胡国库
- 作品数：10 被引量：53H指数：4
- 供职机构：四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家科技部专项基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 黄芩中黄芩苷提取工艺的研究被引量：32
- 2007年
- 目的探讨黄芩中黄芩苷的最佳提取工艺。方法选取温浸法、煎煮法、加碱温浸法中较佳方法,考察粒度、次数、提取时间和次数、分离方式等因素对黄芩苷收率的影响。结果煎煮法效果优于其他两种方法,煎煮法提取黄芩苷的最佳工艺条件为:粒度40目,煎煮2次,物料比1∶10和1∶5,时间60min和30min,双层滤布过滤再离心分离,70℃保温60min,酸沉静置3h抽滤,50%乙醇洗涤2次,干燥得黄芩苷产品。黄芩苷收率可达13.67%,其含量为85.7%,黄芩苷在pH3.98低温水浴液中性质较稳定。结论该实验结果为大规模提取生产黄芩苷提供理论依据。
- 雷泞菲彭书明周嘉峪胡国库刘然陈放
- 关键词：黄芩黄芩苷稳定性
- 黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)α-淀粉酶cDNA的克隆及其表达
- 黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)的基因组序列及其基因预测结果显示,该菌基因组中有5个α-淀粉酶基因。根据其中1个α-淀粉酶基因序列,利用RT-PCR方法克隆到编码该淀粉酶的cDNA...
- 吴波胡国库冯红吴近名张义正
- 关键词：黄孢原毛平革菌RT-PCR
- 文献传递
- 用抑制消减杂交技术研究惊恐致肾虚小鼠差异表达基因被引量：9
- 2004年
- 目的 用抑制消减杂交技术研究惊恐致肾虚及中药金匮肾气丸治疗后小鼠的差异表达基因。方法 实验分模型组、治疗组和对照组 ,通过“猫吓鼠”法与“水面悬吊应激”法相结合建立小鼠肾虚证动物模型 ,对治疗组小鼠进行中药金匮肾气丸的治疗。应用SMART(SwitchMechanismAt 5endofRNATemplate)技术逆转录并扩增以获取造模及治疗前后小鼠血液的全长总cDNA ;运用正向和反向抑制消减杂交技术获得正反 2个方向、3种状态下 (肾虚、治疗后以及正常生理状态 )的 6组差异表达cDNA片段 ,进而获得了 6个cDNA文库。结果 获得 6个cDNA文库 ,为大规模鉴定、筛选靶基因奠定了基础。结论 惊恐所致肾虚与一些基因的差异表达相关 ,而中药金匮肾气丸能影响这种改变 ,使其差异表达基因谱趋近于正常生理状态。
- 王刚胡国库王米渠张义正
- 关键词：恐伤肾SMART技术抑制消减杂交基因差异表达
- 应用抑制消减杂交研究惊恐致肾虚及金匮肾气丸治疗后小鼠的差异表达基因(英文)被引量：5
- 2006年
- 背景:中药金匮肾气丸能改善肾虚症状,但其分子机制还不清楚。目的:用抑制消减杂交技术观察惊恐致肾虚及中药金匮肾气丸治疗后小鼠的差异表达基因。设计:随机对照动物实验。单位:成都中医药大学中医遗传学研究室,四川大学生命科学学院分子生物学与生物技术四川省重点实验室。材料:实验在成都中医药大学实验动物中心进行。取BALB/c雄性成年小鼠30只,单纯随机分为模型组、药物治疗组和对照组3组,每组10只小鼠。方法:模型组和药物治疗组小鼠应用“恐伤肾”法和悬吊应激法制备肾虚鼠模型。药物治疗组小鼠每天灌服金匮肾气丸(北京同仁堂制药厂生产,由桂枝、附子、熟地、山药、山茱萸、泽泻、茯苓、丹皮等组成)1次,给药剂量按成人用药量的20倍。造模及给药时间总共为14d。对照组小鼠自然生长,不施加任何外界刺激。最后一次给药后24h,3组小鼠均取血100μL,应用SMART技术反转录并扩增以获取各组小鼠血液的全长总cDNA;运用正向和反向抑制消减杂交技术获得正反两个方向、3种状态下(肾虚、治疗后以及正常生理状态)的6组差异表达cDNA片段。主要观察指标:金匮肾气丸对肾虚小鼠基因表达的影响。结果:①各组均有差异表达的cDNA片段;中药治疗后,肾虚小鼠的差异基因表达谱有向正常生理状态下接近的趋势;用同一种cDNA作为抑制消减杂交的tester和driver,同源片段全部被消减掉,消减效率较高。②获得了6个cDNA文库。结论:惊恐所致肾虚与一些基因的差异表达相关,而中药金匮肾气丸能影响这种改变,使其差异表达基因谱趋近于正常生理状态。
- 王刚胡国库张义正王米渠
- 关键词：惊恐
- 性逆转石斑鱼脑垂体差异表达基因克隆的筛选被引量：3
- 2003年
- 以 1 7 α甲基睾丸酮投喂赤点石斑鱼 (Epinephelusakaara) ,成功地获得了性逆转的有功能的雄鱼。用SMARTcDNA合成和长片段PCR技术构建了性逆转前后脑垂体cDNA文库 ;用抑制消减杂交技术建立了性反转前后抑制性差减文库。对获得的 5 60个雄鱼脑垂体PCR阳性克隆和35 0个雌鱼脑垂体PCR阳性克隆进行斑点杂交 ,共筛选到 1 0 3个差异表达cDNA片段。对其中2 9个克隆进行了测序 ,与GenBank中的已知基因序列进行同源性比较 ,发现有 6个片段为促性腺激素α亚基前体基因 (GenBank注册号 :AY2 0 7430 ) ,与同属不同种的石斑鱼促性腺激素α亚基前体基因有 97%的同源性 ;1个片段为生长激素前体 (GenBank注册号 :AY2 0 7431 ) ,与同属不同种的石斑鱼生长激素前体基因有 99%的同源性 ;其余 2
- 胡国库张义正庞岚文建军
- 关键词：性逆转石斑鱼脑垂体基因克隆抑制消减杂交CDNA合成
- 黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶基因(lipC)转录调控因子的研究
- 黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)是研究木质素生物降解的模式生物,它产生的6种木质素过氧化物酶(LiP)是降解木质素的主要酶类之一。前期研究工作发现,在lipC 5’-端有2个蛋白质...
- 胡国库冯红吴波张义正
- 关键词：黄孢原毛平革菌酵母单杂交基因表达大肠杆菌
- 文献传递
- 黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶基因（lipC）转录调控因子的研究
- 黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)属于白腐担子真菌，是研究木质素生物降解的模式生物，因其具有出色的降解木质素的能力，而且对环境中的有毒物质、爆炸污染物等也有降解作用，因此P.chry...
- 胡国库
- 关键词：黄孢原毛平革菌转录因子木质素过氧化物酶基因
- 性逆转石斑鱼脑垂体差异表达cDNA克隆的筛选及其表达研究
- 以17-α甲基睾丸酮投喂赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)，成功地获得了性逆转的有功能的雄鱼。用SMART cDNA合成和长片段PCR技术构建了性逆转前后脑垂体cDNA文库;用抑制消减杂交技术建立了石斑鱼...
- 胡国库
- 关键词：石斑鱼性逆转垂体抑制消减杂交RT-PCR分析
- 文献传递
- 黄孢原毛平革菌酵母双杂交cDNA文库的构建及应用被引量：4
- 2006年
- 作为研究木质素降解系统的模式微生物黄孢原毛平革菌,迄今还没有蛋白-蛋白相互作用方面的报道.本研究利用酵母双杂交技术构建了低氮培养基中培养2d和3d的酵母双杂交cDNA文库,分别得到2.5×105和3.0×105个重组子.以14-3-3蛋白为钓饵筛选3d cDNA文库,在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp缺陷培养基平板上共获得了约600个单克隆,进一步分析发现,有30个克隆可激活3个报告基因.分离自这些克隆中的质粒DNA能转化大肠杆菌.利用HaeⅢ和Sau3AⅠ限制酶切分析可将它们分为4类.序列测定和同源分析结果表明,其中一类为14-3-3蛋白基因,提示14-3-3蛋白可形成二聚体,另外3类在GenBank没有明显同源的基因.通过SBASE网站预测,编号为Y2H333的克隆含有一个OB-fold核酸结合结构域(OB-fold nucleic acid binding domain).这些研究结果表明,所构建的黄孢原毛平革菌cDNA酵母杂交文库是成功的,14-3-3蛋白在黄孢原毛平革菌中能以蛋白-蛋白相互作用的形式发挥功能.
- 胡国库颜永红姜权吴波冯红张义正
- 关键词：黄孢原毛平革菌酵母双杂交CDNA文库
- 黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)环氧化物水解酶的克隆及酶学性质分析
- 环氧化物水解酶(Epoxide Hydrolases EC3.3.2.3)是一类催化环氧化物水解生成相应的邻二醇的酶的总称,广泛存在于各种生物体内。微生物来源的环氧化物水解酶可应用于手性环氧化物的动力学拆分以获得光学纯的...
- 李念胡国库张义正冯红
- 关键词：黄孢原毛平革菌克隆酶学性质
- 文献传递
