许玉娇
- 作品数：7 被引量：31H指数：3
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 一种高效表达儿茶素的基因工程菌及其构建方法和应用
- 一种高效表达儿茶素的基因工程菌及其构建方法和应用。本发明公开了一种高效表达儿茶素的基因工程菌，携带有二氢黄酮醇4-还原酶(DFR)、无色花色素还原酶(LAR)两种外源基因，能够用于高效生成儿茶素。
- 王云生胡晓婧夏涛高丽萍许玉娇
- 文献传递
- 茶树二氢黄酮醇4-还原酶基因的克隆、表达及功能分析被引量：5
- 2013年
- 茶树二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reductase,DFR)是儿茶素合成途径中的关键酶。本研究采用RT-PCR技术,获得了茶树二氢黄酮醇4-还原酶基因(CsDFR)的开放阅读框,它编码含347个氨基酸的蛋白质,推测分子量为38.69 kD,等电点为6.02。成功地将该基因重组到表达载体SUMO上,并在大肠杆菌BL21中进行原核表达;优化了原核表达中诱导时间、诱导温度、IPTG浓度;纯化出目的蛋白。利用HPLC-MS方法对重组蛋白进行了体外酶活检测,结果表明目的蛋白具有DFR酶活性,可催化DHQ和DHM的还原反应。
- 王云生许玉娇胡晓婧蒋晓岚杨琴李伟伟刘亚军高丽萍夏涛
- 关键词：茶树原核表达酶活性
- 茶树肉桂酸4-羟基化酶基因的克隆及表达分析被引量：11
- 2015年
- 肉桂酸4-羟基化酶(Cinnamate 4-hydroxylase,C4H)是茶树苯丙烷代谢途径中的关键酶,能够影响木质素和类黄酮等次级代谢物的生物合成。本文采用5′-RACE技术,克隆了茶树肉桂酸4-羟基化酶基因(Cs C4H)的全长序列,其中开放阅读框长1 518 bp,编码505个氨基酸,推测蛋白分子量为58.15 k D,理论等电点为9.29。利用基因组步移技术克隆得到该基因上游1 840 bp的启动子序列。该启动子区域除了分布有TAAT-box和CAAT-box等基本转录元件外,还存在多个诱导型和组织特异型的顺式作用元件。实时荧光定量PCR结果表明该基因在芽、叶、茎、根中都有表达。将该基因重组至表达载体p YES-DEST52上,并在酿酒酵母WAT11中进行真核表达。利用LC-MS方法检测酶反应产物,结果表明目的蛋白能够催化肉桂酸生成p-香豆酸。
- 姚胜波王文钊李明卓许玉娇王云生刘亚军高丽萍夏涛
- 关键词：茶树启动子真核表达
- 一种酿酒酵母基因工程菌株以及此菌株的构建方法和生产圣草酚或五羟黄酮的方法
- 本发明公开了一种酿酒酵母基因工程菌株以及此菌株的构建方法和生产圣草酚或五羟黄酮的方法，所公开的菌株携带有CZyF3’5’H基因。本发明公开的菌株可以用于高效表达CZyF3’5’H类黄酮-3’，5’-羟基化酶用来生产圣草酚...
- 王云生许玉娇夏涛高丽萍胡晓婧
- 文献传递
- 一种酿酒酵母基因工程菌株以及此菌株的构建方法和生产圣草酚或五羟黄酮的方法
- 本发明公开了一种酿酒酵母基因工程菌株以及此菌株的构建方法和生产圣草酚或五羟黄酮的方法，所公开的菌株携带有CZyF3’5’H基因。本发明公开的菌株可以用于高效表达CZyF3’5’H类黄酮-3’，5’-羟基化酶用来生产圣草酚...
- 王云生许玉娇夏涛高丽萍胡晓婧
- 文献传递
- 茶树类黄酮-3’,5’-羟基化酶的功能分析
- 类黄酮3’,5’-羟化酶(flavonoid3’,5’-hydroxylase，F3’5’H)是茶树黄烷-3-醇合成中的重要酶类。F3’5’H属于CYP75A亚家族，可以分别催化黄酮、黄烷酮、二氢黄酮醇和黄酮醇转化为3’...
- 许玉娇
- 关键词：茶树异源表达酶活分析信号肽
- 文献传递
