郑权
- 作品数：2 被引量：19H指数：2
- 供职机构：中国人民解放军第一军医大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用两步氯化钙转化法高效制备双自杀基因重组腺病毒被引量：3
- 2003年
- 目的构建巨细胞病毒(CMV)启动子驱动下的双自杀基因重组腺病毒。方法应用PCR扩增出CD和TK基因,经适当改造后插入pAdtrack CMV中构建成转移质粒pAdtrack CMV-CDTK,经酶切线性化后,转化用氯化钙制备的感受态AdEasier-1细菌,获得重组腺病毒质粒。最后将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞包装获得重组腺病毒,滴度测定后,体外感染血管内皮细胞ECV304。结果PCR检测表明已成功构建了含CD、TK融合基因的重组腺病毒,为进一步开展肿瘤的双自杀基因治疗研究奠定了基础。结论应用改进后的AdEasy系统构建腺病毒相比于传统AdEasy系统,方法更简便、成功率更高、实验周期更短。
- 郑权黄宗海汤福祥黄媛媛车小燕
- 关键词：基因治疗
- 应用改进的AdEasy系统制备重组腺病毒被引量：16
- 2003年
- 目的改进AdEasy系统,使之更简便、高效、快捷。方法pAdtrack经酶切线性化后,转化经氯化钙处理的感受态AdEasier-1细菌,获得重组腺病毒质粒。最后将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞包装获得重组腺病毒。荧光显微镜下细胞中重组腺病毒观察绿色荧光蛋白的表达。结果应用氯化钙法由pAdtrack转化AdEasier-1细菌,可获得极高比例的(20/20)阳性重组腺病毒克隆。结论应用改进后的AdEasy系统构建腺病毒相比于传统AdEasy系统,方法更简便、成功率更高、实验周期更短、对实验室的条件要求低。
- 汤福祥郑权黄宗海张庆国车小燕
- 关键词：腺病毒
