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低强度脉冲超声波联合引导组织再生术促进牙周骨开窗缺损修复的动物实验被引量：9: 2011年; 目的探讨低强度脉冲超声波（low intensity pulsed uhrasound，LIPUS）联合引导组织再生术（guided tissue regeneration，GTR）对Beagle犬尖牙牙周骨开窗缺损的修复效应。方法构建4只Beagle犬尖牙颊侧区根中1／3处牙周骨开窗缺损模型。将4只Beagle犬的16颗双侧上、下颌尖牙（实验牙）按简单随机法平均分配为4组：①实验1组，LIPUS（60mW／cm^2，20min／d）处理＋GTR＋牙周骨质缺损组；②实验2组，LIPUS（60mW／cm^2，20min／d）处理＋牙周骨质缺损组；③实验3组，GTR＋牙周骨质缺损组；④空白对照组，牙周骨质缺损组。实验共进行28d。每14天分别测量各组处理前后实验牙牙龈表面温度，并行Wilcoxon符号秩和检验。4周后观察脱钙骨组织切片，分析各组尖牙牙周骨开窗缺损的组织学修复效果。结果临床观察各组实验牙牙周均愈合良好。各组处理前后的牙龈表面温度差值[M（Q）]分别为：实验1组：0．225（0．463）℃；实验2组：0．265（0．133）℃；实验3组：0．09（0．115）℃；空白对照组：-0．175（0．370）℃，实验1、2组每次处理前后温度变化差异均有统计学意义（P值均为0．027）。脱钙骨组织切片观察显示实验1组骨缺损内充满团状新生骨组织，成骨细胞增生活跃，骨胶原较成熟，Masson染色红染明显；实验3组新生牙骨质、牙槽骨较实验2组和空白对照组多，新生骨胶原成熟度不高，Masson染色呈红蓝相间；实验2组新生骨胶原成熟度较实验3组和空白对照组高，Masson染色红染明显；空白对照组可见少量新生牙骨质沿切迹处生长，新生骨胶原不成熟，Masson染色呈红蓝相间。结论LIPUS具有促进牙周骨开窗缺损修复的潜能，HPUS与GTR结合可能更利于牙周组织缺损的修复。; 郑鸿卢礼宋锦璘高翔邓锋王智彪; 关键词：引导组织再生低强度脉冲超声波

LIPUS联合GTR促Beagle犬尖牙牙周骨开窗缺损修复的研究: 目的:探讨LIPUS联合GTR对Beagle犬尖牙牙周骨开窗缺损的修复效应.材料和方法:构建5只Beagle犬尖牙颊侧区根中1/3处牙周骨开窗缺损模型(釉牙骨质界下4mm处,面积5×5mm2,约1-1.5mm深牙槽骨缺损...; 郑鸿宋锦璘卢礼高翔赵纯亮王智彪

转染猿猴空泡病毒40大T抗原基因无限增殖化大鼠牙囊细胞的实验研究被引量：1: 2012年; 目的以猿猴空泡病毒40大T抗原基因（simian virus 40 large tumor antigen，SV40Tag）转染SD大鼠牙囊细胞（rats’dental follicle cells，rDFC）构建无限增殖化rDFC，以期为牙周组织工程研究提供稳定的细胞来源。方法分离SD大鼠下颌第一磨牙牙胚，组织块法分离培养原代rDFC，免疫组织化学技术鉴定细胞来源。利用脂质体介导含有SV40Tag的质粒pSSR69-pAmpho转染293细胞，取病毒上清液感染rDFC，潮霉素筛选，阳性克隆扩大培养（无限增殖化组）；以未转染细胞作对照组，观察细胞形态，计算细胞群体倍增时间，绘制细胞生长曲线和倍增曲线。反转录聚合酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction，RT—PCR）检测rDFC中SV40Tag基因的表达，蛋白质印迹法检测端粒酶表达，计算平板克隆形成率，行软琼脂克隆形成实验及细胞致瘤性实验。对无限增殖化组和对照组细胞群体倍增时间采用两独立样本t检验，对两组细胞平板克隆形成率采用两独立样本率χ2检验。结果无限增殖化rDFC形态与正常rDFC形态无明显差别。无限增殖化rDFC中SV40Tag RT—PCR结果显示在357bp处有一条特异扩增条带，未转染细胞未见条带，无限增殖化rDFC端粒酶表达显著高于正常细胞。两组rDFC生长曲线无明显差异，倍增曲线显示无限增殖化组rDFC保持了较强的增殖能力。无限增殖化rDFC平板克隆形成率[34％（33／96）]高于对照组[22％（21／96）]，但差异无统计学意义（χ2=3．71，P〉0．05），软琼脂内不能形成克隆；两组细胞致瘤性实验均未见肿瘤形成。结论SV40Tag基因无限增殖化rDFC能在体外长期培养并多次传代，具有相对稳定的增殖特性和功能状态，为良性转化，有望进一步应用于牙周组织工程研究。; 周洁刘婷郑鸿宋锦璘邓锋; 关键词：牙囊猴病毒40

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