翻耕种植灭螺控制血吸虫病效果 被引量:15 2011年 目的研究适合长沙市湘江洲滩的灭螺方法,要求灭螺效果可靠,符合生态保护和可持续发展的原则。方法根据洲滩退水期早、适合秋种的特点,采用平整滩地、翻耕种植的方法灭螺,其中还对部分洲滩的下稀螺带先作降滩抬洲处理,然后平整滩地翻耕种植。结果从2003年起,已连续实施8年,至2011年单纯平整滩地翻耕种植的洲滩活螺平均密度下降了99.83%,降滩抬洲结合翻耕种植的洲滩活螺平均密度下降了100%。2006年居民血吸虫感染率为0.31%,下降了93.84%,2010年为1.03%。疫水测定结果均为阴性。结论单纯平整滩地翻耕种植可控制江滩钉螺密度,降滩抬洲可提高翻耕种植的灭螺效果。长沙市湘江洲滩经过连续8年耕种灭螺已控制了血吸虫病传播。 饶敏 刘明章 申晓君 陈法明 郭彦昌 刘智斌 罗超 廖瑜 汤大明 王展新 郭雪飞 卓尚炯关键词:血吸虫病 液化集菌法检查痰中结核分枝杆菌的应用评价 被引量:1 2013年 目的探讨使用糜蛋白酶"液化集菌"检查痰中结核分枝杆菌的应用价值。方法对56例拟诊肺结核病例的161份痰标本直接涂片和"液化集菌"后的沉渣滴冷冻玻片后分别进行ZN和金铵"O"染色,并将阅片结果进行统计分析。结果 "液化集菌"后取用沉渣滴片ZN染色的阳性率高于直接涂片ZN染色;"液化集菌"后取用沉渣滴片金铵"O"染色LED显微镜检查阳性率明显高于沉渣滴片ZN染色普通光学显微镜检查,χ2值为105.551和104.593,P=0.000。结论 "液化集菌"处理痰标本可以提高痰涂片检查结核分枝杆菌的敏感性,应用金铵"O"染色结合LED显微镜检查进一步扩大了这种优势。 文岚 田斌 陈发明 王孝君 郭彦昌 张兵 张如胜 欧新华关键词:显微镜检查 糜蛋白酶 显微镜检查痰中结核分枝杆菌最低检测限的统计推断及方法改进 2013年 目的利用模拟痰标本,评价直接涂片和"液化集菌"镜检痰中结核分枝杆菌的最低检测限。方法对不同稀释度的模拟痰标本"液化集菌"前后分别进行涂片和采用冷冻及室温存放载玻片滴片,并分别进行ZN和金铵O染色。直接涂片进行ZN和金铵O染色的结果分别命名为A、B组结果;采用冷冻载玻片ZN染色和金铵O染色的结果分别命名为C、D组结果;室温存放载玻片滴片ZN染色的结果命名为E组结果。结果 A/B/C/D四组涂(滴)片所对应的NC A-D均未检出结核分枝杆菌;A组涂片有2片次106稀释度和4片次107稀释度未检出结核分枝杆菌,合计6片次(6/54,11.11%);B/C/D三组涂(滴)片未出现未检出结核分枝杆菌的结果,但B组涂片结果为实际条数描述1+、2+、3+、4+的片次数分别为7、23、13、5、6,而C/D两组滴片分别为5、19、16、6、8和1、4、20、18、11。结论 "液化集菌"处理痰标本可以提高痰涂片检查结核分枝杆菌的敏感性,应用金铵O染色和LED显微镜检查进一步扩大了这一优势,采用冷冻后的载玻片滴片可以改善沉渣膜脱落现象,值得进一步进行研究分析。 文岚 孙边成 王孝君 张兵 郭彦昌 田斌关键词:结核分枝杆菌 荧光显微镜 糜蛋白酶 长沙市2007-2008年食品及公共场所从业人员乙肝表面抗原携带率分析 被引量:2 2009年 目的了解长沙市食品及公共场所从业人员乙肝表面抗原(HBsAg)携带情况,为该市乙肝防控提供依据。方法对2007—2008年长沙市从业人员健康体检资料进行统计分析。结果2007—2008年从业人员HBsAg阳性率分别为3.80%、3.27%,HBsAg阳性率男性为4.31%,女性为2.78%,性别差异有统计学意义(P〈0.001);不同年龄组中31~40岁年龄段为最高3.82%,51~岁以上为2.52%;2007—2008年二年HBsAg阳性率差异有统计学意义(P〈0.001)。结论长沙市食品及公共场所从业人员乙肝表面抗原(HBsAg)携带阳性率呈逐年下降趋势,反映在加强乙肝预防的健康教育、从业人员健康体检率提高、对易感人群进行乙肝疫苗接种所取得的成效,但保持人群低水平乙肝表面抗原(HBsAg)携带率仍需要加强乙肝预防的健康教育,提高乙肝疫苗接种率等干预措施。 刘萍 彭元 郭彦昌 田斌 朱玉英关键词:乙肝表面抗原阳性率 Xpert MTB/RIF检测系统对肺结核临床诊断病例的应用价值 被引量:10 2016年 目的评价Xpert MTB/RIF检测系统对肺结核临床诊断病例的应用价值。方法对296例肺结核临床诊断病例的同一痰标本分别进行BACTEC MGIT 960液体培养和Xpert MTB/RIF检测,以BACTEC MGIT 960液体培养病原学检测和药敏结果为金标准计算Xpert MTB/RIF检测系统的检验效能指标。结果 Xpert MTB/RIF检测系统与金标准存在的差异具有统计学意义(P<0.005),其病原学诊断灵敏度为84.9%(118/139),特异度为97.5%(153/157),筛查利福平耐药的灵敏度为85.2%(23/27),特异度为100.0%(91/91),一致性检验发现两种方法在病原学诊断和利福平药敏筛检的kappa值分别为0.829和0.899。结论 Xpert MTB/RIF检测系统用于肺结核临床诊断病例的实验室诊断和利福平耐药的筛检都不同于BACTEC MGIT 960检测系统,Xpert MTB/RIF检测系统借助其较高的灵敏度和特异度、快速和操作方便的优势,值得在中国结核病实验室推广应用。 田斌 王孝君 文岚 郭彦昌关键词:肺结核 利福平