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文献类型

  • 2篇期刊文章
  • 2篇会议论文
  • 1篇学位论文

领域

  • 5篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 3篇HBX
  • 2篇乙型肝炎病毒
  • 2篇重组腺病毒
  • 2篇细胞
  • 2篇腺病
  • 2篇腺病毒
  • 2篇肝癌
  • 2篇肝炎病毒
  • 2篇SHRNA
  • 1篇蛋白
  • 1篇乙型
  • 1篇乙型肝炎
  • 1篇乙型肝炎病毒...
  • 1篇增殖
  • 1篇上调
  • 1篇启动子
  • 1篇细胞增殖
  • 1篇肝癌细胞
  • 1篇肝细胞
  • 1篇肝细胞肝癌

机构

  • 5篇重庆医科大学
  • 1篇重庆医科大学...

作者

  • 5篇邹程程
  • 4篇汤华
  • 4篇盛艳蕊
  • 3篇李凯
  • 3篇王森
  • 1篇秦栋栋
  • 1篇曲嘉琳
  • 1篇王森
  • 1篇刘正淑

传媒

  • 2篇中华医学会第...
  • 1篇重庆医科大学...
  • 1篇医学分子生物...

年份

  • 1篇2014
  • 3篇2013
  • 1篇2012
6 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
HBs-shRNA重组腺病毒构建及鉴定
目的构建表达HBV S区短发卡RNA(shRNA)的重组腺病毒,并在体外验证其干扰效果方法(1)从真核表达载体pGenesil-HBs-shRNA中酶切得到U6启动子及S区shRNA片段。构建穿梭质粒pAdTrack-C...
张靖南邹程程曹漪伊盛艳蕊王森张云栋汤华
HBx-shRNA重组腺病毒的构建及功能鉴定
2013年
目的:构建携带绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)标签的乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)特异性shRNA重组腺病毒,并对其干扰效果进行鉴定。方法:将前期构建的真核表达载体pGenesil-1-HBx-shRNA和pGenesil-1-Scramble sequence的表达启动子U6连同shRNA亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV,构建pAdTrack-CMV-U6-HBxshRNA和对照pAdTrack-CMV-U6-Scramble sequence穿梭质粒;酶切及DNA测序鉴定后,经PmeⅠ线性化后转化入感受态AdEasier细菌,获得重组腺病毒质粒pAd-U6-HBx-shRNA和pAd-U6-Scramble sequence,PacⅠ酶切后转染AD293细胞获得重组腺病毒Ad-U6-HBx-shRNA和Ad-U6-Scramble sequence;扩增病毒,测定滴度;以RT-PCR和real-time PCR鉴定重组腺病毒Ad-U6-HBx-shRNA对HBx的干扰效果。结果:酶切鉴定得到阳性pAd-U6-HBx-shRNA和pAd-U6-Scramble sequence重组质粒;转染到AD293细胞并包装成功;RT-PCR以及real-time PCR表明,重组腺病毒Ad-U6-HBx-shRNA携带的干扰片段能够明显干扰HBx表达(P=0.01)。结论:成功构建了HBx特异性shRNA重组腺病毒Ad-U6-HBx-shRNA,它能抑制HepG2.2.15细胞中的HBx的表达,为研究HBx作为肝癌基因治疗作用的一个靶点以及机制奠定基础。
刘正淑李凯邹程程王森盛艳蕊汤华
关键词:重组腺病毒乙型肝炎病毒X蛋白SHRNA肝细胞肝癌
HBV通过上调miR-181a表达促进肝癌细胞的增殖
目的:  研究HBV促进miR-181a表达的机制,以及miR-181a上调对肝癌发生发展的影响。  方法:  1.运用qRT-PCR比较HepG2和HepG2.2.15细胞及表达HBV腺病毒感染后的HepG2细胞(Ad...
邹程程
关键词:乙型肝炎病毒肝癌细胞细胞增殖
HBx-shRNA重组腺病毒的构建及功能鉴定
目的构建携带绿色荧光蛋白(EGFP)标签的HBx特异性shRNA重组腺病毒,并对其干扰效果进行鉴定。方法将前期构建的真核表达载体pGenesil-1-HBx-shRNA和pGenesil-1-Scramble seque...
曹漪伊李凯邹程程张靖南盛艳蕊王森张云栋汤华
HBx及HBs调节RhoC启动子机制的研究
2012年
目的探讨HBx(hepatitis B virus X protein)及HBs(hepatitis B virus S protein)对RhoC启动子的作用机制,分析可能相互作用的启动子调控元件。方法构建RhoC启动子截短突变克隆,双荧光素酶报告分析系统(the dual-luciferase reporter assay system)检测RhoC启动子相对荧光素酶活性,通过分析启动子相对活性变化进而筛寻到起调控作用的启动子区段。过表达Ets-1转录因子,检测RhoC启动子相对荧光素酶活性。结果①成功构建了5个RhoC启动子截短变异克隆。②分别在HepG2细胞和HepG2.2.15细胞中验证了RhoC截短变异启动子活性,确定了起关键作用的启动子区段(-491bp~-320bp、-124bp~-58bp)。③HepG2细胞中分别过表达HBx及HBs,发现启动子区段-491bp~-320bp及-187bp~-124bp可以被HBx及HBs调控。④文献检索结合软件分析这些启动子区段序列,找到了高度相关的转录因子Ets-1、NF-κB、Sp1等。⑤荧光素酶检测和Real-time PCR初步验证了转录因子Ets-1对RhoC的调控作用。结论HBx及HBs可能通过Ets-1等转录因子调控RhoC启动子进而上调RhoC启动子活性。
秦栋栋李凯曲嘉琳王森邹程程盛艳蕊汤华
关键词:HBXHBSRHOC启动子
共1页<1>
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