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谭老喜

作品数:4 被引量:2H指数:1
供职机构:海南大学环境与植物保护学院更多>>
发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 4篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 3篇束顶病
  • 3篇束顶病毒
  • 3篇香蕉
  • 3篇香蕉束顶病
  • 3篇香蕉束顶病毒
  • 2篇抗血清制备
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白质相互作...
  • 1篇多克隆
  • 1篇多克隆抗体
  • 1篇叶片
  • 1篇原核表达
  • 1篇提纯
  • 1篇香蕉叶
  • 1篇香蕉叶片
  • 1篇酶联
  • 1篇酶联免疫
  • 1篇酶联免疫吸附
  • 1篇酶联免疫吸附...
  • 1篇免疫

机构

  • 4篇海南大学
  • 3篇中国热带农业...

作者

  • 4篇谭老喜
  • 3篇王健华
  • 3篇张雨良
  • 3篇刘志昕
  • 3篇周朋
  • 3篇章绍延
  • 1篇余乃通
  • 1篇张秀春
  • 1篇王洪星

传媒

  • 2篇热带作物学报
  • 1篇植物研究

年份

  • 3篇2013
  • 1篇2012
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
感染BBTV香蕉叶片cDNA文库的构建及评价
2013年
为了研究香蕉束顶病毒与香蕉寄主致病的互作分子机制,本文报道利用Make Your Own"Mate&Plate" Library System试剂盒成功构建感染BBTV香蕉叶片的cDNA文库。通过改良CTAB法提取感染BBTV香蕉叶片的总RNA,采用SMART法反转录合成双链cDNA,经靳,酶切并去除短片段之后,与经同样酶切的pGADT7-SfiI载体连接,利用电转法将重组载体转化到大肠杆菌宿主细胞中,获得初级cDNA文库,最后以初级文库100万克隆为基数扩增,得到扩增文库并提取质粒。结果得到库容量大于2.0X10。的初级文库,检测表明文库cDNA插入片段长度主要分布在700—2000bp,文库重组率为87.5%。结果表明,该文库质量较好,可用于后续酵母双杂交互作蛋白筛选试验,本研究为开展病毒与寄主互作的研究奠定基础。
谭老喜张雨良周朋章绍延王健华张秀春刘志昕
关键词:香蕉束顶病毒香蕉叶片
香蕉束顶病毒Haikou2分离物DNA2编码框原核表达及抗血清制备
2012年
香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV)是危害香蕉的主要病毒之一,严重威胁着香蕉的生产。BBTV基因组至少由6个环状ssDNA组分组成,其中DNA2组分变异最大,是否编码蛋白及其功能缺乏研究。本研究通过PCR方法克隆了BBTV Haikou2 DNA2 ORF,将其构建到pET32a载体中,进行原核表达和抗血清制备。结果表明重组表达载体pET32a-DNA2ORF在表达菌Transetta(DE3)中表达一个约21 ku的特异融合蛋白,通过超声波破碎仪破碎细胞和诱导条件优化,分析表明,该蛋白主要以可溶形式存在,最佳表达条件为30℃、1.0 mmol/L IPTG诱导3 h。融合蛋白经过Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析纯化,免疫家兔制备出抗血清。Western blot实验表明抗血清具有特异性;酶联法(ID-ELISA)测定表明,抗血清效价达到25 000,能够检测出香蕉汁液中加入的0.954μg/mL浓度的表达纯化蛋白。
谭老喜王洪星张雨良王健华章绍延周朋余乃通刘志昕
关键词:原核表达抗血清制备
BBTV DNA5编码蛋白与寄主互作因子的筛选及初步鉴定
香蕉束顶病(Banana bunchy top disease,BBTD)是香蕉重要的毁灭性病害之一,对世界香蕉生产构成普遍威胁。引起该病的病原是香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV),...
谭老喜
关键词:香蕉束顶病毒酵母双杂交蛋白质相互作用
文献传递
辣椒环斑病毒提纯及抗血清制备被引量:2
2013年
为获得高效、灵敏的辣椒环斑病毒(Chilli ringspot virus,ChiRSV)多克隆抗体,通过差速离心、密度梯度离心等方法首次对辣椒环斑病毒进行了分离纯化,并将获得的高纯度病毒粒子用于免疫新西兰大白兔,制备了该病毒的多克隆抗血清。获得的抗血清经间接法酶联免疫吸附测定(ID-ELISA),效价高达1∶125 000,且特异性高,与黄灯笼辣椒中另一种亲缘关系很近的同属病毒辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,ChiVMV)不发生血清交叉反应、可有效鉴别这2种Potyvirus病毒。获得的抗血清可用于ChiRSV的检测及后续实验,最适工作浓度在1∶5 000~1∶25 000之间。
章绍延王健华谭老喜周朋张雨良刘志昕
关键词:提纯多克隆抗体酶联免疫吸附测定
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